駱玉玲 張輝 白海鋒 袁永鋒 李引娣

摘?要：為了解復(fù)合芽孢桿菌微生態(tài)制劑對(duì)克氏原螯蝦（Procambarus clarkii）養(yǎng)殖池塘水質(zhì)及螯蝦成活率的影響，設(shè)計(jì)了3組試驗(yàn)塘（使用復(fù)合芽孢桿菌）和3組對(duì)照塘（未使用復(fù)合芽孢桿菌）進(jìn)行92 d的養(yǎng)殖對(duì)比試驗(yàn)。結(jié)果表明，試驗(yàn)塘總體水質(zhì)優(yōu)于對(duì)照塘，與對(duì)照池相比，試驗(yàn)池氨氮含量顯著降低了69.6%，亞硝酸鹽含量顯著減少了545%，透明度顯著降低了23.5%， pH值和電導(dǎo)率變化顯著（P<0.05），試驗(yàn)塘克氏原螯蝦成活率顯著提高了128%，養(yǎng)成規(guī)格顯著增加了27.8%，生長(zhǎng)率顯著高于對(duì)照塘（P<0.05）。研究表明，濃縮復(fù)合芽孢桿菌微生態(tài)制劑對(duì)養(yǎng)蝦池塘的水質(zhì)具有一定的凈化效果，并可通過調(diào)節(jié)螯蝦免疫系統(tǒng)減少病害發(fā)生，提高螯蝦養(yǎng)殖成活率。

關(guān)鍵詞：復(fù)合芽孢桿菌;水質(zhì)調(diào)節(jié);成活率;克氏原螯蝦（Procambarus clarkii）

克氏原螯蝦（Procambarus clarkii）是我國(guó)主要的淡水養(yǎng)殖品種之一[1]，也是稻蝦共作、輪作模式首選品種。因其適應(yīng)性強(qiáng)，養(yǎng)殖效益高，近年來養(yǎng)殖規(guī)模逐年擴(kuò)大，集約化程度越來越高，但與此同時(shí)克氏原螯蝦發(fā)病率也逐年提高[2]。此外，在克氏原螯蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)中常大量使用抗生素、激素及化學(xué)消毒劑等，其結(jié)果不僅導(dǎo)致養(yǎng)殖克氏原螯蝦的藥物殘留超標(biāo)，而且還對(duì)養(yǎng)殖區(qū)域水環(huán)境產(chǎn)生影響。在這種形式下，克氏原螯蝦養(yǎng)殖走可持續(xù)發(fā)展的健康、生態(tài)之路迫在眉睫。微生態(tài)制劑因其遵循生態(tài)環(huán)境自然循環(huán)法則，在養(yǎng)殖水環(huán)境處理以及養(yǎng)殖動(dòng)物飼料添加等方面具有“三無”（無殘留、無污染、無毒副）作用和不產(chǎn)生抗性等優(yōu)點(diǎn)已被公認(rèn)為無公害生態(tài)制劑，可有效替代眾多抗生素類以及促生長(zhǎng)類藥物[3]?；诖?，為了更好地指導(dǎo)陜西地區(qū)克氏原螯蝦生態(tài)健康養(yǎng)殖模式的示范與推廣，筆者及其團(tuán)隊(duì)于2017年5-8月在渭河陜西華陰段克氏原螯蝦養(yǎng)殖池塘開展了微生態(tài)制劑應(yīng)用對(duì)比試驗(yàn)。

1?材料與方法

1.1?試驗(yàn)池塘

試驗(yàn)地點(diǎn)位于陜西省華陰市渭河灘養(yǎng)殖區(qū)，試驗(yàn)池塘面積均為0.4 hm2，水深1.5～1.8 m，池塘東西走向，長(zhǎng)方形，池底平坦，坡比1∶2.5，池塘設(shè)置對(duì)角線排灌，四周鋪設(shè)防逃網(wǎng)布，試驗(yàn)期間用水來自黃河，經(jīng)抽取、沉淀、過濾三道程序后進(jìn)入蝦池。

1.2?試驗(yàn)前準(zhǔn)備工作

1.2.1?池塘消毒?池塘在養(yǎng)蝦前要進(jìn)行冬排、淸整、除淤、凍土、消毒。在放養(yǎng)蝦苗的前10 d，采用生石灰消毒，用2 250～2 700 kg/hm2生石灰溶化后全池潑灑。生石灰使用7 d后加水至20～30 cm，使用生物有機(jī)肥肥水，用量控制在525～750 kg/hm2，促進(jìn)餌料生物生長(zhǎng)繁殖。

1.2.2?水草移栽?伊樂藻是養(yǎng)殖克氏原螯蝦的首選水草，在池塘消毒后種植，覆蓋面積控制在20%左右，水位保持在20～30 cm。4月上旬開始在伊樂藻周邊移栽輪葉黑藻和金魚藻，水草覆蓋面積25%～35%，此時(shí)加水至50～60 cm。6～8月份水溫過高時(shí)，水草覆蓋率50%～60%，水深控制在100～120 cm。

1.2.3?苗種選擇與投放?蝦苗采購(gòu)于渭南市華陰小龍蝦繁育場(chǎng)，選擇標(biāo)準(zhǔn)為：體格健壯、附肢完整、反應(yīng)靈敏、規(guī)格整齊（160～200只/kg），運(yùn)輸成活率不小于95%。5月初開始投放蝦苗，放養(yǎng)密度為12萬～15萬尾/hm2，同時(shí)分別混養(yǎng)鰱魚苗（20～40尾/kg）75～150 kg/hm2。蝦苗和魚苗入池前均要用3%～4%食鹽水浸洗5～10 min進(jìn)行消毒。投放蝦苗時(shí)間選擇在晴天水溫較低的早晨，淺水區(qū)多點(diǎn)投放，幼蝦自行爬入水中為宜。

1.3?對(duì)比試驗(yàn)

1.3.1?試驗(yàn)用微生態(tài)制劑?試驗(yàn)所用的微生態(tài)制劑為西安富祺生物科技有限公司生產(chǎn)的復(fù)合芽孢桿菌純粉，其主要成分包括枯草芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、硝化細(xì)菌等多種有益活菌，總菌數(shù)≥2.8×1010ind/g（有效期2年）。

1.3.2?試驗(yàn)方法?試驗(yàn)在3個(gè)面積相同的相鄰池塘中進(jìn)行，復(fù)合芽孢桿菌使用量為每水深1 m時(shí)全池潑灑750～900 g/hm2，使用頻次15 d;此外，采用拌餌形式，添加量控制在1 kg飼料添加2～3 g，同時(shí)選擇3個(gè)情況相似池塘作為對(duì)照池塘，對(duì)照塘不使用復(fù)合芽孢桿菌，6個(gè)池塘保持一致性日常管理。試驗(yàn)期間，投喂餌料以人工配合蝦飼料為主，天然動(dòng)植物性餌料為輔，堅(jiān)持“兩頭精，中間粗”的投喂原則，日投喂量控制在3%～5%。通過加注新水和使用微生態(tài)制劑進(jìn)行水質(zhì)管理，池塘透明度保持在30～40 cm，同時(shí)15～20 d用生石灰150～225 kg/hm2對(duì)池塘進(jìn)行水質(zhì)調(diào)節(jié)和底質(zhì)改良，生石灰的使用時(shí)間與微生態(tài)制劑的使用時(shí)間相隔10～15 d。

1.4?水質(zhì)監(jiān)測(cè)與蝦苗測(cè)定

試驗(yàn)期間每15 d對(duì)各個(gè)池塘的氨氮（NH+4-N）、亞硝態(tài)氮（NO-2-N）、溶解氧（DO）、pH值、電導(dǎo)率（EC）、透明度（SD）、水溫（WT）、水深（WD）等指標(biāo)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)采樣及檢測(cè)，檢測(cè)時(shí)間選擇在上午，每個(gè)池塘固定4個(gè)檢測(cè)點(diǎn)。隨機(jī)取螯蝦樣本50尾，用游標(biāo)卡尺測(cè)量體長(zhǎng)，用電子秤（001 g）測(cè)定體重。

1.5?數(shù)據(jù)處理與分析

特定生長(zhǎng)率（SGR）和成活率（SR）計(jì)算依據(jù)下面公式：

SGR（%/d）= 100 ×（lnWb- lnWa）/T

SR（%）= 100×（Pb/Pa）

其中，Wa、Wb分別為試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)克氏原螯蝦的體重，mg;Pa、Pb分別為試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)的克氏原螯蝦數(shù)量，尾;T為試驗(yàn)時(shí)間，d。

使用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，顯著性分析采用單因素分析中的最小顯著差數(shù)法檢驗(yàn)比較（P<0.05）。

2?結(jié)果與分析

2.1?池塘水環(huán)境監(jiān)測(cè)

從5月8日至8月10日共監(jiān)測(cè)水質(zhì)理化指標(biāo)7次，結(jié)果顯示試驗(yàn)池塘氨氮含量顯著低于對(duì)照池塘（P<0.05），相比降低了69.6%，亞硝酸鹽含量顯著低于對(duì)照池塘（P<0.05），相比減少了54.5%，兩個(gè)池塘的pH值和電導(dǎo)率均存在顯著差異（P<0.05），透明度均值相比顯著降低了235%（P<0.05）。試驗(yàn)池塘和對(duì)照池塘在水溫、水深和溶解氧之間無顯著差異（P>0.05），見表1。

注： 同一行相同字母代表差異不顯著（P>0.05），不相同字母代表差異顯著（P<0.05）。

2.2?小龍蝦生長(zhǎng)及成活

5月8日開始放苗，經(jīng)過3個(gè)月的對(duì)比試驗(yàn)，8月10日開始4口塘同時(shí)采用多點(diǎn)位設(shè)置地籠的方式進(jìn)行捕撈上市。統(tǒng)計(jì)測(cè)量結(jié)果（見表2）顯示，試驗(yàn)開始時(shí)試驗(yàn)塘與對(duì)照塘放養(yǎng)的螯蝦苗種大小無顯著性差異（P>0.05）;試驗(yàn)結(jié)束時(shí)試驗(yàn)塘螯蝦養(yǎng)殖平均成活率為76.5%，顯著高于對(duì)照池塘（P<0.05）。生長(zhǎng)參數(shù)：試驗(yàn)塘特定生長(zhǎng)率為1.89%/d，平均規(guī)格為38.6 g/尾，均顯著大于對(duì)照塘（P<0.05），兩個(gè)池塘的螯蝦平均體長(zhǎng)差異不顯著（P>0.05）。

注：同一列相同字母代表差異不顯著（P>0.05），不相同字母代表差異顯著（P<0.05）

3?討論

有研究顯示，微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中潑灑使用后可快速分散，分布于水體各水層不同部位，參與養(yǎng)殖動(dòng)物殘餌、糞便以及水體中有機(jī)質(zhì)的分解，加快水環(huán)境改良，抑制有害微生物滋生[4]。本研究顯示，復(fù)合芽孢桿菌純粉能有效降低克氏原螯蝦池塘的pH值、亞硝酸鹽濃度、氨氮濃度，增加溶解氧含量，這一結(jié)果與南美白對(duì)蝦、中華絨螯蟹養(yǎng)殖中使用微生態(tài)制劑試驗(yàn)結(jié)果相似[4-5]。這表明水產(chǎn)用微生態(tài)制劑在淡水經(jīng)濟(jì)甲殼類養(yǎng)殖期間對(duì)維持池塘水環(huán)境平衡具有積極的促進(jìn)作用。

微生態(tài)制劑作為水產(chǎn)養(yǎng)殖飼料添加劑，其作用主要表現(xiàn)為在養(yǎng)殖動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生各種消化酶參與能量代謝，提高動(dòng)物對(duì)飼料的利用率，同時(shí)產(chǎn)生的有些酶類對(duì)促進(jìn)養(yǎng)殖動(dòng)物的生命活動(dòng)起著重要作用[3]。此外，微生態(tài)制劑所產(chǎn)生的大量有益菌群與病原菌間就生存和繁殖的空間、時(shí)間、定居部位以及營(yíng)養(yǎng)素等展開競(jìng)爭(zhēng)，有效抑制了病原菌的生存、繁殖、定居以及附著，改善了養(yǎng)殖動(dòng)物體內(nèi)外生存環(huán)境，提高了養(yǎng)殖動(dòng)物的存活率[6]。對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)池塘克氏原螯蝦成活率和生長(zhǎng)效果均顯著高于對(duì)照組，此結(jié)果與賈秋紅等[7]、高宏偉等[8]研究的結(jié)果一致，這說明水產(chǎn)用微生態(tài)制劑在提高養(yǎng)殖動(dòng)物成活率上具有重要作用。有研究發(fā)現(xiàn)，水產(chǎn)用的微生態(tài)制劑中大部分有益菌能使動(dòng)物機(jī)體免疫器官發(fā)育加快，T、B、淋巴細(xì)胞的數(shù)量增多，從而增強(qiáng)機(jī)體免疫力，提高養(yǎng)殖成活率[9]。此外，微生態(tài)制劑可通過物種間的競(jìng)爭(zhēng)抑制動(dòng)物腸道中的有害細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖，其中芽孢桿菌還能通過提高飼料轉(zhuǎn)化和吸收，促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)。

近年來隨著生物技術(shù)不斷創(chuàng)新，具有特異性和針對(duì)性的新菌株獲得成功培育，同時(shí)其穩(wěn)定性也在很大程度上得到了提高，因此，適宜在水產(chǎn)上使用的微生態(tài)制劑終將成為飼料工業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)中最具潛力的添加劑與改良劑[10]。在我國(guó)目前生態(tài)環(huán)境大保護(hù)的歷史背景下，水產(chǎn)養(yǎng)殖要向著提質(zhì)增效、綠色環(huán)保方向發(fā)展，陜西省克氏原螯蝦養(yǎng)殖也必將走一條清潔養(yǎng)殖、健康養(yǎng)殖之路，微生態(tài)制劑在克氏原螯蝦健康生態(tài)養(yǎng)殖中的應(yīng)用前景廣闊。

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