楊愛華 薛會光 肖華 張蕊 王璽 劉雯

[摘要]?目的?檢測EB病毒相關(guān)胃癌（EBVaGC）病人血清中EB病毒相關(guān)抗體，對EBVaGC進行快速的鑒別診斷。

方法?應(yīng)用原位雜交技術(shù)確認EBVaGC病人20例，以臨床病理資料與之相匹配的EB病毒陰性胃癌（EBVnGC）病人60例作對照，應(yīng)用化學(xué)發(fā)光法檢測EB病毒相關(guān)抗體水平，采用陽性率、靈敏度、特異度、陽性似然比、陽性預(yù)測值等參數(shù)來評估這些抗體診斷EBVaGC的效率。

結(jié)果?EBVaGC組與EBVnGC組病人血清EBV EA IgG、EBV VCA IgA陽性率比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=23.89、3.88，P<0.05）;兩組血清EBV EA IgA、EBV VCA IgM、EBV VCA IgG、EBV NA IgG陽性率比較差異無顯著性（χ2=1.89～2.88，P>0.05）。EBV EA IgG、EBV VCA IgA陽性似然比、陽性預(yù)測值均高于其他4項抗體（χ2=5.19～20.18，P<0.05）。EBV VCA IgG、EBV NA IgG靈敏度雖高，但是特異度極低;EBV EA IgA特異度雖高，但是靈敏度偏低;EBV EA IgG、EBV VCA IgA較其他相關(guān)抗體兼具較高的靈敏度和特異度（χ2=11.65～29.62，P<0.05）。

結(jié)論?對EB病毒抗體進行血清學(xué)檢測，有利于EBVaGC的有效篩查，且不同抗體檢測的靈敏度、特異度有一定差異;聯(lián)合檢測可以彌補單項抗體指標無法兼顧靈敏度、特異度的缺點，為EBVaGC的快速鑒別診斷提供可靠依據(jù)，具有較高的臨床應(yīng)用價值。

[關(guān)鍵詞]?皰疹病毒4型，人;胃腫瘤;抗體，病毒

[中圖分類號]?R373.9;R735.2

[文獻標志碼]?A

[文章編號]??2096-5532（2019）06-0685-03

doi：10.11712/jms201906013

[開放科學(xué)（資源服務(wù)）標識碼（OSID）]

DETECTION OF SERUM ANTIBODIES TO EPSTEIN-BARR VIRUS IN PATIENTS WITH EPSTEIN-BARR VIRUS-ASSOCIATED GASTRIC CARCINOMA AND ITS CLINICAL SIGNIFICANCE

YANG Aihua， XUE Huiguang， XIAO Hua， ZHANG Rui， WANG Xi， LIU Wen

（Department of Clinical Laboratory， The Affiliated Hospital of Qingdao University， Qingdao 266003， China）

[ABSTRACT] Objective To make a rapid differential diagnosis of Epstein-Barr （EB） virus-associated gastric carcinoma （EBVaGC） by detecting the serum antibodies to EB virus in patients with EBVaGC.

Methods A total of 20 patients with EBVaGC confirmed by in situ hybridization were enrolled as EBVaGC group， and 60 patients with EB virus-negative gastric carcinoma （EBVnGC）， matched for clinicopathological data， were enrolled as EBVnGC group. Chemiluminescence was used to measure the levels of antibodies to EB virus， and the parameters including positive rate， sensitivity， specificity， positive likelihood ratio， and positive predictive value were used to evaluate the efficiency of these antibodies in the diagnosis of EBVaGC.

Results There were significant differences between the EBVaGC group and the EBVnGC group in the positive rates of EBV EA IgG and EBV VCA IgA （χ2=23.89，3.88;P<0.05）， and there were no significant differences in the positive rates of EBV EA IgA， EBV VCA IgM， EBV VCA IgG， and EBV NA IgG between the two groups （χ2=1.89-2.88，P>0.05）. EBV EA IgG and EBV VCA IgA had significantly higher positive likelihood ratio and positive predictive value than the other four antibodies （χ2=5.19-20.18，P<0.05）. EBV VCA IgG and EBV NA IgG had high sensitivity and extremely low specificity， while EBV EA IgA had high specificity and re-

latively low sensitivity， and EBV EA IgG and EBV VCA IgA had higher sensitivity and specificity than the other antibodies （χ2=11.65-29.62，P<0.05）.

Conclusion Serological detection of antibodies to EB virus is beneficial to the effective screening for EBVaGC and different antibodies have different sensitivities and specificities. Combined measurement can overcome the shortco-

ming that a single antibody is unable to perform well in both sensitivity and specificity and provide reliable evidence for the rapid differential diagnosis of EBVaGC， and therefore， it has a high clinical value.

[KEY WORDS] herpesvirus 4， human; stomach neoplasms; antibodies， viral

胃癌是消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一，具有高流行率和高死亡率的特點，已成為危害人類健康和安全的常見疾病之一[1]。1993年，TOKUNAGA等[2]首次應(yīng)用EBER原位雜交技術(shù)證實部分胃癌病人腫瘤細胞內(nèi)存在EB病毒，并將該部分胃癌定義為EB病毒相關(guān)胃癌（EBVaGC），其余胃癌則為EB病毒陰性胃癌（EBVnGC）。TOKUNAGA等[2]認為，在

早期胃癌中，如果EB病毒陽性，且無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，在治療中可以避免傳統(tǒng)的根治手術(shù)而采用內(nèi)鏡下切除，預(yù)后良好，但對于中晚期胃癌卻無明顯的區(qū)別。因此，早期EBVaGC的鑒別對于治療手段的選擇有非常重要的意義。本研究選擇EBVaGC病人作為研究對象，探討血清EB病毒抗體檢測對早期快速鑒別診斷EBVaGC的臨床價值。

1?對象與方法

1.1&nbsp;研究對象

選取我院胃腸外科2017年10月—2018年12月收治的尚未接受手術(shù)治療的胃癌病人80例，其中男性69例，女性11例;年齡為41～74歲，平均（61.14±8.03）歲。全部病例均經(jīng)病理學(xué)檢查證實，并應(yīng)用原位雜交技術(shù)檢測EB病毒編碼的小RNA EBER1確認EBVaGC病人20例， EBVnGC病人60例。兩組病人在年齡、性別、腫瘤部位、組織學(xué)類型、局部浸潤、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等方面差異均無顯著性（P>0.05）。見表1。

1.2?研究方法

1.2.1?標本采集與處理?于清晨空腹狀態(tài)下采集兩組病人的靜脈血4～5 mL，常規(guī)放置30 min，血液凝固后以3 000 r/min離心10 min，分離提取血清和血細胞，置于低溫冰箱中保存待測。

1.2.2?EB病毒抗體檢測?應(yīng)用深圳新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司生產(chǎn)的Maglumi 2000全自動化學(xué)發(fā)光測定儀及配套化學(xué)發(fā)光試劑盒，嚴格按照儀器標準操作流程和試劑規(guī)定要求上機檢測?？贵w水平大于或等于臨界值時定為陽性，低于臨界值時定為陰性。

1.2.3?統(tǒng)計學(xué)分析?應(yīng)用統(tǒng)計軟件SPSS 13.0進行統(tǒng)計學(xué)分析，計數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2?結(jié)?果

2.1?兩組血清EB病毒相關(guān)抗體陽性率比較

EBVaGC組與EBVnGC組病人血清EBV EA IgG、EBV VCA IgA陽性率比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=23.89、3.88，P<0.05）;兩組血清EBV EA IgA、EBV VCA IgM、EBV VCA IgG、EBV NA IgG陽性率比較差異無顯著意義（χ2=1.89～2.88，P>0.05）。見表2。

2.2?EB病毒相關(guān)抗體診斷EBVaGC的效率

EBV EA IgG、EBV VCA IgA的陽性似然比、陽性預(yù)測值均高于其他4項抗體，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=5.19～20.18，P<0.05）。EBV VCA IgG、EBV NA IgG的靈敏度均明顯高于其他4項抗體，特異度均明顯低于其他4項抗體，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=4.89～25.96，P<0.05）。EBV EA IgA的特異度雖高，但是靈敏度卻偏低。EBV EA IgG和EBV VCA IgA較其他相關(guān)抗體兼具較高的靈敏度和特異度，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=11.65～29.62，P<0.05）。見表3。

2.3?EBVaGC組EB病毒抗體陽性模式

EBVaGC組EB病毒抗體陽性模式多樣化，單一抗體檢測的價值有限，多抗體聯(lián)合檢測較單一抗體檢測更能提高EBVaGC診斷的準確性。見表4。

3?討?論

EB病毒是一種雙鏈DNA病毒，屬人皰疹病毒4型，是人類一種特異性嗜淋巴細胞性皰疹病毒。自1990年BURKE等[3]首先報道EB病毒感染與胃癌相關(guān)以來，國內(nèi)外學(xué)者采用多種檢測技術(shù)相繼在各種胃癌組織中檢測到EB病毒。越來越多的研究結(jié)果表明，EB病毒與胃癌關(guān)系密切[2-5]。EB病毒感染胃上皮細胞后大量克隆性生長繁殖，從而導(dǎo)致EBVaGC，該亞型胃癌有著獨特的組織病理學(xué)、表觀

遺傳特征以及分子異常[4-5]。人體感染EB病毒后，可產(chǎn)生相對應(yīng)的抗原，如EB病毒核抗原、早期抗原、衣殼抗原、膜抗原，并均可以產(chǎn)生相應(yīng)的IgG和IgA、IgM抗體，存在于胃癌病人血清中。

本研究選擇EBVaGC和臨床病理資料與之匹配的EBVnGC病人作為研究對象，采用化學(xué)發(fā)光法檢測病人血清中的EB病毒抗體水平。結(jié)果顯示，EBVaGC組與EBVnGC組病人血清EBV EA IgG、EBV VCA IgA陽性率比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，而EBV EA IgA、EBV VCA IgM、EBV VCA IgG、EBV NA IgG陽性率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。該結(jié)果表明，EBV EA IgG、EBV VCA IgA抗體檢測陽性有助于EBVaGC的鑒別診斷。EBV VCA IgG、EBV NA IgG在病毒感染早期即可出現(xiàn)，并可以持續(xù)終生，此兩種抗體陽性多提示感染在癌變前或癌變早期已經(jīng)存在。

本研究對EB病毒相關(guān)抗體診斷EBVaGC的效率進行評價，結(jié)果顯示，EBV EA IgG、EBV VCA IgA的陽性似然比、陽性預(yù)測值均明顯高于其他4項抗體;EBV VCA IgG、EBV NA IgG靈敏度雖高，但是特異度極低;EBV EA IgA的特異度雖高，但是靈敏度卻偏低。此研究結(jié)果表明，EBV EA IgG和EBV VCA IgA較其他相關(guān)抗體具有較高的靈敏度、特異度，對EBVaGC鑒別具有臨床應(yīng)用價值，特別是EBV VCA IgA的上升可以說是疾病發(fā)生的危險標志，與有關(guān)報道一致[6]。還有研究表明，EBV EA IgG上升是特異性的，可以作為腫瘤標志物應(yīng)用于臨床[6-7]。

人是EB病毒唯一宿主，幾乎所有成年人既往都感染過EB病毒，其感染常常無癥狀或者不發(fā)病。EB病毒感染后長期潛伏，可誘發(fā)鼻咽癌、傳染性單核細胞增多癥和EBVaGC等。有的胃癌病人早在術(shù)前1～3年上述抗體便顯示上升，可見EB病毒感染發(fā)生于癌變之前或癌變初期階段[8]。故對不同EB病毒抗體進行血清學(xué)檢測，有利于EBVaGC的有效篩查。但EBVaGC病人EB病毒抗體陽性模式多樣化，單一抗體檢測的價值有限，多抗體聯(lián)合檢測較單一抗體檢測能提高EBVaGC診斷的準確性。

綜上所述，對EB病毒抗體進行血清學(xué)檢測，有利于EBVaGC的有效篩查，且不同抗體檢測的靈敏度、特異度有一定差異;聯(lián)合檢測可以彌補單項抗體指標無法兼顧靈敏度、特異度的缺點，為EBVaGC的快速鑒別診斷提供可靠依據(jù)，具有較高的臨床應(yīng)用價值。

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