潘 祁 王培娜

牙周炎是一種慢性、非特異性感染性疾病，是口腔兩大類疾病之一，在世界范圍內(nèi)均有較高患病率[1]。慢性牙周炎是最常見的一類牙周炎，約占牙周炎患者的95%，由長期存在的慢性牙齦炎向深部牙周組織擴展而引起，主要臨床特征有牙齦炎癥、牙周袋形成、臨床附著喪失、牙槽骨吸收，嚴(yán)重者可出現(xiàn)牙齒松動、移位，最后導(dǎo)致牙齒缺失。由于附著于牙面的牙菌斑中的微生物所引起牙周支持組織破壞的慢性感染性疾病，細(xì)菌積聚于牙齒表面或直接侵入并同時產(chǎn)生大量毒性產(chǎn)物直接破壞牙周組織，或者引發(fā)了宿主免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)，間接性地導(dǎo)致了牙周組織的損傷。

細(xì)胞因子是一種小的水溶性肽或糖蛋白，基本功能是分子之間的信號傳導(dǎo)。它們由粒細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞以及其他的一些細(xì)胞通過自分泌或旁分泌方式產(chǎn)生。細(xì)胞因子的一些亞型是促炎介質(zhì)如白細(xì)胞介素（interleukin，IL）、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）等，稱為炎性細(xì)胞因子，對控制炎癥反應(yīng)起著十分重要作用。目前認(rèn)為牙周炎導(dǎo)致牙周組織的破壞主要通過兩種途徑：牙周致病菌及其產(chǎn)物的直接破壞和過度的宿主反應(yīng)所造成的間接破壞[2～5]。目前認(rèn)為后一種途徑是造成牙周組織破壞的主要原因。在宿主反應(yīng)的過程中，一系列炎癥介質(zhì)包括IL、TNF 等起到了重要作用，它們不僅可以直接導(dǎo)致牙周組織的破壞，還可以進(jìn)一步影響宿主的炎癥和免疫反應(yīng)進(jìn)程，加重牙周組織的破壞。IL 是非常重要的細(xì)胞因子家族，它們在免疫細(xì)胞的成熟、活化、增殖和免疫調(diào)節(jié)等一系列過程中均發(fā)揮重要作用，參與免疫應(yīng)答和介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，與牙周炎有密切的關(guān)系。

微小RNA（miRNA）對免疫系統(tǒng)以及炎癥性疾病的調(diào)控具有復(fù)雜性和網(wǎng)絡(luò)性，目前的研究表明miRNA 對不同的細(xì)胞、在不同的時空、靶向不同基因的調(diào)控作用表現(xiàn)出明顯差異，其機制并未完全澄清[6，7]。因此，深入了解 miRNA 的生物學(xué)活性、了解其調(diào)控的靶基因以及其精細(xì)的調(diào)控途徑，為我們研究miRNA 的免疫調(diào)控作用提供借鑒和經(jīng)驗，也有助于探討miR-202 在慢性牙周炎以及其他所有相關(guān)疾病防治中的意義。

資料和方法

1.研究對象：選取自2015年5月至 2018年3月于我院口腔科就診的85 例慢性牙周炎患者為慢性牙周炎組，選取本院同期體檢的健康志愿者51 例為對照組，兩組患者基線資料比較均無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05），見表1。本研究經(jīng)院倫理委員會批準(zhǔn)，患者知情同意。

2.唾液標(biāo)本采集：唾液標(biāo)本采集按照Rhodus 改良的方法[8]收集非刺激性全唾液，采集時間為上午9：00～11：00，采集前禁食、水 1 小時，并用蒸餾水漱口1 次。避免抽煙、劇烈運動及情緒劇烈波動等。采樣時受試者采取正位、端坐，采集時囑患者向4℃無菌Eppendorf 管內(nèi)吐出，間歇性持續(xù)5 分鐘。將所得樣本立即于4℃，3000rpm，15min 離心取上層液體，將收集好的唾液上清凍存于-80℃冰箱，待檢測。

表1 兩組一般資料比較

3.常規(guī)牙周檢查：由兩名事先經(jīng)過統(tǒng)一培訓(xùn)的醫(yī)師使用Florida 探針對所有研究對象全口牙周檢查（第三磨牙除外）。主要內(nèi)容包括6 個位點（近中頰側(cè)、正中頰側(cè)、遠(yuǎn)中頰側(cè)、近中舌側(cè)、正中舌側(cè)、遠(yuǎn)中舌側(cè)）的牙周探診深度（periodontal depth，PD）、附著喪失（attachment loss，AL）、菌斑指數(shù)（plaque index，PLI）、牙齦指數(shù)（gingival index，GI）。根據(jù)探診深度、牙齦指數(shù)、附著喪失、X 線片顯示牙槽骨吸收程度來衡量牙周炎的程度。

4.ELISA 檢測：從-80℃冰箱中取出待測標(biāo)本，在室溫中放置10 分鐘，使其充分融化，取出ELISA試劑盒（TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 及 IL-10），使其平衡至室溫。按照試劑說明書設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品檢測孔：每塊ELISA 反應(yīng)板設(shè)置8 孔標(biāo)準(zhǔn)孔，在第一孔中加入100μl 樣品稀釋液，然后加入100μl 標(biāo)準(zhǔn)品，充分混勻后，用移液器吸取1001μl 混合液，并加入第二孔中，然后加入100μl 樣品稀釋液混勻，依次倍比稀釋8 次，使之體積均為100μl。液器吸取100μl 待檢樣品加入ELISA 反應(yīng)板，輕輕混勻，然后加蓋封板膜放入37℃恒溫箱中抗原抗體反應(yīng)2小時。孵育結(jié)束后用洗板機洗板，洗5 次，每次45秒，然后在吸水紙上輕拍，去除ELISA 孔中水分。用移液器吸取100μl 第一抗體工作液加入ELISA 反應(yīng)孔中，輕輕混勻，放于37℃恒溫箱中孵育1 小時。孵育結(jié)束后用洗板機洗板，洗5 次，每次45 秒，然后在吸水紙上輕拍，去除ELISA 孔中水分。板結(jié)束后在ELISA 反應(yīng)孔加入100μl 辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗，輕輕混勻，37℃溫育1 小時。孵育結(jié)束后用洗板機洗板，洗5 次，每次45 秒，然后在吸水紙上輕拍，去除ELISA 孔中水分。板結(jié)束后每孔加入底物A 液和 B 液各 50μl，輕輕混勻，37℃溫育 30 分鐘。取出ELISA 反應(yīng)板，加入50μl 終止液，輕輕混勻。將ELISA 反應(yīng)板放置酶標(biāo)儀中，在450nm 波長處測定各孔的OD 值。將ELISA 反應(yīng)板放置酶標(biāo)儀中，在450nm 波長處測定各孔的OD 值。檢測樣本中相應(yīng)細(xì)胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 及 IL-10）的含量。

5.Western Blot 檢測：首先從轉(zhuǎn)染48h 后的細(xì)胞中提取總蛋白，采用BCA 蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度，然后在SDS-聚丙烯酰胺凝膠小孔內(nèi)添加50μg 經(jīng)過變性處理后的蛋白質(zhì)，再進(jìn)行濃縮膠層80V 恒壓一段時間，當(dāng)樣品在分離膠層壓成一條線時電壓調(diào)至120V，繼續(xù)電泳，電泳后于冰上0.25mA 轉(zhuǎn)膜2h，麗春紅染色10min 觀察轉(zhuǎn)移效果，滿意后，洗膜緩沖液（tris buffered saline tween，TBST）緩沖液洗膜后在5%脫脂奶粉與搖床上孵育2h；加入一抗（1：500 兔抗人 p21 多抗，1∶5000 兔抗人GAPDH 單抗）置于4℃封閉過夜；洗膜后加入羊抗兔 IgG/HRP 二抗（1：2000），室溫孵育 1h，采用增強化學(xué)發(fā)光法（ECL）顯影得到蛋白印記條帶，用Tanon 軟件分析條帶灰度值，相對定量結(jié)果以實驗條帶灰度值/β-actin 條帶光密度值表示，內(nèi)參照為β-actin。

6.qRT-PCR 檢測：應(yīng)用 ABI StepOne Plus 實時定量PCR 儀，嚴(yán)格按照TaKaRa 公司SYBR Premix Ex TaqPCR 反應(yīng)試劑盒的操作說明進(jìn)行檢測。

7.統(tǒng)計學(xué)分析：實驗數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 22.0 軟件分析，計量資料用表示，兩樣本均數(shù)比較采用獨立樣本t檢驗，多個樣本均數(shù)間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD 法。計數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

1.在慢性牙周炎組與正常對照組唾液中miR-202 的表達(dá)水平：我們通過檢測miR-202 在慢性牙周炎組與對照組唾液上清中的表達(dá)水平，結(jié)果顯示，慢性牙周炎組唾液上清中miR-202 表達(dá)水平為2.46±0.62，正常對照組唾液上清中miR-202 表達(dá)水平為0.73±0.24，經(jīng)獨立樣本t檢驗，慢性牙周炎組唾液上清中miR-202 表達(dá)顯著高于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），見圖1。

2.miR-202 在慢性牙周炎各組唾液上清中表達(dá)水平：在1 實驗結(jié)果研究基礎(chǔ)上，我們繼續(xù)通過檢測miR-202 在正常對照組、輕度牙周炎組、中度牙周炎組、重度牙周炎組唾液上清中的表達(dá)情況。結(jié)果顯示，輕度牙周炎組唾液上清中miR-202 的表達(dá)水平為1.76±0.43；中度牙周炎組為2.69±0.61；重度牙周炎組為4.08±0.69，經(jīng)單因素方差分析組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（F＝16.332，P＜0.01），見圖2。結(jié)果提示各組唾液上清中miR-202 表達(dá)存在差異，均顯著高于正常對照組，并呈現(xiàn)正相關(guān)性，且其差異有統(tǒng)計學(xué)意義（q＝6.321，8.447，9.368；P＝0.001，0.000，0.000）。

圖1 在慢性牙周炎組與正常對照組唾液中miR-202 的表達(dá)水平（±s）

圖2 miR-202 在慢性牙周炎各組唾液上清中表達(dá)水平（±s）

3.比較慢性牙周炎各組間唾液上清中miR-202表達(dá)相關(guān)分析：我們?yōu)楦哟_定miR-202 表達(dá)水平在各組間唾液上清的相關(guān)性，將各組間再經(jīng)多重比較（表2）。miR-202 在輕度牙周炎、中度牙周炎、重度牙周炎唾液上清中之間表達(dá)水平顯著呈現(xiàn)上調(diào)趨勢（P＜0.01）。

表2 各組間唾液上清中miR-202 表達(dá)相關(guān)分析

4.miR-202 與慢性牙周炎臨床指標(biāo)的相關(guān)性：我們通過觀察檢測慢性牙周炎患者的臨床指標(biāo)：牙齦指數(shù)（GI）、牙周探診深度（PD）、菌斑指數(shù)（PLI）、附著喪失（AL）。結(jié)果顯示，miR-202 在唾液上清中的表達(dá)水平與各牙周臨床指標(biāo)均呈顯著正相關(guān)（表3）。

5.慢性牙周炎患者唾液上清中 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 及 IL-10 水平變化：我們通過ELISA 方法檢測慢性牙周炎患者組和正常對照組人群唾液上清中 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 及 IL-10的表達(dá)水平，結(jié)果顯示，慢性牙周炎患者唾液上清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 均顯著高于正常對照組，而IL-10 呈現(xiàn)低表達(dá)（表4），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表3 miR-202 與慢性牙周炎臨床指標(biāo)的相關(guān)性

表4 兩組唾液中 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 及 IL-10 水平比較（±s）

表4 兩組唾液中 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 及 IL-10 水平比較（±s）

標(biāo)志物TNF-α IL-1β IL-6 IL-8 IL-10正常對照組（n＝51）4.57±2.68 10.03±4.83 3.22±0.98 32.51±13.48 14.97±9.04慢性牙周炎組（n＝85）9.87±6.58 47.94±14.79 6.37±3.64 148.63±39.67 5.76±3.46 t P 5.480 17.724 6.042 20.191 8.435 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

6.TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 及 IL-10 在慢性牙周炎患者中蛋白水平變化：通過Western Blot 方法檢測慢性牙周炎患者組和正常對照組人群中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 及 IL-10 的蛋白表達(dá)水平，同ELISA 檢測結(jié)果相同，慢性牙周炎患者中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 均顯著高于正常對照組，而IL-10 呈現(xiàn)低表達(dá)（圖3）。

7.miR-202 與 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 及IL-10 表達(dá)水平的相關(guān)性：我們將慢性牙周炎患者治療前唾液上清中miR-202 的表達(dá)水平分別與唾液上清中 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 及 IL-10 的表達(dá)水平進(jìn)行相關(guān)分析，結(jié)果顯示，TNF-α 的相關(guān)系數(shù) r 值為 0.527，（P＜0.001），與 miR-202 呈正相關(guān)；IL-1β 的相關(guān)系數(shù) r 值為 0.483，（P＜0.001），同樣和miR-202 呈正相關(guān)；IL-6 及IL-8 的相關(guān)系數(shù)r值分別為 0.424（P＜0.001）、0.391（P＜0.01） 也和miR-202 呈正相關(guān)，而IL-10 的相關(guān)系數(shù)r 值為-0.322（P＜0.01）則與 miR-202 呈負(fù)相關(guān)性，見表5。

圖3 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 及 IL-10在慢性牙周炎患者中蛋白水平變化

表5 miR-202 與 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 及IL-10 表達(dá)水平的相關(guān)性

討 論

慢性牙周炎是最常見的一類牙周炎，約占牙周炎患者的95%，由長期存在的慢性牙齦炎向深部牙周組織擴展而引起，主要臨床特征有牙齦炎癥、牙周袋形成、臨床附著喪失、牙槽骨吸收，嚴(yán)重者可出現(xiàn)牙齒松動、移位，最后導(dǎo)致牙齒缺失。由于附著于牙面的牙菌斑中的微生物所引起牙周支持組織破壞的慢性感染性疾病，細(xì)菌積聚于牙齒表面或直接侵入并同時產(chǎn)生大量毒性產(chǎn)物直接破壞牙周組織，或者引發(fā)了宿主免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)，間接性地導(dǎo)致了牙周組織的損傷[9]。

miRNAs 是由21～24 核苷酸所組成并且存在于真核細(xì)胞當(dāng)中的一個非編碼小分子RNA，通過抑制蛋白的轉(zhuǎn)錄和翻譯來調(diào)節(jié)細(xì)胞行為。miRNAs 不僅在細(xì)胞凋亡、遷移、增殖、分化等生理過程中發(fā)揮作用，也與炎癥疾病的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系。研究表明，miRNAs 具有炎癥負(fù)反饋調(diào)節(jié)機制[10]。大量研究發(fā)現(xiàn)，miRNA 在調(diào)節(jié)和維持免疫功能方面發(fā)揮著極其重要的作用，miRNA 的異常表達(dá)緊密聯(lián)系慢性炎癥發(fā)病過程[11]。包括miR-202 在內(nèi)的，與慢性炎癥相關(guān)的miRNA 分子中在慢性炎癥發(fā)生和發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用。miRNA-202 在免疫細(xì)胞的分化和功能調(diào)控、炎癥因子的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、自身免疫性疾病、病毒感染及腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中的作用。近年來，miRNA 在牙周炎的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后中的作用成為研究的熱點之一，已經(jīng)得到證實的有miR-146、miR-155 等微小RAN 對慢性牙周炎發(fā)生發(fā)展機制的調(diào)節(jié)作用。本研究通過檢測miR-202 在慢性牙周炎組與對照組唾液上清中的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)慢性牙周炎組唾液上清中miR-202 表達(dá)水平明顯高于正常人群，這提示miR-202 也可能參與慢性牙周炎的發(fā)生發(fā)展。

通過檢測正常人群及不同嚴(yán)重程度牙周炎患者唾液中miR-202 的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)各組慢性牙周炎患者的唾液上清中miR-202 表達(dá)存在差異，均顯著高于正常對照組，并呈現(xiàn)正相關(guān)性，且其差異有統(tǒng)計學(xué)意義。為更加確定miR-202 表達(dá)水平在各組間唾液上清的相關(guān)性，將各組間再經(jīng)多重比較，結(jié)果顯示，miR-202 在輕度牙周炎、中度牙周炎、重度牙周炎唾液上清中之間表達(dá)水平顯著呈現(xiàn)上調(diào)趨勢。我們通過觀察檢測慢性牙周炎患者的臨床指標(biāo)：牙齦指數(shù)（GI）、牙周探診深度（PD）、菌斑指數(shù)（PLI）、附著喪失（AL）。結(jié)果顯示，miR-202 在唾液上清中的表達(dá)水平與各牙周臨床指標(biāo)均呈顯著正相關(guān)。上述所有結(jié)果說明miR-202 與慢性牙周炎的嚴(yán)重程度密切相關(guān)，病情越嚴(yán)重，miR-202 表達(dá)水平越高。

TNF 是具有多種生物學(xué)活性的糖蛋白，也是唯一具有細(xì)胞毒作用的細(xì)胞因子，是炎癥反應(yīng)的啟動物質(zhì)，是最早發(fā)揮作用的前炎性因子。牙周炎過程中，TNF-α 的主要作用有刺激黏附分子、趨化因子的表達(dá)和炎性介質(zhì)的產(chǎn)生，啟動炎癥反應(yīng)，增加破骨細(xì)胞的形成和活性，增加基質(zhì)金屬蛋白酶的產(chǎn)生，導(dǎo)致結(jié)締組織的破壞，刺激基質(zhì)細(xì)胞凋亡從而限制了牙周組織的修復(fù)。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)隨著牙周炎癥的發(fā)展，齦溝液中TNF-α 及其受體的總量均明顯升高[12]。

IL-1 是一種單核細(xì)胞因子，主要由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，其分為IL-1α 和IL-1β 兩種。IL-1β 是多效性細(xì)胞因子，具有廣泛的細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用，包括促進(jìn)胸腺細(xì)胞、T 細(xì)胞活化、增殖和分化；促進(jìn)破骨細(xì)胞形成和骨吸收；激活核轉(zhuǎn)錄因子NF-kappa B 的信號通路，進(jìn)而NF-kappa B 上調(diào)IL-1β 基因的表達(dá)，加重牙周病變。這些炎癥介質(zhì)能刺激破骨細(xì)胞和膠原酶，導(dǎo)致骨和牙周結(jié)締組織破壞，牙周組織修復(fù)能力喪失等。有研究表明，在炎癥部位的齦溝液中IL-1β 的水平與慢性牙周炎的臨床指標(biāo)密切相關(guān)[13]。

IL-6 是一種多功能細(xì)胞因子，在機體的免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng)中均起著重要作用。可誘導(dǎo)成骨細(xì)胞產(chǎn)生破骨細(xì)胞分化因子及基質(zhì)金屬蛋白酶，二者都促進(jìn)牙槽骨的吸收，能輕度抑制成骨細(xì)胞堿性磷酸酶的活性和膠原的合成，從而抑制牙槽骨吸收后新骨的形成，可以抑制牙周膜的修復(fù)，抑制成纖維細(xì)胞等牙周膜細(xì)胞生長，并降低成纖維細(xì)胞附著，導(dǎo)致牙周膜修復(fù)能力減弱、牙周附著喪失，形成深牙周袋。IL-6 可參與牙周炎的炎癥反應(yīng)，促進(jìn)炎癥細(xì)胞的聚集、活化并促進(jìn)炎癥介質(zhì)的釋放。研究發(fā)現(xiàn)，在病變牙周組織及牙周炎患牙的齦溝液中IL-6 水平明顯高于正常，且與牙周組織破壞的嚴(yán)重程度有關(guān)[14]。

IL-8 炎癥因子則是由巨噬細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞所分泌，作為一種白細(xì)胞多肽調(diào)節(jié)因子，IL-8 主要是通過金屬蛋白質(zhì)水解及細(xì)胞外基質(zhì)蛋白降低，從而破壞正常牙周組織加重炎癥感染。IL-8 可以趨化中性粒細(xì)胞，促進(jìn)粒細(xì)胞吞噬效應(yīng)，是機體重要的炎癥調(diào)節(jié)因子。近年來，有研究證實，IL-8 與牙周炎的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。有人發(fā)現(xiàn)IL-8 在牙周炎的病變牙齦組織中其表達(dá)明顯升高，在經(jīng)過牙周基礎(chǔ)治療后，多數(shù)患者的IL-8 水平有不同程度降低，這表明去除局部細(xì)菌、菌斑及其刺激因素后，齦溝液內(nèi)IL-8 的水平趨于正常[15]。

IL-10 是機體內(nèi)重要的免疫抑制因子，可抑制機體的免疫應(yīng)答水平，降低炎癥反應(yīng)，促進(jìn)組織修復(fù)及愈合，其主要由Th2 細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞和活化的B 細(xì)胞產(chǎn)生。IL-10 可抑制單核細(xì)胞依賴性Th1細(xì)胞增殖，抑制 IL-2、TNF-α、IL-6、GM-CSF 等一系列細(xì)胞因子的合成及其活性。近年來研究發(fā)現(xiàn)，IL-10 可作為一種抗炎因子，抑制炎癥因子的合成和刺激保護性抗體的產(chǎn)生，參與牙周炎的產(chǎn)生和發(fā)展[16]。Goutoudi 等發(fā)現(xiàn)慢性牙周炎患者體內(nèi)IL-10水平較健康人群表達(dá)降低，經(jīng)過牙周基礎(chǔ)治療后，其局部炎癥反應(yīng)減輕，IL-10 的表達(dá)水平增加，說明IL-10 可能通過對促炎因子的抑制作用，參與了牙周的修復(fù)過程。

miR-202 能通過依賴細(xì)胞核因子-KB（nuclear hcmr-KB，NF-KB）的方式表達(dá)上調(diào)，實現(xiàn)對TLR信號通路的負(fù)反饋調(diào)節(jié)，從而防止炎癥反應(yīng)過激。為了探討miR-202 與炎性細(xì)胞因子之間的相關(guān)性。本研究通過ELISA 方法檢測慢性牙周炎患者組和正常對照組人群唾液上清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 及IL-10 的表達(dá)水平，結(jié)果顯示，慢性牙周炎患者唾液上清中 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 均顯著高于正常對照組，而IL-10 呈現(xiàn)低表達(dá)。Western Blot 方法檢測結(jié)果同ELISA 一致。相關(guān)分析結(jié)果顯示，TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 的表達(dá)與 miR-202呈正相關(guān)，IL-10 的表達(dá)水平與miR-202 呈負(fù)相關(guān)。分析可能是由于TLR4、TLR2、TLR5 通路的激活后，miR-202 高表達(dá)能夠通過NF-KB 信號通路誘導(dǎo)TNF-α、IL-1β、IL-6 及 IL-8 等細(xì)胞因子的表達(dá)水平增加。上述結(jié)果提示：慢性牙周炎患者唾液上清中 miR-202 表達(dá)升高與唾液上清中 TNF-α、IL-1β、IL-6 及 IL-8 高表達(dá)有關(guān)。

綜上所述，慢性牙周炎患者唾液上清中miR-202 表達(dá)水平顯著升高，同時 miR-202 和TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8 等炎性細(xì)胞因子呈正相關(guān)性，而miR-202 與IL-10 呈負(fù)相關(guān)性，提示我們miR-202 在慢性牙周炎發(fā)病過程中發(fā)揮著重要作用，有作為臨床上監(jiān)測慢性牙周炎活動進(jìn)展的生物標(biāo)記的潛力。