王柔嘉，向 平，于治國(guó)，施 妍

（1．司法鑒定科學(xué)研究院 上海法醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 上海市司法鑒定專(zhuān)業(yè)技術(shù)服務(wù)平臺(tái)，上海200063；2．沈陽(yáng)藥科大學(xué) 藥學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 110000）

色胺類(lèi)新精神活性物質(zhì)是一類(lèi)含有色胺結(jié)構(gòu)框架、具有致幻作用的化合物。許多古老的色胺類(lèi)化合物以其強(qiáng)烈的致幻作用而聞名，如來(lái)自致幻蘑菇的賽洛西賓（Psilocybin）、賽洛新（Psilocin）和來(lái)自死藤水的二甲基色胺（DMT）。以賽洛新和賽洛西賓為代表的致幻蘑菇是傳統(tǒng)的、天然的一類(lèi)神經(jīng)致幻劑，服用后能使人產(chǎn)生致幻作用，產(chǎn)生時(shí)間和空間的變形和幻覺(jué)。其最早是北美洲的印第安人在宗教祭祀中使用，后因其使人產(chǎn)生欣快感而逐漸被濫用。近些年，新型色胺類(lèi)物質(zhì)大量合成，它們具有與傳統(tǒng)管制藥物相似的化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，卻披著“合法的”外衣，已經(jīng)成為不法分子的新目標(biāo)。色胺類(lèi)物質(zhì)（tryptamines）具有吲哚環(huán)結(jié)構(gòu)，是由吡咯環(huán)和苯環(huán)組成的融合雙環(huán)，通過(guò)二碳側(cè)鏈與氨基相連，目前已經(jīng)確認(rèn)的色胺類(lèi)物質(zhì)有45種（表1）。1999年，自 N，N-二異丙基-5-甲氧色胺（N，N-Diisopropyl-5-methoxy-tryptamine，5-MeO-DiPT），俗稱‘Foxy’濫用后，新型色胺類(lèi)致幻劑不斷出現(xiàn)，經(jīng)互聯(lián)網(wǎng)銷(xiāo)售而流行。根據(jù)UNODC的報(bào)告，直到2012年，約10%的新精神活性物質(zhì)為色胺類(lèi)，僅次于合成大麻類(lèi)（23%）、苯乙胺類(lèi)（23%）和合成卡西酮類(lèi)（18%）。

構(gòu)結(jié)的質(zhì)物性活神精新類(lèi)胺色1表式構(gòu)結(jié)寫(xiě)縮名文英名文中images/BZ_47_379_598_642_852.png3R 2R 1R H allyl allyl T L A D e in tam iallyltryp d -,N N胺色基丙烯二-,N N H yl eth m yl eth m T M D ine ethyltryptam im d -,N N胺色基甲二-,N N H H yl eth m T M N ine tam yltryp eth m -N胺色基甲-N H ropyl p ropyl p T P D ine ropyltryptam dip-,N N胺色基丙二-,N N H ropyl isop yl eth m T IP M ine yltryptam rop isop-N ethylm -N胺色基丙異-N l-基甲-N H H isopropyl T IP N ine ropyltryptam isop-N胺色基丙異-N H O yl eth m yl eth m)silocin(P T M D -H O -4 ine ethyltryptam dim-,N N roxyhyd-4胺色基甲二-,N N -基羥4-H O ropyl isop yl eth m T IP M -H O -4 ine ropyltryptam isop-N yleth m -N roxyyd H -4胺色基丙異-N -基甲-N -基羥4-H O ropyl isop isopropyl T IP D -H O -4 e in tam yltryp iisoprop d -,N N hydroxy-4-胺色基丙異二-,N N -基羥4-H O ethyl yl eth m T E M -H O -4 e in tam ethyltryp-N ethylm -N hydroxy-4-胺色基乙-N -基甲-N -基羥-4 acetoxy ropyl isop isopropyl T IP D -cO A -4 ine tam yltryp diisoprop-,N N acetoxy--4胺色基丙異二-,N N -基氧酰乙4-images/BZ_47_1446_506_1679_943.png3R 2R 1R yl eth m yl eth m H T M D e-M -1 ine ethyltryptam im d -,N N yleth M 1-胺色基甲二-,N N -基甲1-N 2C H C yl eth m H T M C M ine ethyltryptam om cyan-N ethyl-M -N胺色甲氰-N -基甲-N ethyl yl eth m H T E M ine ethyltryptam-N ethyl-M -N胺色基乙-N -基甲-N propyl yl eth m H T P M e in tam propyltryp-N yleth M -N胺色基丙-N -基甲-N tyl isobu yl eth m H T IB M e in tam tyltryp isobu-N yleth M -N胺色基丁異-N -基甲-N butyl tyl bu H T B D e in tam utyltryp ib D -,N N胺色基丁二-,N N ethyl ethyl H T E D ine tam yltryp ieth D -,N N胺色基乙二-,N N

1表續(xù)式構(gòu)結(jié)寫(xiě)縮名文英名文中images/BZ_48_410_555_705_905.png3R 2R 1R H H yl eth m T L A D e-M -5 e in diallyltryptam-,N N ethylm 5-胺色基乙二-,N N -基甲5-H ioxy ed ylen eth m H T L A D -D M -,65 ine diallyltryptam-,N N ioxyed ylen eth m -,65胺色基乙二-,N N -基氧二甲-,65 yl eth m H H T L A D e-M -7 e in tam iallyltryp d -,N N ethylm -7胺色基乙二-,N N -基甲-7 ethyl H H T L A D t-E 7-ine diallyltryptam-,N N -yl eth 7-胺色基乙二-,N N -基乙-7images/BZ_48_1189_565_1462_895.png3R 2R 1R H yl eth m yl eth m ufotenin b ,T M D -H O 5-e in tam yltryp eth im d -,N N roxylyd h -5胺色基甲二-,N N -基羥-5 ethyl allyl allyl T L A D -tO E -5 ine diallyltryptam-,N N ethoxy--5胺色基丙烯二-,N N -基氧乙-5 benzyl allyl allyl T L A D -nO B -5 ine diallyltryptam-,N N zyloxyen b -5胺色基丙烯二-,N N -基氧甲苯5-benzyl yl eth m yl eth m T M D -nO B -5 ine yltryptam eth im d -,N N benzyloxy-5-胺色基甲二-,N N -基氧甲苯-5 benzyl ropyl p ropyl p T P D -nO B -5 e in tam yltryp iprop d -,N N benzyloxy-5-胺色基丙二-,N N -基氧甲苯-5 benzyl ropyl isop isopropyl T IP D -nO B -5 ine ropyltryptam diisop-,N N benzyloxy-5-胺色基丙異二-,N N -基氧甲苯5-yl eth m allyl allyl T L A D -eO M -5 e in tam iallyltryp d -,N N ethoxym 5-胺色基丙烯二-,N氧-N甲-5 yl eth m ropyl p ropyl p T P D -eO M -5 ine dipropyltryptam-,N N oxyeth m -5胺色基丙二-,N N -氧甲5-yl eth m ropyl isop isopropyl T IP D -eO M -5 ine yltryptam rop diisop-,N N oxyeth m 5-胺色基丙異二-,N N -氧甲5-

1表續(xù)式構(gòu)結(jié)寫(xiě)縮名文英名文中images/BZ_49_389_566_665_880.png2R 1R ethyl ethylallyl m 2-T E L A M 2 e-M 2--eO M 5-ine ethyltryptam-N ylallyl)-eth m(2--N yleth m -2 ethoxym 5-胺色基乙-N )-基丙烯甲(2--基-N甲2--氧甲5-ine iperid p T -ip P e-M 2--eO M 5-ine tam etryp ethylen pentam-,N N yleth m -2 ethoxym -5胺色基烷戊環(huán)-,N N -基甲-2-氧甲5-ine pyrrolid T yr-P e-M 2--eO M 5-ine ethylenetryptam tetram-,N N ethylm -2 ethoxym 5-胺色基甲亞四-,N N -基甲-2-氧甲5-yl prop ethyl T P E e-M 2--eO M 5-ine ropyltryptam p -N ethyl--N ethylm 2-ethoxym 5-胺色基丙-N -基乙-N -基甲2--氧甲-5 yl isoprop ethyl T iP E e-M 2--eO M 5-e in tam yltryp isoprop-N ethyl--N ethylm -2 ethoxym 5-胺色基丙異-基-N乙-N -基甲2--氧甲5-yl prop yl prop T P D e-M 2--eO M 5-e in tam yltryp iprop d -,N N ethylm 2-oxyeth m 5-胺色基丙二-,N N -基甲2--氧甲5-ethyl m yl eth m T M D e-M 2--eO M 5-ine ethyltryptam im d -,N N yleth m 2-oxyeth m -5胺色基甲二-,N N -基甲2--氧甲5-allyl allyl T L A D e-M 2--eO M 5-ine diallyltryptam-,N N ethylm -2 ethoxym 5-胺色基丙烯二-,N N -基甲-2-氧甲5-exyl cycloh allyl T H C L A e-M 2--eO M 5-ine exyltryptam cycloh-N allyl--N ethylm 2-oxyeth m -5胺色基己環(huán)-N -基丙烯-N -基甲2--氧甲5-yl isoprop yl rop isop T IP D e-M 2--eO M 5-e in tam iisopropyltryp d -,N N ethylm 2-ethoxym 5-胺色基丙異二-,N N -基甲-2-基氧甲5-yl isoprop yl eth m T IP M e-M 2--eO M 5-ine yltryptam rop isop-N ethylm -N yleth m 2-oxyeth m -5胺色基丙異-N -基甲-N -基甲2--基氧甲5-images/BZ_49_1620_581_1894_865.png2R 1R yl isoprop yl rop isop T iP D -h P -2 ine diisopropyltryptam-,N N enylph 2-胺色基丙異二-,N N -基苯2-ethyl m yl eth m T M D -h P -2 ine tam yltryp eth im d -,N N henylp -2胺色基甲二-,N N -基苯-2 allyl allyl T L A D -h P -2 ine diallyltryptam-,N N ylen ph 2-胺色基丙烯二-,N N -基苯2-

目前對(duì)于色胺類(lèi)新精神活性物質(zhì)分析方法的研究較少，僅有一些文獻(xiàn)對(duì)單個(gè)色胺類(lèi)化合物進(jìn)行分析，如：BRANDT等[1]對(duì)DALT的研究、MATTIN等[2]對(duì)賽洛新的分析、FABREGAT等[3]對(duì) 5-MeODiPT和5-MeO-MiPT的體內(nèi)代謝研究，有少量文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)多種色胺類(lèi)化合物進(jìn)行分析，如MEYET等[4]對(duì)37種色胺類(lèi)衍生物的定性定量分析等。因此本文綜述多種色胺類(lèi)化合物的體內(nèi)過(guò)程、生物樣品處理方法和分析方法，以期為色胺類(lèi)新精神活性物質(zhì)的進(jìn)一步研究提供基礎(chǔ)。

1 體內(nèi)過(guò)程

不同色胺類(lèi)物質(zhì)進(jìn)入體內(nèi)后，代謝途徑不同，產(chǎn)生的代謝物不同，分布的組織器官也有很大差別。一般情況下，大部分的色胺類(lèi)物質(zhì)都會(huì)經(jīng)由單胺氧化酶（MAO）脫氨基作用進(jìn)行代謝，因此，濫用者口服色胺類(lèi)物質(zhì)時(shí)通常配合單胺氧化酶抑制劑（MAOI）使用。

DMT經(jīng)由MAO很快被代謝失活。5-MeO-DMT一方面經(jīng)由單胺氧化酶A（MAO-A）的脫氨基作用進(jìn)行代謝，另一方面通過(guò)細(xì)胞色素P450酶CYP2D6進(jìn)行O-脫甲基代謝產(chǎn)生活性代謝產(chǎn)物5-OHDMT[5]，如圖1所示。5-OH-DMT不能透過(guò)血腦屏障，在組織中由MAO-A氧化脫氨基作用代謝為5-羥基吲哚乙酸（5HIAA）[6]。當(dāng)腹腔內(nèi)給藥時(shí)，最主要的代謝物為5-甲氧基吲哚乙酸（5MIAA）。

圖1 5-MeO-DMT體內(nèi)代謝途徑

賽洛西賓在體內(nèi)經(jīng)過(guò)堿性磷酸酶的作用快速水解掉磷酸基團(tuán)，轉(zhuǎn)變?yōu)槠浠钚源x產(chǎn)物賽洛新[7]，在血液和尿液中賽洛新轉(zhuǎn)變?yōu)?-羥基吲哚乙醇（4HT）和4-羥基吲哚乙酸（4HIAA）[8]（圖 2）。 GRIESHABER[8]研究發(fā)現(xiàn)，賽洛新在肝中和葡萄糖醛酸結(jié)合，隨后在尿中會(huì)出現(xiàn)賽洛新和葡糖苷的結(jié)合物。

圖2 賽洛西賓體內(nèi)代謝途徑

5-MeO-DiPT在人體的尿液和血液中主要代謝為5-OH-DiPT和5-MeO-NiPT[9]。 5-MeO-DiPT主要有三條代謝途徑[10]（圖3），O-脫甲基形成5-OHDiPT；苯環(huán)6位直接羥基化，或者5-OH-DiPT的6位羥基化之后5位甲基化都可以形成6-OH-5-MeO-DiPT；通過(guò)N-脫烷基化將側(cè)鏈降解為相應(yīng)的仲胺5-MeO-NiPT[11-13]。定量數(shù)據(jù)顯示，檢測(cè)到的羥基化代謝物豐度最高，可能仍會(huì)發(fā)生II期反應(yīng)，部分以硫酸鹽或葡萄糖醛酸結(jié)合物消除。使用人肝微粒體進(jìn)行動(dòng)力學(xué)和抑制性體外研究，結(jié)果顯示CYP2D6介導(dǎo)5-MeO-DiPT的O-去甲基化，CYP1A1負(fù)責(zé)羥基化為6-OH-5-MeO-DiPT，而同工酶CYP2C19,1A2和3A4介導(dǎo)N-脫烷基化[11]。5-MeOMiPT在體內(nèi)的代謝途徑與5-MeO-DiPT相似（圖 3）。

圖35 -MeO-DiPT和5-MeO-MiPT體內(nèi)代謝途徑

2 樣品處理

色胺類(lèi)新精神活性物質(zhì)的樣品主要包括兩大類(lèi)，生物檢材和體外樣品。

生物檢材是案件破獲的重要依據(jù)，生物檢材的選擇、采集直接影響著分析數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和結(jié)果判斷的科學(xué)性，對(duì)于涉毒認(rèn)定、分析結(jié)果的解釋與判斷至關(guān)重要。血液和尿液是體內(nèi)濫用物質(zhì)分析最為普遍采用的檢材，近年來(lái)，對(duì)于非常規(guī)檢材如頭發(fā)等的關(guān)注度顯著增加。

2.1 體液

色胺類(lèi)致幻劑作為新精神活性物質(zhì)的一種，體內(nèi)分析研究較少，在體液方面僅有血液和尿液等的資料。血液在吸毒死亡判斷等方面有很大的使用價(jià)值，可以有效的反映藥物作用強(qiáng)度和中毒程度。但是由于血液中濫用物質(zhì)的濃度比較低，比尿中低10～100倍，并且采集血液需要靜脈刺穿，易導(dǎo)致反感，加之血液在免疫篩選和確證分析中都有更高的要求，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，因此尿液分析是血液分析的一個(gè)很好補(bǔ)充。

2.1.1 液液萃取（liquid-liquid extraction，LLE）

由于原型藥物色胺為胺類(lèi)化合物，故可將樣品調(diào)制成弱堿性進(jìn)行液液萃取。

TURCANT等[14]綜述了某機(jī)構(gòu)六年來(lái)一些新精神活性物質(zhì)的臨床和生物學(xué)數(shù)據(jù)，其中包括AMT和5-MeO-DMT兩種色胺類(lèi)物質(zhì)。在血漿的生物樣品處理時(shí)采用了兩種不同的液液萃取方法。一種方法是將樣品在堿性條件下直接萃??；另一種是先在堿性條件下進(jìn)行，之后采用反酸性萃取。HSIAO等[15]在分離和檢測(cè)18種苯乙胺/色胺衍生物的實(shí)驗(yàn)中對(duì)于尿液采用LLE的處理方法，通過(guò)加入1g碳酸鉀，使尿液呈堿性。AMBACH[16]使用LLE對(duì)尿液樣品進(jìn)行處理，來(lái)鑒定和定量56種新精神活性物質(zhì)，通過(guò)加入500μL10mol/L的NaOH來(lái)調(diào)節(jié)尿液酸堿性。

有些實(shí)驗(yàn)的LLE過(guò)程也在中性環(huán)境中展開(kāi)。MEYET等[4]在對(duì)37種色胺類(lèi)物質(zhì)（包括其衍生物）進(jìn)行定性定量分析時(shí)，采用LLE對(duì)血漿進(jìn)行樣品處理。使用乙酸丁酯和乙酸乙酯的混合溶液（50∶50，v/v）作為血漿樣品的萃取液。復(fù)溶時(shí)選取流動(dòng)相A（10 mmol/L的甲酸銨和甲酸水溶液，pH=3.4）和流動(dòng)相B（乙腈和0.1%的甲酸）混合溶劑。

2.1.2 固相萃?。╯olid-phase extraction，SPE）

LLE的樣品處理過(guò)程花費(fèi)時(shí)間較長(zhǎng)，在分析之前通常需要預(yù)濃縮提取物，并且需要大量昂貴、有毒、對(duì)環(huán)境有害的有機(jī)試劑[17]。SPE是近年發(fā)展起來(lái)一種樣品預(yù)處理技術(shù)，與傳統(tǒng)的液液萃取法相比較可以提高分析物的回收率，更加快捷、更有效的將分析物與干擾組分分離。不論是尿液還是血液，多數(shù)文獻(xiàn)樣品處理方式均采用了SPE。

SIMONA等[18]在進(jìn)行尿液中致幻類(lèi)物質(zhì)測(cè)定時(shí)，對(duì)非水解和酶水解的尿液進(jìn)行固相萃取，除親水性的4-OH-DiPT的提取回收率為55%～60%，其余物質(zhì)均大于70%。AMBACH等[16]在檢測(cè)和定量全血中56種新精神活性物質(zhì) （包含色胺類(lèi)物質(zhì)）時(shí)，使用Bond Elut Certify的固相萃取柱（SPE柱），DiPT、DMT、5-MeO-DALT、5-MeO-DMT 的提取效率分別為64%、69%、64%、66%。 WOHLFARTH[19]對(duì)血漿樣品進(jìn)行處理時(shí)，使用Gilson GX-274 Aspec（Middleton，USA）SPE柱，在使用之前用甲醇和pH=6的磷酸鹽緩沖溶液進(jìn)行活化。用水、乙酸、甲醇依次進(jìn)行清洗，然后用二氯甲烷∶異丙醇∶25%氨水（80∶2∶2）進(jìn)行洗脫。 結(jié)果 MiPT和 5-MeO-DMT的提取回收率都很高，均值分別達(dá)到77%和79%，DiPT的提取回收率達(dá)到82%。TANG等[20]在同時(shí)檢測(cè)93種常規(guī)和新興的濫用藥物及其尿中代謝物的實(shí)驗(yàn)中使用SPE，SPE柱在使用前依次用甲醇、去離子水和pH=6的磷酸鹽緩沖溶液活化。其中，新精神活性物質(zhì)有賽洛新、5-MeO-DiPT、DMT、AMT 等色胺類(lèi)化合物，除賽洛新的提取效率為65%，其余均高于70%。

綜上，使用固相萃取的方法進(jìn)行生物樣品處理，平均提取回收率接近70%，因此固相萃取已經(jīng)成為液液萃取的很好補(bǔ)充，為樣品處理提供了一種新的有前景的方法。

2.1.3 蛋白質(zhì)沉淀法

蛋白沉淀法是毒物分析過(guò)程中對(duì)生物樣品進(jìn)行處理的一種常用方式。對(duì)于富含蛋白質(zhì)的檢材，在進(jìn)行分離、提取時(shí)要將大量干擾測(cè)定的蛋白質(zhì)沉淀除去，使待測(cè)毒物仍留存于溶液中。

TURCANT等[14]在其綜述中提到了使用蛋白沉淀法對(duì)血漿和尿液進(jìn)行樣品處理，用以檢測(cè)其中的新精神活性物質(zhì)，包括AMT和5-MeO-DMT兩種色胺類(lèi)物質(zhì)。取100μL血漿加入150μL甲醇溶液，加200μg/L甲基米那普侖作為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，上清液用去離子水稀釋4倍，取10 μL進(jìn)樣。有關(guān)文獻(xiàn)介紹的生物樣品處理方法中較少采用蛋白沉淀的方法，相較于前兩種處理方法，蛋白沉淀的提取回收率較低，由于尿液干擾成分相對(duì)較少，因此相對(duì)于血液，尿液的處理方法大多采用蛋白沉淀。

2.2 毛發(fā)

在藥物輔助犯罪和其他刑事調(diào)查中，通過(guò)測(cè)試毛發(fā)中的藥物來(lái)幫助破案非常常見(jiàn)。使用毛發(fā)作為分析基質(zhì)的優(yōu)點(diǎn)是，相對(duì)于其他生物基質(zhì)來(lái)說(shuō)，毛發(fā)可以提供長(zhǎng)程用藥信息，并且其摻假的可能性較小，不會(huì)受到短期內(nèi)禁毒的影響，易于收集和儲(chǔ)存無(wú)損傷性。由于在代謝之前，分子很大程度地從汗液，血流和皮脂摻入角蛋白基質(zhì)中，因此毛發(fā)中通常出現(xiàn)母體化合物，這就為毒理學(xué)家的分析提供了補(bǔ)充信息。

BOUMBA等[21]對(duì)毛發(fā)中存在的132種新精神活性物質(zhì)進(jìn)行提取分析，鑒別出DMT等色胺類(lèi)新精神活性物質(zhì)。在進(jìn)行生物樣品處理之前，先用0.1 mol/L鹽酸甲醇、0.1 mol/L甲酸甲醇和甲醇做提取溶劑進(jìn)行比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)對(duì)于大多數(shù)新精神活性物質(zhì)，0.1 mol/L鹽酸甲醇的提取效率最高，但是對(duì)于DMT等色胺類(lèi)物質(zhì)來(lái)說(shuō)，三種提取溶劑的提取效率相差不大。該課題組又對(duì)毛發(fā)提取混合物的孵化時(shí)間以及進(jìn)樣量進(jìn)行試驗(yàn)和討論，發(fā)現(xiàn)孵化時(shí)間3 h，進(jìn)樣量 2 μL 最佳。

MARTIN等[2]分析了頭發(fā)中的賽洛新等成分，由于賽洛新性質(zhì)極不穩(wěn)定，易分解，因此在處理過(guò)程中加入了0.1 mol/L的抗壞血酸和鹽酸（0.01 mol/L）甲醇（1∶1）來(lái)抑制降解過(guò)程。該實(shí)驗(yàn)運(yùn)用固相萃取處理，洗脫液為2%氫氧化銨的三氯甲烷異丙醇，洗脫之后用40℃氮?dú)獯蹈?，流?dòng)相復(fù)溶。PICHINI等[22]鑒別頭發(fā)中存在的致幻類(lèi)物質(zhì)，用甲醇和乙醚清洗頭發(fā)，考慮到賽洛新和賽洛西賓的不穩(wěn)定性，加入250μL酸性水緩沖溶液于100℃加熱1 h，最后冷卻至室溫，稀釋?zhuān)M(jìn)樣。通過(guò)此方法得到的賽洛新、賽洛西賓和DMT的平均提取回收率為89.4%、89.3%、83.4%，其中以 0.06 ng/mg的樣品得到的提取回收率最高，賽洛新和賽洛西賓均達(dá)到90%以上。

2.3 體外樣品

色胺類(lèi)的體外樣品有很多種，包括粉末，膠囊，片劑或干燥植物/蘑菇材料產(chǎn)品的精細(xì)粉末。KIKURA等[23]用甲醇作為提取溶劑超聲十分鐘，提取后加入內(nèi)標(biāo)，離心取上清，進(jìn)液相分析。TURCANT等[14]在處理色胺類(lèi)粉末時(shí)，采用甲醇提取進(jìn)樣。NAKAZONO等[24]對(duì)14種色胺類(lèi)粉末進(jìn)行鑒定，在蒸餾水中加入藥物粉末，將樣品用2 mol/L氫氧化鈉溶液堿化，然后用乙酸乙酯萃取，離心后取上清進(jìn)樣。相比于基質(zhì)復(fù)雜的體內(nèi)樣品，體外樣品的處理方式簡(jiǎn)單直接，但是對(duì)于毒物分析和法醫(yī)毒化來(lái)說(shuō)面對(duì)的往往是基質(zhì)眾多的體內(nèi)樣品，因此選擇一個(gè)提取回收率高、基質(zhì)效應(yīng)小的處理方法顯得尤為重要。

3 分析方法

致幻劑有很多同分異構(gòu)體，需要采用色譜的方法進(jìn)行分離，其分析方法有很多種，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS），液相色譜法（LC），液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS）。多種色胺類(lèi)物質(zhì)的樣品處理以及分析方法見(jiàn)表2。

表2 色胺類(lèi)新精神活性物質(zhì)的分析方法

續(xù)表2

3.1 GC-MS

GC-MS曾被公認(rèn)為濫用物質(zhì)分析的金標(biāo)準(zhǔn)。NAKAZONO等[24]對(duì)14種色胺類(lèi)粉末進(jìn)行鑒定，主要研究目的是采用不同的分析方法區(qū)分色胺類(lèi)同分異構(gòu)體。在進(jìn)行GC-MS前，用四甲基硅烷（TMS）作為衍生化試劑，通過(guò)GC-MS的電子電離模式可以區(qū)分全部14種色胺類(lèi)中的同分異構(gòu)體，LC-MS能夠分辨出14種色胺中的多數(shù)，但是對(duì)于5-MeO-DET和5-MeO-MiPT兩種同分異構(gòu)物質(zhì)的分離卻無(wú)能為力。該實(shí)驗(yàn)最后結(jié)果顯示用于色胺類(lèi)物質(zhì)的分析方法應(yīng)該首選通過(guò)TMS衍生化之后的GC-MS，液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的方法可以作為GC-MS的一個(gè)很好的補(bǔ)充。

PALMA等[25]用GC-MS的方法對(duì)2012-2015年間得到的樣品進(jìn)行色胺類(lèi)物質(zhì)的分析，分析柱為5%苯基甲基硅氧烷柱。通過(guò)NIST 14等4個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)檢索化合物，結(jié)果檢測(cè)出了21種色胺類(lèi)物質(zhì)。FèREC等[26]在研究 5-羥色胺綜合征時(shí)，使用GCMS對(duì)處理過(guò)的尿樣進(jìn)行分析，在尿中檢測(cè)到AMT。相較于液質(zhì)，GC-MS在定量之余更能給我們?cè)S多未知物定性的信息，各種數(shù)據(jù)庫(kù)則是其強(qiáng)大的后援。

在毒物、藥物和環(huán)境分析中有相當(dāng)一部分分析對(duì)象及其代謝物或分解產(chǎn)物是熱不穩(wěn)定的，KIKURA等[23]對(duì)19種色胺類(lèi)和苯乙胺類(lèi)物質(zhì)進(jìn)行定量時(shí)，采用GC-MS，結(jié)果發(fā)現(xiàn)無(wú)法檢測(cè)到賽洛西賓，原因是在高溫條件下賽洛西賓分解為賽洛新。氣相色譜只能分離易揮發(fā)且難分解的物質(zhì)，因此使用液相的分析方法逐漸成為藥物毒物研究的主流。

3.2 液相色譜法（LC）

生物樣品基質(zhì)復(fù)雜，生物樣品量少且分析物濃度低，樣品數(shù)量大，因此要求分析方法具有靈敏度高，分析時(shí)間短，高通量和篩選的優(yōu)點(diǎn)，所以LC得到了廣泛應(yīng)用。根據(jù)檢測(cè)器的不同，LC又可以分為液相色譜-紫外檢測(cè)器（LC-UV）、液相色譜-化學(xué)發(fā)光氮檢測(cè)器（LC-CLND）。

3．2．1 LC-UV

紫外檢測(cè)器（UV）是一種光譜檢測(cè)器，紫外光譜是最具實(shí)用性的檢測(cè)途徑。大部分物質(zhì)在溶液狀態(tài)下都具有紫外吸收，色胺類(lèi)致幻劑也不例外，其吸收值與物質(zhì)的量具有極好的線性，專(zhuān)屬性也非常好。FèREC等[26]用多種分析方法對(duì)AMT及其代謝物進(jìn)行分析，通過(guò)LC-UV中的UV圖譜將一未知峰最終歸屬于 AMT，AMT 在0．05～2滋g/mL 之間的校準(zhǔn)曲線是線性的，其相關(guān)系數(shù) r＞0．998。

3．2．2 LC-CLND

色胺類(lèi)物質(zhì)本身是單胺類(lèi)生物堿，所以液相色譜-化學(xué)發(fā)光氮檢測(cè)（LC-CLND）在一定程度上屬于色胺類(lèi)物質(zhì)的專(zhuān)屬性分析方法。在眾多液相色譜檢測(cè)器中，化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器（CLD）結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，靈敏度高。RASANEN等[27]使用該方法對(duì)包括DMT在內(nèi)的177個(gè)樣品中的61種新精神活性物質(zhì)進(jìn)行定量分析，發(fā)現(xiàn)此方法可以作為新精神活性物質(zhì)的量化方法，適合于色胺類(lèi)、苯乙胺類(lèi)以及卡西酮類(lèi)類(lèi)致幻劑。隨著毒品現(xiàn)場(chǎng)的不斷變化，在法醫(yī)實(shí)驗(yàn)室中使用這項(xiàng)技術(shù)為案例中的量化和評(píng)估提供了一種獨(dú)特的新的方法。

3.3 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS）

由于MS可以提供結(jié)構(gòu)信息，用來(lái)定性有一定的優(yōu)勢(shì)，因此LC-MS應(yīng)用最為廣泛。液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用，尤其是與串聯(lián)質(zhì)譜（MS/MS）的聯(lián)用得到了極大的重視和發(fā)展。

AMBACH等[16]對(duì)血液和尿液中的56種新精神活性物質(zhì)使用LC-MS/MS進(jìn)行檢測(cè)和定量，該課題組為了提高靈敏度，尤其是提高一些保留時(shí)間靠前的化合物的靈敏度，在柱后加入2-丙醇，并以0．2mL/min的流速通過(guò)T型管。結(jié)果顯示，在兩種生物基質(zhì)中，使用該方法得到的LLOQ集中在1．0～10ng/mL之間，幾種色胺類(lèi)物質(zhì)在血液中除DMT的LLOQ稍高為5．0ng/mL之外，其余5-MeODiPT、5-MeO-DMT、AMT和DiPT的 LLOQ都為2．5ng/mL，而在尿液中的LLOQ基本穩(wěn)定在1ng/mL，從中不僅可以看出尿液中的基質(zhì)影響較小，還可以了解到此方法的靈敏度較高。

ADAMOWICZ等[28]對(duì)143種新精神活性物質(zhì)進(jìn)行簡(jiǎn)單快速篩選，其中包含18種色胺類(lèi)物質(zhì)。其中4-OH-DET的LOD最低，為0．06 ng/mL，4-MeO-DMT的LOD最高，為2．98ng/mL。

BOUMBA等[21]將毛發(fā)作為檢材，對(duì)頭發(fā)中的132種新精神活性物質(zhì)進(jìn)行LC-MS/MS分析。結(jié)果顯示大多數(shù)的新精神活性物質(zhì)LOD集中在0．001 ng/mg和0．01 ng/mg，其中DMT的LOD為0．01 ng/mg，平均基質(zhì)效應(yīng)為104%，平均提取回收率為74%～86%。

3．3．1 LC-HRMS

LC-HRMS相對(duì)于LC-MS來(lái)說(shuō)具有更高的靈敏度，高分辨率質(zhì)譜的m/z能精確到小數(shù)點(diǎn)后四位，能分開(kāi)質(zhì)量相差很小的離子，定性更具有優(yōu)勢(shì)，解譜更加準(zhǔn)確。

FABREGAT等[3]通過(guò)鑒定小鼠的尿液和血液來(lái)尋找5-MeO-MiPT在生物體內(nèi)的代謝物。在通過(guò)液液萃取的生物樣品處理方式之后，使用LC-HR-MS進(jìn)行代謝物的分析。最終根據(jù)代謝物確定了5-MeO-MiPT在體內(nèi)代謝的三種途徑。

3．3．2 HILIC-HRMS/MS

親水作用色譜（HILIC）對(duì)極性化合物有很好的保留，流動(dòng)相含有高比例的水溶性有機(jī)溶劑，與MS能很好的兼容，可以提高檢測(cè)的靈敏度。親水作用色譜法已被廣泛報(bào)道適用于極性化合物的色譜分析。WAGMANN等[29]在研究AMT類(lèi)似物等新型精神活性物質(zhì)對(duì)體外單胺氧化酶的抑制潛力時(shí)采用了HILIC-HR-MS/MS分析方法。結(jié)果發(fā)現(xiàn)干擾組分的響應(yīng)比LLOQ處分析物的響應(yīng)和IS的響應(yīng)分別小20%和5%，證明了該方法的選擇性較好。

綜上所述，同為色胺類(lèi)物質(zhì)，使用同樣的液相色譜，但是串聯(lián)不同的檢測(cè)器，得到的結(jié)果會(huì)有所差異。如果想要了解化合物的分子量和充足的結(jié)構(gòu)信息，應(yīng)該選擇LC-MS；如果想要定性更準(zhǔn)確，具有更高的靈敏度，高分辨質(zhì)譜是最好的選擇；在考慮到經(jīng)濟(jì)成本的條件下，紫外檢測(cè)作為一種已經(jīng)非常成熟的技術(shù)，是不錯(cuò)的選擇；化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器在檢測(cè)熒光類(lèi)物質(zhì)時(shí)由于不存在背景干擾，靈敏度非常高。因此，在選擇分析方法時(shí)，要根據(jù)實(shí)際的實(shí)驗(yàn)過(guò)程和目的選擇最適合的方法。

4 案例報(bào)道

近年，僅有數(shù)例涉及色胺類(lèi)新精神活性物質(zhì)的案例報(bào)道（表3）。如，STICHT等[30]報(bào)道了兩名男性在口服蘑菇粉（主要成分賽洛西賓）后的狀況，研究發(fā)現(xiàn)短時(shí)間內(nèi)賽洛西賓可以轉(zhuǎn)變?yōu)橘惵逍?，在體液中均可以檢測(cè)到賽洛新。HASKER等[46]報(bào)道的某案例中顯示，兩男性血漿中游離賽洛新占35%，在尿中僅占13%。TANAKA等[9]報(bào)道了某男，29歲，使用5-MeO-DiPT后中毒死亡情況，在血液中檢測(cè)到3種物質(zhì)，5-OH-DiPT,5-MeO-DiPT以及5-MeONiPT，其含量分別 0．327、0．142、0．020 μg/mL。 WILSON等[31]報(bào)道了某男，23歲，白色人種，使用5-MeODiPT后中毒情況，其血清中該物質(zhì)含量為0．14μg/mL，尿液中為 1．6μg/mL，尿中代謝物含量為 0．17μg/mL。由于對(duì)于色胺類(lèi)新精神活性物質(zhì)的體內(nèi)研究資料較少，因此需要科研人員及其法醫(yī)鑒定人員的進(jìn)一步研究和積累。

表3 典型案例

5 結(jié)論

色胺類(lèi)新精神活性物質(zhì)對(duì)公眾健康和安全造成嚴(yán)重威脅，尤其是新型色胺類(lèi)物質(zhì)的出現(xiàn)使得分析檢測(cè)變得更加困難。本文綜述了多種色胺類(lèi)化合物的體內(nèi)過(guò)程、樣品處理方法和分析方法，以期建立可靠、穩(wěn)定的分析檢測(cè)方法分析生物樣品中色胺類(lèi)新精神活性物質(zhì)，并將其應(yīng)用到司法鑒定實(shí)踐。