李麗霞 王鳳亞 趙國忠 戶寧

摘 要：在進行肺結(jié)核疾病的治療過程中，卷曲霉素可以說是一種比較常見的治療性藥物，能夠?qū)σ恍┓谓Y(jié)核高發(fā)地區(qū)的經(jīng)濟發(fā)展帶來促進作用。在本文的研究過程中，筆者對卷曲霉素菌種進行選預的過程中，主要是通過紫外線誘變法和快中子輻射來進行的，在改進過濾工藝的基礎(chǔ)上提高了原液的質(zhì)量和產(chǎn)品品質(zhì)，具有非常重要的作用。

關(guān)鍵詞：卷曲霉素;發(fā)酵質(zhì)量;研究

對于卷曲霉素的生產(chǎn)成本而言，發(fā)酵水平的高低有著直接的影響作用。很多情況下，發(fā)酵單位對于卷曲霉素的發(fā)酵水平都比較低，這主要是因為在穩(wěn)定性上菌種比較差。如果能夠選育到優(yōu)良的菌株，就能在使用價值上對菌株進行提高，同時還能讓產(chǎn)品的質(zhì)量水平更高。本文主要是對卷曲霉素的發(fā)酵質(zhì)量進行研究分析，對發(fā)酵原液的pH值和過濾溫度進行控制，優(yōu)化工藝，研究二者與產(chǎn)品中雜質(zhì)含量的關(guān)系。

1 工藝簡介

對硫酸卷曲霉素進行發(fā)酵的過程主要是在液體培養(yǎng)基中完成的，這種液體培養(yǎng)中的碳、磷、氮等主要來自于葡萄糖、魚粉、淀粉或者磷酸鹽中，在對其進行培養(yǎng)的過程中需要進行攪拌，并保持溫度適宜，一般情況下是處于27.5℃到32.5℃之間，然后經(jīng)過三級發(fā)酵生物最終合成卷曲霉素。在卷曲霉素發(fā)酵完成后，應該利用草酸對發(fā)酵液進行酸化和加熱，加熱的目的主要是為了將發(fā)酵液中那些堿性蛋白、培養(yǎng)基殘渣等不溶性物質(zhì)從其中過濾掉，因為這部分雜質(zhì)的含量比較大，如果不進行過濾很容易影響最終的發(fā)酵效果。之后需要對發(fā)酵原液進行中和，這個過程是利用氫氧化鈉實現(xiàn)的，并且選用的氫氧化鈉是液態(tài)的。最后就可以形成符合離子交換工藝要求的硫酸卷曲霉素原液。

2 高產(chǎn)菌株的誘變和選育

對于卷曲霉素進行發(fā)酵時，最重要的就是對發(fā)酵質(zhì)量進行提高，而提高發(fā)酵質(zhì)量的一個主要手段便是進行誘變育種。在誘變育種中，紫外線誘變的方法又是其中最經(jīng)常用到并且在現(xiàn)階段看來最有效的一種方法之一?？熘凶诱T變法在電離密度方面比較大，而且能夠讓點發(fā)生突變，讓染色體出現(xiàn)畸變的現(xiàn)象，這種特點在很多抗生素中獲得了顯著應用，主要作用于抗生素產(chǎn)生菌的誘變育種。在實際的發(fā)酵過程中，很多單位都是先對卷曲霉素利用紫外線誘變方法然后對其利用快中子誘變法，利用前一種方法主要是為了讓高產(chǎn)株突變株在誘變之后成為出發(fā)菌株，在利用第二種方法對其進行二次篩選。這種兩種方法進行結(jié)合的方式能夠有效提高誘變的致死率和營養(yǎng)缺陷的誘發(fā)率。在進行研究的過程中，從研究對象中選擇出高產(chǎn)菌株JQ1001、JQ100B、JQ10-05，在搖瓶效價上進行對比時能夠發(fā)現(xiàn)其相對于出發(fā)菌株，提高了將近15%，在將新菌株正式的投入到發(fā)酵生產(chǎn)使用后，和2017年進行對比發(fā)現(xiàn)在平均值上上漲了8.2%，而且在穩(wěn)定性上也比較好。

3 對原液的質(zhì)量進行提高

在對卷曲霉素進行過濾時，應該按照以下的工藝流程：在對卷曲霉素進行發(fā)酵完畢后，應該對pH值進行調(diào)整將其調(diào)節(jié)為酸性，這個調(diào)節(jié)過程主要是用草酸對發(fā)酵液進行處理，之后將助濾劑加入到其中，對其進行加熱，利用蒸汽使其溫度達到90℃。在進行過濾時利用板框過濾鏡進行過濾，然后對pH值進行調(diào)節(jié)至堿性，這個調(diào)節(jié)過程主要是用液體氫氧化鈉實現(xiàn)的，并且要在酸性過濾液冷卻后進行上述過程。之后對結(jié)果進行檢驗，直到檢驗合格后再將提供工序進行提交。但是在這個過程中，原液中的雜質(zhì)含量在比較粗獷的工藝過程下一直比較高。為了有效解決這種問題，針對這些雜質(zhì)產(chǎn)生的原因進行了分析和研究，對于發(fā)酵原液酸化的pH值和過濾溫度控制工藝進行對比，分析的結(jié)果過濾前原液CA I前雜質(zhì)的產(chǎn)生量和加熱時間的長度呈現(xiàn)正比狀態(tài)，也就是說加熱的時間越長，過濾前原液CA I前雜質(zhì)的產(chǎn)生量就會越高;同時過濾的時間越短，前原液CA I前雜質(zhì)的產(chǎn)生量就越低。

4 實驗結(jié)果分析

通過對上述實驗進行研究，可以得到兩種結(jié)論，分別是：①在利用紫外線誘變法和快中子誘變法進行篩選后，從篩選過程中篩選出高產(chǎn)菌株JQ1001、JQ100B、JQ10-05，在搖瓶效價上和出發(fā)菌株相比提高了15%左右，在和2017年相比的時候，新菌株投入發(fā)酵生產(chǎn)使用后相比增長了2.8%，而且在遺傳穩(wěn)定性上也比較高;②對目前的過濾工藝進行了優(yōu)化，并在新工藝的基礎(chǔ)上對發(fā)酵原液的酸性pH值進行了確定，改造了過濾、發(fā)酵過程中使用的各種設備，對過濾溫度控制工藝進行了優(yōu)化。除此之外，還將原液中雜質(zhì)的含量進行了降低，甚至低于工藝所要求的，從而提高了原液的質(zhì)量。

5 結(jié)束語

綜上所述，卷曲霉素對于肺結(jié)核的治療有著非常重要的作用，為相關(guān)企業(yè)和部門帶來了巨大的經(jīng)濟收益。因此為了降低其生產(chǎn)成本，對其發(fā)酵質(zhì)量進行提高非常重要。在對發(fā)酵質(zhì)量進行控制的過程中，應該將原液質(zhì)量作為主要的研究重點，來提高企業(yè)的產(chǎn)品質(zhì)量，獲得利潤上的提升。

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