谷華　丁孝良　孫寶軍

摘要?目的：采用高效液相-蒸發(fā)光散射檢測（HPLC-ELSD）玉屏風(fēng)散顆粒中黃芪甲苷和甘露醇的含量，為玉屏風(fēng)散的質(zhì)量控制提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法：采用色譜柱出自Waters公司，型號(hào)為XBridge-Amide，規(guī)格：4.6 mm×150 mm，色譜柱填料顆粒直徑3.5 μm;流動(dòng)相：乙腈（A）-水溶液（B，其中含少量甲醇），流速1 mL/min;梯度洗脫流程見表1;柱溫30 ℃;蒸發(fā)光檢測器：以氮?dú)鉃檩d氣，流速202.7 kPa，漂移管溫度110 ℃，撞擊器為“on”。常規(guī)對(duì)高效液相色譜儀進(jìn)行方法學(xué)的嚴(yán)謹(jǐn)考察，包括專屬性試驗(yàn)、精密度試驗(yàn)、穩(wěn)定性試驗(yàn)、重復(fù)性試驗(yàn)、線性回歸試驗(yàn)和加樣回收試驗(yàn)。在高效液相色譜儀方法學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)那疤嵯?，?duì)玉屏風(fēng)散顆粒進(jìn)行樣品分析研究，并測定其中黃芪甲苷和甘露醇的含量。結(jié)果：1）專屬性試驗(yàn)結(jié)果顯示：陰性對(duì)照品溶液1在與甘露醇對(duì)照品溶液和玉屏分散供試品溶液色譜圖相同時(shí)間處未見相同色譜峰;陰性對(duì)照品2在與黃芪甲苷對(duì)照品溶液和供試品溶液色譜圖相同時(shí)間處未見相同色譜峰。提示甘露醇和黃芪甲苷均具有良好的專屬性。2）線性回歸結(jié)果顯示：黃芪甲苷的線性范圍為1.1～5.1 mg，其回歸方程為：Y=0.732X-4.136（r=0.999 7）;同黃芪甲苷線性回歸方法得，甘露醇在1.967～19.674 μg范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，得到甘露醇回歸方程為Y=1.587X+4.983（r=0.999 6）。3）精密度試驗(yàn)結(jié)果顯示，黃芪甲苷RSD=0.58%，甘露醇RSD=0.36%表明高效液相儀器精密度良好。4）本研究穩(wěn)定性結(jié)果顯示黃芩甲苷峰面積的RSD=0.84%，甘露醇峰面積的RSD=0.70%，符合色譜峰相對(duì)峰面積的RSD<3%則說明穩(wěn)定性良好，提示玉屏風(fēng)散供試品溶液24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。5）本研究結(jié)果顯示色譜峰相對(duì)峰面積RSD平均值1.76%，各色譜峰相對(duì)峰面積的RSD<3%表示重復(fù)性良好，提示玉屏風(fēng)散供試品溶液的重復(fù)性良好。6）結(jié)果顯示黃芪甲苷對(duì)照品溶液、甘露醇對(duì)照品溶液平均回收率分別為100.608%、103.487%，RSD分別為0.93%、0.47%，提示高相液相檢測方法所測加樣回收率結(jié)果可靠。7）3個(gè)不同批次的玉屏風(fēng)散中黃芪甲苷成分和甘露醇成分的含量未見明顯差異，黃芪甲苷和甘露醇含量平均值分別為0.961 mg/g和0.099 mg/g。結(jié)論：高效液相-蒸發(fā)光散射檢測方法操作簡便準(zhǔn)確，重復(fù)性和穩(wěn)定性均良好，可作為測定玉屏風(fēng)散顆粒中黃芪甲苷和甘露醇含量的測定方法。

關(guān)鍵詞?高效液相;蒸發(fā)光散射檢測;玉屏風(fēng)散;黃芪甲苷;甘露醇;含量測定;專屬性;重復(fù)性

Determination of Contents of Astragaloside and Mannitol in Yupingfeng Granules by HPLC

Gu Hua，Ding Xiaoliang，Sun Baojun

（Zhengzhou Central Hospital Affiliated to Zhengzhou University，Zhengzhou 450006，China）

Abstract?Objective：To determine the contents of astragaloside A and mannitol in Yupingfeng powder granules by high performance liquid Chromatography-Evaporative Light Scattering （HPLC-ELSD），and to provide experimental basis for the quality control of Yupingfeng Powder.Methods：The chromatographic column of XBridge-Amide was produced by Waters Company with specifications of 4.6 mm×150 mm and packing particle diameter of 3.5 um.The mobile phase was acetonitrile （A）-aqueous solution （B，containing a small amount of methanol） with flow rate of 1 mL/min.The gradient elution process was shown in Table 1.Column temperature was 30 C.The evaporative light detector was based on nitrogen.The carrier gas flow rate is 202.7 kPa，the drift tube temperature was 110 degrees，and the impactor was “on”.Routine rigorous methodological investigation of high performance liquid chromatography （HPLC） instrument included specificity test，precision test，stability test，repeatability test，linear regression test and sample addition recovery test.On the premise of rigorous methodology of high performance liquid chromatography，Yupingfeng Powder granules were analyzed，and the contents of astragaloside A and mannitol were determined.Results：1） Specific test results showed that the negative reference solution 1 did not have the same chromatographic peak at the same time as mannitol reference solution and Yuping Powder sample solution chromatogram; the negative reference solution 2 did not have the same chromatographic peak at the same time as astragaloside reference solution and sample solution chromatogram.It was suggested that mannitol and astragaloside had good specificity.2） The linear regression results showed that the linear range of astragaloside A was 1.1-5.1 mg，and the regression equation was Y=0.732X-4.136 （r=0.9997）.The linear regression method with astragaloside A showed that mannitol had a good linear relationship in the range of 1.967～19.674 ug，and the regression equation of mannitol was Y=1.587X+4.983 （r=0.999 6）.3） The precision test results showed that astragaloside RSD=0.58%，mannitol RSD=0.36%，indicating that the precision of high performance liquid chromatography instrument was good.4） The results of this study showed that the RSD of baicalin peak area was 0.84%，and that of mannitol peak area was 0.70%.The RSD<3% which accorded with the relative peak area of chromatographic peak indicated that the stability of Yupingfeng Powder solution was good within 24 h.5） The results showed that the average RSD of relative peak area was 1.76%.RSD<3% of relative peak area indicated good repeatability，suggesting that the solution of Yupingfeng Powder had good repeatability.6） The results showed that the average recoveries of astragaloside A reference solution and mannitol reference solution were 100.608% and 103.487% respectively，and RSD were 0.93% and 0.47% respectively，suggesting that the recoveries of samples determined by high-phase liquid chromatography were reliable.7） There was no significant difference in the contents of astragaloside IV and mannitol in 3 batches of Yupingfeng powder.The average contents of astragaloside IV and mannitol were 0.961 mg/g and 0.099 mg/g，respectively.Conclusion：The method is simple，accurate，reproducible and stable.It can be used for the determination of astragaloside A and mannitol in Yupingfeng Powder Granules.

Key Words?High performance liquid chromatography; Evaporative light scattering detection; Yupingfeng powder; Astragaloside IV; Mannitol; Content determination; Specificity; Repeatability

中圖分類號(hào)：R284.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2019.04.010

玉屏風(fēng)散是中醫(yī)學(xué)中的經(jīng)典名方，具有益氣固表的作用，在臨床上常用于表虛自汗者。全方最早見于《世醫(yī)得效方》，又有一說始見于《丹溪心法》全方由黃芪、白術(shù)、防風(fēng)等3味中藥所組成，用藥精簡，療效顯著[1]。歷代醫(yī)家對(duì)其藥物的組成和功效均進(jìn)行了大量的研究，現(xiàn)代藥理學(xué)表明[2-4]，在玉屏風(fēng)散中提取主要具有抗病毒及增強(qiáng)免疫力功效的有效苷類活性成分。同時(shí)在對(duì)玉屏風(fēng)散復(fù)方中單味藥材進(jìn)行HPLC指紋圖譜研究中表明[5-6]，玉屏風(fēng)散復(fù)方中的君藥黃芪的主要活性成分為黃芪甲苷。防風(fēng)則為玉屏風(fēng)散復(fù)方的主要配伍藥物之一，對(duì)全方的藥性有著重大的意義，古語有云：“黃芪得防風(fēng)，則固表不留邪，防風(fēng)得黃芪，則祛邪不傷正”，防風(fēng)中的有效藥物成分包含揮發(fā)油、β-谷甾醇、以及甘露醇等，通常對(duì)黃芪甲苷及甘露醇等成分[7]，通常運(yùn)用HPLC對(duì)復(fù)方中的藥物成分含量測定方法有HPLC-ELSD（高效液相-蒸發(fā)光散射檢測）[8]、比色法[9]、薄層掃描法[10]，紫外可見吸收法（UV）[11]等，本研究選擇采用HPLC-ELSD法對(duì)中的黃芪甲苷及甘露醇含量進(jìn)行測定，以期從多個(gè)成分分析的角度，對(duì)玉屏風(fēng)散復(fù)方的相關(guān)可靠結(jié)果和良好重復(fù)性，有助于玉屏風(fēng)散的質(zhì)量評(píng)價(jià)。

1?儀器與試藥

1.1?儀器?高效液相色譜儀（型號(hào)：Prominence LC-20A，產(chǎn)地：日本島津），系統(tǒng)控制器（型號(hào)：系統(tǒng)控制器Prominence CBM-20Alite，產(chǎn)地：日本島津），梯度系統(tǒng)（型號(hào)：LC-20AT，規(guī)格：高壓GE，產(chǎn)地：日本島津）;型蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD，型號(hào)：SEDEX-55，產(chǎn)地：法國）;購買于北京盛博協(xié)同科技有限責(zé)任公司的電子分析天平（型號(hào)：SB-C1003）;購買于深圳市潔盟清洗設(shè)備有限公司超聲波清洗器（型號(hào)：JP-100plus）;購買于法國MILIPORE公司的超純水系統(tǒng)（型號(hào)：Mili-RO Plus型）。

1.2?試藥?對(duì)照品：黃芪甲苷（純度為99%以上，批號(hào)：110781-200608），甘露醇（純度為99%以上，批號(hào)：100533-201002），購自中國藥品生物制品檢定所。于上海星可生化有限公司購買的色譜純乙腈（批號(hào)：20110012），于美國Fisher公司購買甲醇（批號(hào)：101437）。

1.3?分析樣品?玉屏風(fēng)散（云南白藥集團(tuán)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字Z53021556），批次號(hào)分別為：1080429、1080507、1080613。

2?方法與結(jié)果

2.1?色譜條件?采用色譜柱出自Waters公司，型號(hào)為XBridge-Amide，規(guī)格：4.6 mm×150 mm，色譜柱填料顆粒直徑3.5 μm;流動(dòng)相：乙腈（A）-水溶液（B，其中含少量甲醇），流速1 mL/min;梯度洗脫流程見表1;柱溫30 ℃;蒸發(fā)光檢測器：以氮?dú)鉃檩d氣，流速202.7 kPa，漂移管溫度110 ℃，撞擊器為“on”。

2.2?對(duì)照品溶液配制?精密稱取適量黃芪甲苷對(duì)照品置于10 mL量瓶中，加甲醇溶解并定容，制成1.563 mg/mL的黃芪甲苷對(duì)照品溶液。精密稱取適量甘露醇對(duì)照品，加水制成0.3 mg/mL的溶液，作為甘露醇對(duì)照品溶液。取適量黃芪甲苷對(duì)照品溶液和甘露醇對(duì)照品溶液，充分混合均勻，即得混合對(duì)照品溶液。

2.3?供試品溶液配制?取2.5 g玉屏風(fēng)散樣品粉末精密稱定后，采用3號(hào)篩過篩后，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25 mL，塞上軟木塞密封后，稱定重量，超聲處理30 min，超聲時(shí)設(shè)置參數(shù)為250 W和40 kHz;打開軟木塞放至室溫進(jìn)行充分冷卻后，塞上軟木塞再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，采用3 000 r/min進(jìn)行高速離心3 min，并用0.45 μm的微孔濾膜，即得玉屏風(fēng)散供試品溶液。陰性對(duì)照品溶液1，玉屏風(fēng)散去防風(fēng)后同供試品溶液提取方法即得;陰性對(duì)照品溶液2，玉屏風(fēng)散去黃芪后同供試品溶液提取方法即得。

2.4?專屬性試驗(yàn)?取10 μL甘露醇對(duì)照品溶液、黃芪甲苷對(duì)照品溶液、玉屏風(fēng)散供試品溶液和各自對(duì)應(yīng)的陰性對(duì)照品溶液，根據(jù)2.1的色譜條件進(jìn)行專屬性試驗(yàn)，結(jié)果顯示陰性對(duì)照品溶液1在與甘露醇對(duì)照品溶液和玉屏分散供試品溶液色譜圖相同時(shí)間處未見相同色譜峰;陰性對(duì)照品2在與黃芪甲苷對(duì)照品溶液和供試品溶液色譜圖相同時(shí)間處未見相同色譜峰。提示甘露醇和黃芪甲苷均具有良好的專屬性。見圖1。

2.5?線性關(guān)系考察

精密吸取甘露醇對(duì)照品溶液和黃芪甲苷對(duì)照品溶液，分別精密吸取上述對(duì)照品溶液5.0，10.0，15.0，20.0，25.0 μL，注入液相色譜儀中，按上述色譜條件測定峰面積，以峰面積的自然對(duì)數(shù)（l g Y）為縱坐標(biāo)，以濃度的自然對(duì)數(shù)（l g X）為橫坐標(biāo)，線性回歸，結(jié)果顯示：黃芪甲苷的線性范圍為1.1～5.1 mg，其回歸方程為：Y=0.732X-4.136（r=0.999 7）;同黃芪甲苷線性回歸方法得，甘露醇在1.967～19.674 μg范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，得到甘露醇回歸方程為Y=1.587X+4.983（r=0.999 6）。

2.6?精密度試驗(yàn)?精密吸取同一對(duì)照品溶液，在一組相同的測量程序、相同測試地點(diǎn)和相同的色譜條件等情況下，單次進(jìn)樣量為10 μL，連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算黃芪甲苷和甘露醇的峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（Relative Standard Deviation，RSD）值，并取6次RSD的平均值記為結(jié)果。結(jié)果顯示，黃芪甲苷RSD=0.58%，甘露醇RSD=0.36%表明高效液相儀器精密度良好。

2.7?穩(wěn)定性試驗(yàn)?由于固定相的有限穩(wěn)定性，為確保每一次研究之間的結(jié)果誤差最小，取同一批號(hào)（1080429）玉屏風(fēng)散供試品溶液進(jìn)行穩(wěn)定性試驗(yàn)，分別將同一批號(hào)的玉屏風(fēng)散供試品溶液室溫放置0、4、8、12、24 h后進(jìn)行HPLC檢測，本研究穩(wěn)定性結(jié)果顯示黃芩甲苷峰面積的RSD=0.84%，甘露醇峰面積的RSD=0.70%，符合色譜峰相對(duì)峰面積的RSD<3%則說明穩(wěn)定性良好，提示玉屏風(fēng)散供試品溶液24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。見表2、表3。

2.8?重復(fù)性試驗(yàn)?為確保研究的客觀性，需要進(jìn)行短時(shí)間內(nèi)的HPLC連續(xù)重復(fù)性測試，精密量取同一批號(hào)（1080429）玉屏風(fēng)散供試品溶液，進(jìn)樣量10 μL，連續(xù)進(jìn)樣，本研究結(jié)果顯示色譜峰相對(duì)峰面積RSD平均值1.76%，各色譜峰相對(duì)峰面積的RSD<3%表示重復(fù)性良好，提示玉屏風(fēng)散供試品溶液的重復(fù)性良好。具體詳見表4。

2.9?回收率試驗(yàn)?精密吸取已知含量的玉屏風(fēng)散供試品溶液6份，每份均為1 mL，分別置于10 mL容量瓶中，每一份均精密加入等量已知濃度的0.405 3 mg/mL黃芪甲苷對(duì)照品溶液、0.217 3 mg/mL甘露醇對(duì)照品溶液，加入超純水稀釋至刻度定容混合均勻后，進(jìn)行加樣回收試驗(yàn)的檢測，根據(jù)2.1的色譜條件進(jìn)行檢測并計(jì)算加樣回收率。

結(jié)果顯示黃芪甲苷對(duì)照品溶液、甘露醇對(duì)照品溶液平均回收率分別為100.608%、103.487%，RSD分別為0.93%、0.47%，提示高相液相檢測方法所測加樣回收率結(jié)果可靠。見表5。

2.10?樣品檢測結(jié)果?取1080429、1080507、1080613等3個(gè)不同批次號(hào)的玉屏風(fēng)散，根據(jù)2.2供試品溶液配制，每批樣品都根據(jù)2.1的色譜條件進(jìn)行重復(fù)測試3次，玉屏風(fēng)散中成分的含量取3次測定的平均值，結(jié)果顯示如表5所示，3個(gè)不同批次的玉屏風(fēng)散中黃芪甲苷成分和甘露醇成分的含量未見明顯差異，黃芪甲苷和甘露醇含量平均值分別為0.961 mg/g和0.099 mg/g。見表6。

3?討論

本研究中檢測玉屏風(fēng)散中黃芪甲苷和甘露醇的成分含量，而高效液相（HPLC）常規(guī)的檢測器多有紫外可見吸收檢測器（Ultraviolet-visibledetector，UVD）、光電二極管陣列檢測器（Photo-diode Array Detector，PDAD）、熒光檢測器（Fluorescence Detector，F(xiàn)D）、電化學(xué)檢測器（Electrochemical Detect，ED）、化學(xué)發(fā)光檢測器（Chemiluminescence Detector，CD）和蒸發(fā)光散射檢測器（Evaportive Light Scattering，ELSD），其中紫外可見吸收檢測器是最常用的一種[12-13]。而由于玉屏風(fēng)散中的甘露醇成分本身無紫外吸收，本文采用蒸發(fā)光檢測器測定了甘露醇的含量，HPLC-ELSD蒸發(fā)光散射檢測器（Evaportive light Scattering，ELSD）自從上個(gè)世紀(jì)八十年代問世以來，已經(jīng)廣泛的應(yīng)用在各種實(shí)驗(yàn)室檢測中，如超臨界色譜、逆流色譜以及高效液相色譜。ELSD較之其他方法最為優(yōu)越的性能在于可以在沒有標(biāo)準(zhǔn)品和未知參數(shù)的情況下對(duì)未知的、不含發(fā)色團(tuán)的化合物進(jìn)行檢測，且檢測的化合物種類較多，如碳水化合物、聚合物、脂類、脂肪酸、氨基酸、藥物等[14-15]。故而ELSD較之傳統(tǒng)的HPLC檢測法可不對(duì)樣品的光學(xué)特性進(jìn)行依賴，同時(shí)對(duì)于低于流動(dòng)相的任意揮發(fā)性樣品均可被檢測到，且檢測方法獨(dú)特，僅需1）惰性氣體對(duì)脫洗液霧化[16];2）在加熱管中對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行蒸發(fā)[17];3）對(duì)樣品顆粒進(jìn)行散射光后即可得到檢測結(jié)果。

在本研究中采用的HPLC-ELSD研究玉屏風(fēng)散中黃芪甲苷和甘露醇成分含量的過程中，在柱溫的選擇方面：嚴(yán)格按照供試品溶液的制備方法，在精密稱取樣品的玉屏分散粉末制備成的玉屏風(fēng)散供試品溶液，按選定的色譜條件，分別在漂移管溫度為30 ℃、40 ℃、50 ℃、60 ℃、65 ℃及70 ℃時(shí)加樣檢測，結(jié)果顯示在溫度分別為30 ℃時(shí)，峰面積出現(xiàn)最明顯且最清晰，而在40 ℃、50 ℃、60 ℃、65 ℃、70 ℃時(shí)等柱溫的變化對(duì)檢測的結(jié)果不存在顯著的影響。在色譜柱的選擇方面，嚴(yán)格按照玉屏風(fēng)散供試品溶液的制備方法，在精密稱取樣品的粉末后將其制備成的玉屏風(fēng)散供試品溶液，按選定的色譜條件，分別使用2種不同品牌的色譜柱進(jìn)行加樣測定，結(jié)果表明，Waters公司和Agilent公司在分別使用了2種色譜柱進(jìn)行檢測的樣品，分離均十分良好，所檢測出黃芪甲苷及甘露醇的含量均無明顯的差異，而考慮到課題經(jīng)費(fèi)的因素，選擇Waters公司的。在ELSD檢測器的條件設(shè)置方面，試驗(yàn)通過對(duì)影響信號(hào)響應(yīng)的載氣流速和漂移管溫度進(jìn)行了優(yōu)選，結(jié)果表明漂移管溫度90 ℃氣體流速1.0 L/min為最佳條件。試驗(yàn)過程中對(duì)玉屏風(fēng)散供試品溶液的處理方法進(jìn)行了考察：通過對(duì)不同溶劑，不同提取方法和提取時(shí)間進(jìn)行比較試驗(yàn)最終確定，在玉屏風(fēng)散供試品溶液的制備提取中，用加甲醇超聲提取為最佳方法，可以獲得含量和峰面積較好的黃芪甲苷和甘露醇，且黃芪甲苷和甘露醇的分離度都很好，沒有雜質(zhì)。

參考文獻(xiàn)

[1]鄭康.玉屏風(fēng)散提取物抗炎作用研究[D].成都：西南交通大學(xué)，2015.

[2]許璇璇，李玲孺，武彥伶，等.從表虛伏邪探討玉屏風(fēng)散雙向免疫調(diào)節(jié)機(jī)制[J].安徽中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，34（2）：1-3.

[3]賈琳，王亞利，楊倩，等.玉屏風(fēng)散對(duì)衛(wèi)氣虛證模型大鼠胸腺代謝組學(xué)特征標(biāo)志物的影響[J].中醫(yī)雜志，2016，57（24）：2134-2138.

[4]李紅念，梅全喜，戴衛(wèi)波，等.玉屏風(fēng)散的臨床應(yīng)用與藥理作用研究進(jìn)展[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2016，9（2）：284-287.

[5]周勁松，張洪坤，黃玉瑤，等.多波長HPLC法測定玉屏風(fēng)散中10種化學(xué)成分的含量[J].藥物分析雜志，2016，34（6）：1072-1081.

[6]孟霜，馮振宇，趙建平，等.玉屏風(fēng)散配方顆粒與傳統(tǒng)湯劑中黃芪甲苷含量的比較[J].光明中醫(yī)，2015，30（3）：491-492.

[7]林玉萍，楊艷，虎春艷，等.云防風(fēng)的化學(xué)成分研究[J].云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2014，37（3）：22-24.

[8]韓曉萍，王慧春，海平，等.高效液相多通道同時(shí)測定藏藥珍珠丸系列品種中名貴藥味所含的6種組分[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2016，36（13）：1066-1070.

[9]吳敬梅，李燕平，瞿亮，等.冬蟲夏草甘露醇含量的高效液相色譜法測定[J].食藥用菌，2016，11（6）：388-392.

[10]王叢叢.高效液相色譜與薄層掃描法測定大山楂丸中熊果酸含量比較[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘（連續(xù)型電子期刊），2015，15（18）：35-36.

[11]張純淳，李思維，李鐘瑜，等.快速溶劑提取-高效液相色譜-二極管紫外陣列/熒光串聯(lián)法同時(shí)測定土壤中18種多環(huán)芳烴[J].環(huán)境化學(xué)，2015，19（6）：1231-1233.

[12]廖林淇.高效液相色譜儀檢測器在藥物分析中的應(yīng)用[J].科技創(chuàng)新導(dǎo)報(bào)，2015，31（6）：236.

[13]徐臨鳳.藥物分析和藥物質(zhì)量控制中高效液相色譜儀的運(yùn)用[J].生物化工，2017，3（4）：107-108.

[14]秦小東，羅先欽，李卿，等.高效液相色譜-蒸發(fā)光散射法測定不同產(chǎn)地雪膽中齊墩果酸的含量[J].中國臨床藥理學(xué)雜志，2017，33（16）：1582-1584.

[15]李芳，胡容峰，黃麗丹，等.高效液相色譜-蒸發(fā)光散射法測定黃芪中單糖和雙糖的含量[J].安徽中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，34（2）：82-84.

[16]紀(jì)祥娟，王軍，楊新光，等.蒸發(fā)光散射檢測器的應(yīng)用概況及檢定方法研究進(jìn)展[J].計(jì)量與測試技術(shù)，2014，41（5）：50-51，53.

[17]王婷，夏春，李麗，等.高效液相色譜儀蒸發(fā)光散射檢測器校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的選擇[J].化學(xué)分析計(jì)量，2014，15（1）：1-3.