王代波 劉國華 封天洪
摘 ? 要:為進一步提升野生多穗柯資源的利用價值,針對野生多穗柯活性成分進行了系統(tǒng)的分析,同時系統(tǒng)對比了水煎煮法與超聲波輔助提取法(乙醇濃度依次選取10%、30%、50%、70%、90%)的黃酮提取率,希望為多穗柯的推廣應用提供一定的參考。
關鍵詞:野生多穗柯;活性成分;提取物
多穗柯(Lithocarpus polystachyus Rehd)亦稱作甜茶,其屬于殼斗科,是一種藥食兩用的植物,在藥、茶及糖等3個領域都有著廣泛的應用[1]。從多穗柯活性成分進行分析,黃酮類化合物是其主要的活性成分,主要集中在葉部,通過多年的研究,當前從多穗柯葉部分離出的黃酮類化合物數量已經達到20余種。依照有關文獻資料能夠看出,多穗柯中的黃酮類化合物能夠發(fā)揮抑菌、抗過敏、抗氧化以及降血糖等藥理功能。上述藥理功能當中黃酮類成分主要包含3-羧基根皮苷、根皮苷、三葉苷。根皮苷、三葉苷的生物活性在諸多領域有著廣泛的應用,包括化妝品、藥物及食品等[2]。為了進一步了解多穗柯活性成分,促進多穗柯資源的開發(fā),進一步研究了野生多穗柯活性成分,現針對相關活性成分進行如下分析。
1 ? 材料及方法
1.1 ? 材料選取
材料選擇貴州羅甸地區(qū)野生多穗柯,采集多穗柯葉,在進行沖洗、通風晾干處理之后,將其置入烘箱中烘干處理。選擇粉碎機完全粉碎多穗柯葉,然后選擇60孔(邊長0.25 mm)與120孔(邊長0.125 mm)的檢驗篩實施篩選處理,最終選擇中間位置的樣品。
1.2 ? 標準溶液制備
選擇10 mg蘆丁對照品(通過120 ℃減壓干燥處理之后,保持恒質量),將其置入50 mL容量瓶當中,同時融入30 mL 85%濃度的乙醇。通過微熱讓溶液完全溶解,放置到自然冷卻狀態(tài),融入乙醇稀釋到對應的刻度,搖勻處理之后,制作標準蘆丁對照品溶液,濃度為0.2 mg/mL。
1.3 ? 標準曲線制備
采用不同質量的蘆丁標準品(0 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL)融入25 mL容量瓶當中,融入1 mL濃度5%的亞硝酸鈉溶液,搖勻之后進行6 min的放置,接著融入10 mL濃度1.0 mol/L的NaOH,最終選擇85%的乙醇進行稀釋處理,具體需要稀釋到對應刻度,搖勻之后進行15 min的放置。選擇第1瓶行空白,選擇在510 m位置進行吸光度測量,具體是以吸光值(y)當作縱坐標,蘆丁濃度(x)則作為橫坐標,進行標準曲線的繪制,最終方程為“y=0.074 7x-0.000 1,r=0.999 2”。
1.4 ? 樣品黃酮含量測定
選取5 g多穗柯嫩葉,進行干燥之后粉碎處理,融入乙醇溶液之后進行24 h的浸泡。采用超聲波實施提取、過濾,完成蒸發(fā)之后將乙醇回收,加水定容到100 mL,獲取對應的樣品溶液。選取1 mL樣品溶液,置入25 mL容量瓶當中,融入1 mL的5%濃度亞硝酸鈉,搖勻之后進行6 min的放置,再融入10 ml濃度1 mol/L的氫氧化鈉,加水定容到100 mL,搖勻之后進行15 min的放置。選擇分光光度法在λ=510 nm的位置進行吸光度的測量,然后綜合參考回歸方程進行黃酮含量的計算。
2 ? 結果
選擇6份5 g的多穗柯嫩葉,進行烘干粉碎之后進行處理,選擇水煎煮法與超聲波輔助提取法(乙醇濃度依次選取10%、30%、50%、70%、90%),針對樣品實施黃酮含量測定,詳細結果見表1。
根據表1可知,選擇超聲波輔助提取法能夠顯著提升多穗柯當中黃酮分的提取率。在溶劑極性持續(xù)變小的情況下,黃酮提取率也呈現為不斷增大的趨勢,而在70%乙醇濃度的情況下,能夠達到最高的黃酮提取率,90%乙醇濃度情況下的黃酮提取率則呈現降低的趨勢,主要原因在于溶劑極性變小,多穗柯當中其余物質也同時被分離,導致黃酮提取率有所降低[3]。
3 ? 討論
多穗柯作為現階段廣泛應用的一種藥食同源性植物,其具有較高含量的茶多酚、黃酮類化合物,但其本身的咖啡堿、還原糖相對較低,所以其具有理想的藥用價值、食用價值[4]。根據研究內容可以看出,多穗柯當中黃酮的極性屬于中性極性物質,其無疑為多穗柯總黃酮提取提供了有效的參數。從研究結果能夠看出,超聲波輔助提取法的優(yōu)勢突出,其主要是通過超聲波機械作用、空化作用,促進植物細胞組織變形或者破壁,能夠顯著提升總黃酮提取率,70%濃度乙醇是最佳方案。
參考文獻:
[ 1 ] 王坤,黃曉露,李寶財,等.30個多穗柯種源主要經濟性狀及活性成分分析與評價[J].西南農業(yè)學報,2019,32 (5):1051-1056.
[ 2 ] 于沙蔚.反相高效液相色譜法測定福建多穗柯中不同部位根皮苷的含量[J].海峽藥學,2018,30(7):59-60.
[ 3 ] 黃曉露,藍金宣,李寶財,等.不同光質處理對多穗柯幼苗光合色素及抗氧化酶的影響[J].廣西林業(yè)科學,2017,46(4):354-359.
[ 4 ] 王坤,李開祥,陳金艷,等.野生多穗柯主要活性成分及其含量變化[J].經濟林研究,2016,34(4):96-100,122.
(收稿日期:2019-10-23)