米瑪次仁 次仁卓嘎 張一帆 黃康艷
(1西藏林芝市波密縣農(nóng)技推廣服務(wù)站,西藏林芝850400;2廣東省微生物研究所,廣東廣州510000)
天麻(Gastrodia elata)是一種與蜜環(huán)菌共生的蘭科植物,其地下塊莖為藥用部位。天麻雖然不是傳統(tǒng)的藏藥(《國(guó)家藏藥標(biāo)準(zhǔn)全書》中未收錄),但在漢族的藥物典籍中,天麻被奉為草藥中的“上品”?!吨袊?guó)藥典》2015版中描述天麻“用于小兒驚風(fēng),癍癇抽搐,破傷風(fēng),頭痛眩暈,手足不遂,肢體麻木,風(fēng)濕痹痛”。
20世紀(jì)60年代天麻首次人工栽培成功,到70年代天麻實(shí)現(xiàn)無性繁殖[1],其栽培技術(shù)開始推廣至全國(guó)適合天麻種植的地區(qū)。目前天麻主要產(chǎn)區(qū)為云南昭通、貴州畢節(jié)、四川宜賓、瀘州和涼山地區(qū)[2]。而包括西藏在內(nèi)的某些地區(qū),即使具備栽培天麻的自然環(huán)境可能由于經(jīng)濟(jì)文化、用藥習(xí)慣的原因,尚未被認(rèn)定為天麻產(chǎn)區(qū)[3]。
天麻素和對(duì)羥基苯甲醇是天麻中的主要小分子藥理成分,其含量是評(píng)價(jià)天麻質(zhì)量的主要指標(biāo)。天麻素具有調(diào)節(jié)血管舒張、抑制血栓形成、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞、改善肌萎縮側(cè)索硬化癥細(xì)胞活力等作用[4-5],其前體對(duì)羥基苯甲醇也有類似的功能[6-7]。而天麻的大分子成分——多糖,則有抗氧化、降血壓、免疫調(diào)節(jié)等功效[8]。
野生天麻的天麻素含量普遍高于人工栽培天麻[9]。但野生天麻來源復(fù)雜、價(jià)格較高,而人工栽培天麻產(chǎn)量穩(wěn)定,來源明確,質(zhì)量可控。因此,筆者對(duì)波密縣人工栽培天麻、天麻素等進(jìn)行檢測(cè),檢驗(yàn)其是否符合藥材質(zhì)量的現(xiàn)有要求。
波密縣人工栽培天麻兩份,一份收集于2016年11月,記代號(hào)為GeA-16;另一份收集于2017年11月,記代號(hào)為GeA-17;市售人工栽培天麻一份,購(gòu)買時(shí)間為2017年11月,產(chǎn)地為貴州,記代號(hào)為GeA-G。所有樣品均4℃下保存。
水分測(cè)定參照《中國(guó)藥典》(2015版)通則0832水分測(cè)定法中的烘干法;灰分測(cè)定參照《中國(guó)藥典》(2015版)通則2302灰分測(cè)定法中的總灰分測(cè)定法;二氧化硫殘留量測(cè)定參照《中國(guó)藥典》(2015版)通則2331二氧化硫殘留量測(cè)定法中的氣相色譜法;天麻素和對(duì)羥基苯甲醇含量測(cè)定參照《中國(guó)藥典》(2015版)中天麻品名下天麻素和對(duì)羥基苯甲醇的測(cè)定方法;粗多糖含量測(cè)定參照《中國(guó)藥典》(2015版)中鐵皮石斛品名下粗多糖含量的測(cè)定方法。
選取大小較為一致的樣品進(jìn)行試驗(yàn)(圖1)。三種樣品都呈長(zhǎng)圓形至橢圓形,長(zhǎng)7~9 cm,寬3~4 cm,表面淡黃棕色,有縱皺紋,頂端有殘留莖基,另一端有圓臍形疤痕。干燥、結(jié)實(shí)、具有天麻特有的氣味。三種樣品從外觀較難主觀區(qū)分。
經(jīng)測(cè)定,三種天麻樣品都符合藥典中規(guī)定的檢測(cè)指標(biāo)要求。其中GeA-17中天麻素和對(duì)羥基苯甲醇含量總和在三個(gè)樣品中最高(0.62%),并超過藥典要求(0.25%)的兩倍;其天麻素含量(0.54%)也是三個(gè)樣品中最高。GeA-17灰分含量最低,為GeAG的一半以下。GeA-G二氧化硫殘留量較高,但仍然僅是藥典限量要求的十分之一左右。GeA-16和GeA-17的二氧化硫殘留量都低于10 mg/kg。GeAG粗多糖含量在三個(gè)樣品中含量最高,分別是GeA-16和GeA-17的1.5倍和2.7倍。
表1 天麻中各種質(zhì)量指標(biāo)的測(cè)定
按藥典方法測(cè)定波密縣天麻的天麻素和對(duì)羥基苯甲醇,經(jīng)過工作站修正積分,天麻素在11.8~190.0 μg/mL線性良好(峰面積=21.020094×濃度+13.58277,R2=1.00000);對(duì) 羥 基 苯 甲 醇 在 5.6~90.0 μg/mL線性良好(峰面積=55.5249013×濃度+15.752843,R2=1.00000)。天麻標(biāo)準(zhǔn)品(混標(biāo),圖2A)和檢測(cè)樣品(圖2B)中的天麻素、對(duì)羥基苯甲醇兩主峰信號(hào)較強(qiáng)、分離度良好,峰形狹窄、對(duì)稱,雜峰少。而市售天麻提取物中僅發(fā)現(xiàn)天麻素,未發(fā)現(xiàn)對(duì)羥基苯甲醇。
圖2 天麻中天麻素和對(duì)羥基苯甲醇的HPLC圖譜
曾勇等[10]證明了在海拔1400~1800 m,紅、綠天麻都是在較高海拔中生產(chǎn)時(shí)產(chǎn)量和品質(zhì)上更優(yōu)。因此,高海拔可能是生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)天麻的一個(gè)天然優(yōu)勢(shì)。波密縣具有這樣獨(dú)特的氣候環(huán)境,滿足生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)天麻的周年生產(chǎn)環(huán)境條件。
結(jié)果顯示,波密縣天麻質(zhì)量符合藥典的指標(biāo)要求,其中天麻兩大活性物質(zhì)含量總和大幅超過藥典規(guī)定,也超過了地方標(biāo)準(zhǔn)《地理標(biāo)志產(chǎn)品大方天麻》DB 52/T 1118~2016的規(guī)定(≥0.30%);就天麻素而言,GeA-17和GeA-6超過了國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《地理標(biāo)志產(chǎn)品昭通天麻GB/T 19776-2008的規(guī)定(≥0.35%),表明波密縣天麻活性物質(zhì)含量較高。
試驗(yàn)中天麻素含量較高(2009年報(bào)道三樣品天麻素含量0.175%~0.235%;2011年報(bào)道六樣品天麻素含量0.040%~0.228%;2012年報(bào)道人工栽培樣品天麻素含量0.20%)[11-13],筆者的2017年樣品(GeA-17)也是比同一區(qū)域2016年樣品(GeA-16)的天麻素含量高??赡茈S著栽培技術(shù)的成熟,栽培效果得到提高。
天麻多糖與天麻外觀商品等級(jí)具有正相關(guān)性的理論[14],可能會(huì)給消費(fèi)者帶來一定誤導(dǎo)。因?yàn)楣P者發(fā)現(xiàn),天麻多糖含量高的樣品,天麻素和對(duì)羥基苯甲醇含量不一定也高。表明天麻的綜合藥效物質(zhì)含量可能和外觀商品等級(jí)不掛鉤。另外,天麻多糖含量的檢測(cè)未有標(biāo)準(zhǔn)方法,考慮到天麻含量超過10%[15],因此選用了鐵皮石斛中多糖的檢測(cè)法。然而此法仍未能完全排除淀粉的影響。再加上天麻在干燥[16]和提取[17]過程中,淀粉都會(huì)通過物理反應(yīng)影響多糖檢測(cè)。因此所測(cè)得的天麻多糖可能是近似值,天麻的多糖檢測(cè)仍需要一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的方法。
波密縣人工栽培天麻各項(xiàng)指標(biāo)符合藥典要求。另外,天麻生產(chǎn)年份或產(chǎn)地可能較難從外觀商品性狀中體現(xiàn),但其中的活性物卻存在較大差異。