梁健+李永仁+郭永軍+高山+董洪寶+邢克智+閆喜武

摘 要：于2015年7月在天津大港地區(qū)開展青蛤的工廠化人工育苗生產(chǎn)性試驗，以探索青蛤最適的孵化密度和培育密度；并通過設(shè)置10個鹽度階梯（5‰～50‰），研究了不同鹽度對青蛤發(fā)育各階段的影響。試驗結(jié)果表明：青蛤受精卵孵化密度為8～12個/mL，其孵化率能達較高水平，幼蟲培育密度為8～12個/mL時幼蟲生長速度和存活率可達較高水平；浮游期幼蟲、變態(tài)期幼蟲及稚貝的最適鹽度范圍均是20‰～25‰，最利于青蛤浮游幼蟲的生長，其變態(tài)率高，畸形率低，D形幼蟲游動迅速，攝食積極。此鹽度也最利于稚貝的生長。

關(guān)鍵詞：青蛤；鹽度；孵化；成活率

青蛤（Cyclina sinensis）屬簾蛤科，棲息在沿海灘涂泥灘地帶，為廣溫、廣鹽性貝類。其營養(yǎng)豐富，味道鮮美，深受人們喜愛，曾廣泛分布于沿海大部分海水池塘，但由于缺乏保護意識，長期過度采捕，導致自然資源大幅減少，天津地區(qū)現(xiàn)僅存于塘沽與大港的個別海水池塘[1-3]。因此對青蛤的人工養(yǎng)殖正逐步開展起來，并取得良好的收益。養(yǎng)殖青蛤投資少、見效快，但是由于苗種缺乏，限制了青蛤養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展[4-6]。

目前來說天津地區(qū)養(yǎng)殖貝類的苗種主要來自南方的一些沿海地區(qū)，但這樣的苗種并不能完全適應(yīng)本地的養(yǎng)殖環(huán)境，造成越冬養(yǎng)殖時大量死亡，限制天津地區(qū)的青蛤產(chǎn)業(yè)發(fā)展。利用本地貝類種群，進行工廠化人工繁育土著苗種，是在天津發(fā)展貝類養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的重要前提[7-8]。而發(fā)展青蛤的人工育苗技術(shù)，為青蛤的養(yǎng)殖提供本地苗種，可以更快地實現(xiàn)農(nóng)民增收、企業(yè)增效、產(chǎn)業(yè)發(fā)展。

關(guān)于青蛤方面的研究起步時間較晚，我國學者對青蛤的生態(tài)結(jié)構(gòu)、繁殖生物學、生活習性等都進行了研究，在工廠化和土池育苗試驗成功后，又對青蛤幼蟲的餌料，孵化和培育時的溫度、鹽度，附著基的選擇和其他方面都做了深入的研究，大規(guī)模青蛤育苗技術(shù)和水平都比之前更進一步。但這些研究的對象主要為南方當?shù)仄贩N，而我國海岸線很長，地理環(huán)境存在著巨大差異。閆喜武[9]等報道過菲律賓蛤仔大連群體和莆田群體在卵徑、D形幼蟲大小、浮游期長短及平均日增長量上均存在差異。鹽度是影響雙殼類存活、生長發(fā)育的重要因素之一，當鹽度不適宜時會降低海洋貝類幼蟲對食物的消化吸收效率和不良環(huán)境的抵抗能力，嚴重影響貝類幼蟲的存活和生長能力[10]。關(guān)于海水鹽度對于貝類生長發(fā)育的影響國內(nèi)外已有不少報導，但因種類和發(fā)育階段的不同，適應(yīng)范圍的差異也比較大[11-12]。在繁殖過程中，貝類幼蟲對鹽度的變化較為敏感，在最適鹽度范圍內(nèi)進行青蛤苗種繁育工作可以保證幼蟲有較快的生長速度，同時提高苗種的存活率[13-15]。因此，本文研究了鹽度變化對天津土著青蛤浮游期及稚貝期的影響，對青蛤不同時期的存活生長進行了比較，分析了不同時期的青蛤?qū)}度的適應(yīng)策略，對在天津開展青蛤本地苗種繁育具有重要意義。

1 試驗材料

本次人工育苗試驗于2015年4月中旬開始進行，分兩批次在天津市濱海新區(qū)海升水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司的沉淀池中采捕二齡的青蛤，選擇殼面無損壞，活力良好，殼長大于30 mm的個體作為種貝，種貝為本地土著品種。

2 試驗設(shè)計

2.1 孵化密度、幼蟲培育密度對青蛤幼蟲變態(tài)率、生長和存活影響

挑選好的種貝裝入扇貝籠中吊掛在室內(nèi)水泥池中，經(jīng)25天左右的升溫催熟達到性成熟，通過陰干流水等方法刺激種貝產(chǎn)卵排精，卵受精4 h后進行洗卵，以免造成受精卵產(chǎn)生畸形。洗卵后將受精卵分布到孵化池中，調(diào)整密度為4、8、12、16個/mL，大概20 h后發(fā)育到D形幼蟲，測量不同孵化密度下的孵化率。每天半量換水一次，水溫25～28 ℃，青蛤培育期間鹽度18‰～22‰，pH值8.4～8.6。

2.2 鹽度對青蛤各時期生長發(fā)育和存活的影響

青蛤幼蟲及稚貝的培育容器為2L的燒杯，在5‰～50‰之間設(shè)計10個梯度，分別為5‰、10‰、15‰、20‰、25‰、30‰、35‰、40‰、45‰、50‰，并設(shè)一個平行試驗組。試驗所用的海水都是經(jīng)過沙濾的海水，用海水晶或淡水調(diào)節(jié)至所需的鹽度，使用日本ATAGO手持光學鹽度計測定鹽度，水溫在25～28 ℃。受精卵孵化密度為15個/mL，浮游期幼蟲培育密度為8個/mL，每天半量換水一次，測定不同鹽度下青蛤受精卵孵化率、浮游期幼蟲和稚貝的生長、存活及變態(tài)率。

孵化期試驗：凡出現(xiàn)殼面扭曲，左右殼不對稱，直鏈絞合部彎曲，殼緣有缺刻，面盤異常的D形幼蟲計為畸形幼蟲。

浮游期試驗：在不同鹽度的10個燒杯中布置相同密度（8個/mL）的青蛤D形幼蟲，平均殼長在111±6.41 μm，共培育5 d（青蛤浮游期相對較短）。

稚貝期試驗：在育苗生產(chǎn)的水泥池中取大小規(guī)格基本一致的匍匐幼蟲用于稚貝變態(tài)試驗，平均殼長在180±9.18 μm，培養(yǎng)20 d左右（雙水管稚貝出現(xiàn)為止）。

3 結(jié)果

3.1 孵化率

如表1所示，青蛤受精卵孵化密度為8～12個/mL時，其孵化率能達到80%以上，而過低或過高的培育密度均會影響受精卵的孵化率。

由表2和表3可知，4個/mL的培育密度下生長速度最快，但存活率較低，16個/mL的培育密度生長速度最慢，且存活率也最低。在8～12個/mL的條件下生長速度和存活率均處于較高水平。

3.2 鹽度對青蛤孵化情況的影響

由圖1可知，在25～28 ℃的水溫下，青蛤受精卵可在10‰～40‰的鹽度范圍內(nèi)發(fā)育到D形幼蟲，但在10‰和40‰的鹽度中變態(tài)非常低，分別為11.5%和22.6%，絕大多數(shù)受精卵在發(fā)育到擔輪幼蟲前后就不再發(fā)育，不久沉底死亡；在鹽度5‰、45‰和50‰的孵化條件下，受精卵不能正常分裂發(fā)育；適合受精卵孵化鹽度范圍是15‰～30‰，而最適孵化的鹽度范圍為20‰～25‰，其變態(tài)率在82.3%～84.6%，且畸形率低，D形幼蟲游動迅速，攝食積極。

3.3 鹽度對浮游幼蟲生長、存活及變態(tài)的影響

D形幼蟲剛放入5‰的鹽度環(huán)境中后，全部緊閉雙殼，沉入杯底，顯微鏡下觀察殼內(nèi)的面盤和胃內(nèi)纖毛仍在運動，48 h后全部死亡；在10‰鹽度環(huán)境下，D形幼蟲在24 h內(nèi)游動正常，未表現(xiàn)出不適狀態(tài)，但隨時間的延長死亡量逐漸增多，3 d后達到45%以上，且存活下來的幼蟲生長速度偏慢，試驗結(jié)束時的平均生長率僅為4.76 μm/d；D形幼蟲對高鹽度反應(yīng)明顯，在鹽度40‰下5d后的存活率為36.2%，而存活下來的幼蟲大多處于殼頂中期，并無法變態(tài)成匍匐幼蟲。鹽度45‰組中，5 d后的幼蟲存活僅為12.5%，幾乎沒有生長，平均生長率2.64 μm/d，試驗結(jié)束時仍處于D形幼蟲階段。而在鹽度50‰環(huán)境下的幼蟲游動異常，在24 h內(nèi)便全部死亡，無法存活；青蛤浮游幼蟲在15‰～30‰的鹽度范圍下適合生長，20‰～25‰是最適宜青蛤浮游幼蟲的鹽度范圍（表4）。

3.4 鹽度對稚貝生長、存活及變態(tài)的影響

表5所示，匍匐幼蟲在鹽度5‰的低鹽環(huán)境和45‰的高鹽環(huán)境中，在24 h時死亡率即超過50%，經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)僅有極少量個體發(fā)育至單水管稚貝，但無法發(fā)育至雙水管稚貝；在50‰的超高鹽度環(huán)境中72 h內(nèi)匍匐幼蟲便全部死亡；在鹽度40‰組中經(jīng)過22 d的發(fā)育有12.5%的個體發(fā)育至雙水管稚貝，但次鹽度下的稚貝生長速度較慢，平均日生長率僅為4.82 μm/d，且大小參差不齊，活力較差，殼表面粘有大量污物；鹽度在10‰～35‰的各試驗組中，雙水管稚貝的存活率均超多50%，即超50%的個體發(fā)育變態(tài)成雙水管稚貝，且在匍匐幼蟲時期運動能力強，足強勁有力，攝食良好，生長速度較快。其中鹽度20‰～25‰中，單水管期稚貝的存活率均超過85%，日生長率也超過了10 μm/d，發(fā)育到雙水管稚貝時的存活率仍然在80%以上，且日生長率達到12 μm/d左右，稚貝不僅大小整齊、活力良好，而且所需的變態(tài)時間也為最短，僅需14 d左右。10‰～35‰為稚貝生長的適宜鹽度范圍，在20‰～25‰之間最為合適。

4 討論

4.1 孵化密度、培育密度對生長、存活的影響

本研究結(jié)果顯示青蛤受精卵孵化密度為8～12個/mL時，其孵化率能達到80%以上；生長速度最快是在4個/mL的培育密度下，但存活率較低，生長速度最慢是在16個/mL的培育密度，且存活率也最低。在8～12個/mL的條件下生長速度和存活率均處于較高水平，綜合考慮，青蛤的最適培育密度為8～12個/mL。

4.2 青蛤發(fā)育情況

灘涂貝類是我市主要的水產(chǎn)產(chǎn)業(yè)之一，但貝類苗種來自外地，在本地適應(yīng)性差。建立本地土著青蛤群體的育苗技術(shù)，有助于降低養(yǎng)殖風險。天津青蛤群體主要生活于海水池塘中，鹽度差異顯著，青蛤的幼蟲發(fā)育與常見的文蛤、菲律賓蛤仔等灘涂雙殼類相比較有許多不同，其卵徑和D形幼蟲均要大于其他種類，但浮游期最短、附著變態(tài)時幼蟲規(guī)格最小，20 d后變態(tài)成雙水管稚貝僅320～340 μm，比其他種類相同天數(shù)的稚貝殼長要小，說明青蛤稚貝的生長速度并不快。本研究中青蛤的最快生長速度為12.48 μm/d（鹽度20‰時），較其他種類要慢一些，符合上述結(jié)論。青蛤浮游期短，說明從外界獲取食物的時間短，外源性能量積累相對較少，這可能是導致其變態(tài)規(guī)格相對較小的原因。

4.3 適宜青蛤生長的鹽度

生活在海洋中的貝類，必然受到鹽度的影響。由于不同種類對海水環(huán)境的要求不同，造成了對不同鹽度的適應(yīng)性[16]。海水鹽度與貝類滲透壓的調(diào)節(jié)緊密相關(guān)，一旦海水鹽度的變化范圍超過了海洋生物的調(diào)節(jié)能力，就可能造成生物體的死亡[17]。本試驗得出孵化期和浮游期幼蟲的適宜鹽度范圍為15‰～30‰，變態(tài)期的適宜鹽度范圍10‰～35‰，最適鹽度范圍均為20‰～25‰。結(jié)果表明，幼蟲對低鹽環(huán)境的適應(yīng)能力要強于高鹽環(huán)境，并且在低鹽環(huán)境中生長速度快于高鹽。隨著幼蟲的發(fā)育和相應(yīng)器官的形成，對鹽度的耐受能力逐漸增加，適宜鹽度范圍也逐漸變廣。這種現(xiàn)象廣泛出現(xiàn)在廣鹽性貝類中，如泥蚶、文蛤等。而對于狹鹽性貝類正好相反，如菲律賓蛤仔等[18-20]。這種適應(yīng)性可能是由于青蛤自然分布于河口附近灘涂的中高潮帶處，經(jīng)常性的淡水匯入加之長期的自然進化造成青蛤?qū)}度的廣泛適應(yīng)性，并表現(xiàn)出對低鹽環(huán)境的適應(yīng)能力高于高鹽環(huán)境。

5 結(jié)論

以上試驗結(jié)果對青蛤人工育苗生產(chǎn)有重要的指導作用：

土池育苗或工廠化育苗前期海水鹽度變化幅度應(yīng)控制在20%～25%為宜；室內(nèi)人工育苗生產(chǎn)中，青蛤受精卵孵化密度為8～12個/mL時，能夠保證有較高的孵化率；青蛤的最適培育密度為8～12個/mL。

進入變態(tài)期后，幼蟲要經(jīng)歷足、鰓、次生殼、進出水管的形成及面盤的退化等一系列的生理機能和生活習性的重大改變，才能變態(tài)發(fā)育成稚貝，育苗生產(chǎn)往往在這段時期出現(xiàn)較高死亡率，所以幼蟲下潛附著后的半個月時間里技術(shù)管理工作顯得尤為重要，應(yīng)保證餌料的充足、營養(yǎng)的全面及水質(zhì)的良好。

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（收稿日期：2016-11-18）