楊志強,李瀟軒,李志輝,陳建清,尹陸樂,朱天,韓飛,潘建林
(江蘇省淡水水產研究所,江蘇 南京 210017)
近年來單位水體中水產養(yǎng)殖總量呈現逐年上升的態(tài)勢,但隨之而來卻是養(yǎng)殖動物大規(guī)模爆發(fā)疾病的概率增加。中草藥及其提取物已經成為預防、治療水產動物疾病的主要藥物之一,其代替抗生素已然成為趨勢[1]。黃芪多糖(astragalus polysaccharides,APS)是黃芪的主要活性成分之一,提取自中藥黃芪,由阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖等組成,具有增加機體抗應激的能力、免疫調節(jié)功能(細胞免疫、體液免疫)以及改善機體生物學功能(腸道結構)[2-4]。隨著科研人員深入研究黃芪多糖藥理作用以及黃芪多糖工業(yè)化生產技術的突破,目前黃芪多糖已廣泛應用于畜禽生產及水產養(yǎng)殖,均取得了良好的效果[5]。研究表明飼料中添加1%的黃芪銀鯽的增重率提高7.36%[6]、飼料中添加0.5%的黃芪刺參的特定生長率提高20.94%[7],其他研究也報道了黃芪多糖能提高克氏原螯蝦[8]、羅非魚[9]和鯉魚[10]的非特異性免疫能力。
錦鯉(Cyprinus carpio)是風靡世界的高檔觀賞魚,有“水中活寶石”、“會游泳的藝術品”之稱[11],因其雜食性,易于飼養(yǎng)和繁殖,受到人們的廣泛歡迎。黃芪多糖在錦鯉生長過程中的應用還少有報道,該研究通過在飼料中添加不同水平的黃芪多糖,探討黃芪多糖對錦鯉生長和機體組成的影響,為進一步推廣錦鯉的健康養(yǎng)殖積累資料及黃芪多糖在水產養(yǎng)殖業(yè)中的長期應用提供理論依據。
試驗在江蘇省淡水水產研究所祿口基地進行,試驗時間為2018年5月25日—7月25日。從基地于2018年春季人工繁育的同批錦鯉幼魚中挑選規(guī)格均勻、體質良好、健康無病的個體作為試驗用魚,平均全長為(11.49±0.22)cm、體重(25.53±0.73)g。試驗用錦鯉養(yǎng)殖在溫室內18個長×寬×高為 1.2 m×0.8 m×0.6 m的長條形水槽中,試驗用水為經砂濾和沉淀后的池塘水,維持DO>5.0 mg/L,pH值(7.7±0.1),溫度(20.0±1.0)℃。
西安某有限公司購買黃芪多糖,有效含量為90.0%。以豆粕、魚粉、棉籽粕、菜籽粕為蛋白源,以豆油:魚油(1:1)為脂肪源,錦鯉的基礎飼料配方見表1。制作6種黃芪多糖添加飼料,錦鯉基礎飼料中黃芪多糖添加量分別為 0、0.40、0.80、1.20、1.60、2.00 g/kg,飼料原料完全粉碎并過40目篩,經充分攪拌混合后加工成硬顆粒飼料,飼料大小為Φ2 mm,4℃條件下干燥并密封保存以備用。
表1 基礎飼料組成及主要營養(yǎng)成分(風干基礎)
隨機選取540尾試驗魚,平均放入18個水槽中,維持水深40 cm,保持水體增氧且微流水,經馴7 d后開始試驗。共6個試驗組,G0(對照組):黃芪多糖 0 g/kg、G1:黃芪多糖 0.40 g/kg、G2:黃芪多糖0.80 g/kg、G3:黃芪多糖 1.20 g/kg、G4:黃芪多糖1.60 g/kg、G5:黃芪多糖 2.00 g/kg,每組 30 尾魚,每組3個重復。試驗周期60 d,為使試驗接近養(yǎng)殖生產且錦鯉快速生長,每天過量投喂2 次(9:00、15:00),每次投喂后收集殘餌,經烘干后進行稱重,以確定攝食量,同時清除糞便后換水1/4~1/3。
試驗結束后分別測定各組魚的體質量,并分別從各組中隨機抽樣3尾錦鯉,用于魚體營養(yǎng)成分分析。粗灰分含量測定采用GB/T5009.4-1985的方法;粗脂肪含量測定采用GB/T5009.6-1985方法,SZF-06C型脂肪抽提儀購自浙江托普云農科技股份有限公司;粗蛋白含量測定采用GB/T5009.5-1985的方法,SKD-100型自動定氮儀購自上海沛歐分析儀器有限公司;水分含量測定采用GB/T5009.3-1985的方法。各生長指標計算公式如下:
式中:T2、T1分別為試驗結束后和試驗開始時魚的體質量(g);t為實際投喂天數(d);D 為飼料總攝食量(g),即試驗周期內每尾魚的平均飼料攝食總量。平均值±標準差(Mean±SD)表示數據,使用SPSS 22.0和Excel 2016分析差異是否具統計學意義,分析水平為 P<0.05。
不同黃芪多糖添加量對錦鯉生長性能的影響試驗結果見表2。試驗期間,錦鯉未出現死亡,各試驗組成活率均為100%。錦鯉的末均重隨黃芪多糖添加量增加呈增大的趨勢,G0、G1、G2差異不具統計學意義(P>0.05),G3、G2差異不具統計學意義(P>0.05),且 G3 顯著高于 G0、G1(P<0.05),G4、G5 差異不具統計學意義(P>0.05),且 G4、G5均顯著高于G0、G1、G2、G3(P<0.05);錦鯉的相對增重率和特定生長率隨黃芪多糖添加量增加呈先增大后減小的趨勢,G0、G1差異不具統計學意義(P>0.05),G2、G3 差異不具統計學意義(P>0.05),G2、G3 顯著高于 G0、G1(P<0.05),G4顯著高于其他各試驗組(P<0.05),G5顯著高于 G0、G1、G2、G3(P<0.05);錦鯉的總攝食量,各試驗組之間差異不具統計學意義(P>0.05);錦鯉的飼料系數隨黃芪多糖添加量增加呈減小的趨勢,其中G4試驗組飼料系數最小,其次為G5試驗組。
表2 黃芪多糖對錦鯉生長性能的影響
不同黃芪多糖添加量對錦鯉生化成分的影響測定結果見表3。魚體粗灰分含量和水分含量,各試驗組之間差異不具統計學意義(P>0.05);魚體粗脂肪含量隨黃芪多糖添加量增加呈上升的趨勢,G0、G1、G2 差異不具統計學意義(P>0.05),G3、G2 差異不具統計學意義(P>0.05),且G3顯著高于 G0、G1(P<0.05),G4、G5 差異不顯著(P>0.05),且 G4、G5 均顯著高于G0、G1、G2、G3(P<0.05);魚體粗蛋白質含量隨黃芪多糖添加量增加呈上升的趨勢,G4、G5差異不具統計學意義(P>0.05),且 G4、G5 均顯著高于 G0、G1、G2、G3(P<0.05),G2、G3 之間差異不具統計學意義(P>0.05),且 G2、G3均顯著高于 G0、G1(P<0.05),G1顯著高于 G0(P<0.05)。
表3 黃芪多糖對錦鯉生化成分的影響
黃芪多糖提高錦鯉的生長性能,可能是以下幾個方面綜合作用:①飼料中添加適量黃芪多糖能促進魚體腸道內酵母菌、雙歧桿菌、乳酸菌等有益菌的繁殖,魚體的消化酶活性由于有益菌合成各種消化酶得以提高[12];②黃芪多糖中的某些活性物質可促進動物所吸收的營養(yǎng)物質合成其本身蛋白質,動物的生長速度由于蛋白質的合成能力增強得以提高[3,13];③由于食用黃芪多糖,魚體消化液分泌增多,機體對營養(yǎng)物質的消化吸收能力由于消化液分泌增多得以提高[14];④黃芪多糖可增加上皮內淋巴細胞和腸道黏液細胞的數量,并且提高腸道肌層厚度、絨毛長度和皺褶深度,魚體的生長速度由于消化吸收能力提高得以提高[15]。
考慮生長性能及節(jié)約生產成本,該試驗結果表明,錦鯉飼料中黃芪多糖適宜添加量為1.60 g/kg。其他研究報道尼羅羅非魚黃芪多糖適宜添加量為1.50 g/kg[16]、克氏原螯蝦黃芪多糖適宜添加量為4.0~8.0 g/kg[8]、齊口裂腹魚黃芪多糖適宜添加量為0.40~0.74 g/kg[3],這些試驗結果之間存在差異,可能與黃芪多糖的純度、試驗魚的生長階段以及食性等有關,因此在實際生產中具體添加量還需綜合考慮以上因素。
黃芪多糖除具有增強機體免疫功能外,還具有抗氧化,促進細胞代謝、脂肪細胞分化及調節(jié)RNA、DNA、蛋白質合成的作用[17]。研究報道黃芪多糖在富含蛋白飲食基礎上可顯著提高血漿總蛋白/白蛋白水平與蛋白質凈合成率(蛋白質合成率/蛋白質分解率),促進腎綜合癥鼠肌肉蛋白合成,增加整體蛋白儲備,改善機體狀況[18]。同時黃芪多糖能促進脂肪細胞的分化,有調節(jié)糖脂代謝和改善胰島素抵抗的作用,其作用通徑為黃芪多糖可增加脂肪細胞對葡萄糖的攝取和利用[19]。黃芪多糖在適量添加范圍內,通過促進增強子結合蛋白、信使RNA與蛋白質、過氧化物酶體增殖劑激活受體表達,脂肪細胞分化過程中脂質的堆積由于前脂肪細胞的增殖和分化得以增加[20]。黃芪多糖可抑制脂類氫過氧化物形成且清除脂類氫過氧化物[21],由于多不飽和脂肪酸的分解降低,肌肉脂肪的沉積得以增加。
在該試驗中,黃芪多糖對錦鯉肌肉中粗灰分和水分的含量無顯著影響(P>0.05),魚體粗脂肪含量、粗蛋白質含量隨黃芪多糖添加量增加呈上升的趨勢,這與向梟等[3]對齊口裂腹魚的研究結果相似。動物生長過程中,黃芪多糖能增加脂肪的沉積和蛋白質的合成能力,改善動物機體的營養(yǎng)成分。