劉鑒達，周 燕

(重慶市急救醫(yī)療中心檢驗科，重慶 400014)

干燥綜合征(SS)是臨床常見的自身免疫性疾病，可為原發(fā)病灶也可繼發(fā)于其他自身免疫性疾病，其主要特征為單核細胞浸潤淚腺、涎腺等外分泌腺體及全身其他器官，產(chǎn)生相應自身抗體，導致患者出現(xiàn)口咽干燥等癥狀和體征。病理檢查結(jié)果顯示SS患者腺體間質(zhì)常存在大量淋巴細胞浸潤并形成浸潤灶或異位生發(fā)中心[1-2]。SS通常起病隱匿，臨床表現(xiàn)復雜，導致早期診斷較為困難，治療易被延誤，患者的康復受到影響。出現(xiàn)自身抗體是自身免疫性疾病的典型標志，對臨床診斷、病情評估、療效觀察和預后判斷均有重要價值，在患者出現(xiàn)明顯癥狀之前即可被檢測到，為早期診斷和治療創(chuàng)造了條件[3]。目前臨床可檢測的自身抗體種類已達百余種，其中自身抗核抗體譜(ANAs)檢測應用較為廣泛，對系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SE)、多發(fā)性肌炎(PM)等多種自身免疫性疾病的診斷都具有良好的診斷價值[4]。本課題組主要研究了ANAs與SS的相關(guān)性，旨在為臨床治療提供信息和參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 將2016年8月至2018年5月本院SS患者共117例納入本研究(SS組)。其中男31例、女86例，年齡21～76歲，平均(43.72±13.64)歲。根據(jù)中華醫(yī)學會風濕病學分會《干燥綜合征診治指南(草案)》[5]將上述患者分為原發(fā)性干燥綜合征(PSS)和繼發(fā)性干燥綜合征(SSS)兩類，其中PSS患者71例，SSS患者46例。納入標準：(1)符合SS診斷標準和分型標準；(2)臨床資料完整；(3)年齡18～80歲；(4)患者及家屬知情同意。排除標準：(1)長期應用免疫調(diào)節(jié)藥物者；(2)伴嚴重系統(tǒng)性疾病者。另外，選取本院同期健康體檢者120例作為對照組，其中男37例、女83例，年齡18～79歲，平均(45.03±13.27)歲。SS組和對照組性別及年齡構(gòu)成情況比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

1.2試劑與儀器 抗核抗體檢測試劑盒(德國歐蒙醫(yī)學實驗診斷股份公司生產(chǎn)，規(guī)格：1590-1601-3G)，靶抗原包括抗核糖核蛋白抗體(nRNP/Sm)、抗Sm抗體(Sm)、抗干燥綜合征A抗體(SSA)、抗Ro-52抗體(Ro-52)、抗干燥綜合征B抗體(SSB)、抗拓撲異構(gòu)酶Ⅰ抗體(Scl-70)、抗PM-Scl抗體(PM-Scl)、抗細胞質(zhì)組酰-tRNA合成酶抗體(Jo-1)、抗著絲點抗體B(CENPB)、抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)、抗雙鏈DNA抗體(ds-DNA)、核小體、組蛋白、核糖體P蛋白和抗線粒體M2抗體(AMA-M2)。主要檢測儀器為EuRoBlotOne全自動免疫印跡儀。

1.3方法 采集上述納入研究者空腹靜脈血3 mL，室溫保存30 min，3 000 r/min離心10 min后取上清加入緩沖液，1∶101稀釋備用，采用歐盟公司EuRoBlotOne型全自動免疫印跡儀進行檢測。

1.4統(tǒng)計學處理 數(shù)據(jù)分析采用SPSS19.0軟件，計數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗或Fisher精確檢驗，檢驗效能采用logistics回歸分析，若P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1兩組ANAs檢測陽性率分析 除Sm、PCNA、AMA-M2、PM-Scl及Jo-1外，SS組其余10項結(jié)果陽性率均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 ANAs檢測陽性率分析[n(%)]

注：-表示該項使用Fisher精確檢驗無χ2值

2.2不同類型SS患者ANAs檢測陽性率分析 117例SS患者中PSS占60.68%(71/117)，SSS占39.32%(46/117)。ANAs檢測結(jié)果顯示，PSS患者的nRNP/Sm、Sm、AMA-M2、PM-Scl、ds-DNA、核小體、組蛋白及核糖體P蛋白陽性率均低于SSS患者，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；兩組陽性率排前三位的檢測項目均依次為SSA、Ro-52和SSB，兩組間三項目檢測的陽性率比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表2。

表2 不同類型SS患者ANAs檢測陽性率分析[n(%)]

續(xù)表2 不同類型SS患者ANAs檢測陽性率分析[n(%)]

注：-表示該項使用Fisher精確檢驗無χ2值

2.3ANAs各項與SS相關(guān)性的logistic回歸分析 nRNP/Sm、SSA、SSB、Ro-52、核小體、組蛋白及核糖體P蛋白均為SS的獨立危險因素(P<0.05)，其中SSA、SSB及Ro-52的相關(guān)性極高(P<0.001)，見表3。

表3 ANAs各項與SS相關(guān)性的logistics回歸分析

2.4ANAs各項與SS分型的logistics回歸分析 nRNP/Sm、Sm、PM-Scl、ds-DNA、核小體、組蛋白及核糖體P蛋白與SS的類型有關(guān)(P<0.05)，見表4。

表4 ANAs各項與SS分型的logistics回歸分析

3 討 論

SS患者中女性占90%，發(fā)病高峰年齡為30～40歲，也可見于中老年人群。國外的研究顯示，普通人群中SSB抗體陽性率約為1/1 000，因而認為SS是發(fā)病率僅次于類風濕關(guān)節(jié)炎的自身免疫性疾病，而我國流行病學統(tǒng)計結(jié)果發(fā)現(xiàn)SS患病率為0.33%～0.77%，稍高于類風濕關(guān)節(jié)炎的0.3%～0.4%[6-7]。SS的病因與其他自身免疫性疾病大致相同，也是受遺傳和環(huán)境因素共同誘導的復雜疾病。近年來，隨著環(huán)境污染加重和生活節(jié)奏改變，SS的發(fā)病率呈逐年上升趨勢。SS發(fā)病后，活動期和緩解期交替出現(xiàn)，因缺少特效治療方法，病情遷延難愈，可導致腎功能受損等嚴重并發(fā)癥，造成患者殘疾甚至死亡。SS患者臨床表現(xiàn)復雜多變，缺少特異性，早期診斷較為困難，治療容易被延誤，因此積極探尋更加合理、有效的檢測方法用于SS的早期診斷對治療效果和改善預后均具有重要意義[8-9]。

ANA指以機體細胞核相關(guān)成分為靶抗原的自身抗體，其常見作用位點包括核酸、組蛋白、磷脂以及各種蛋白酶等物質(zhì)，以及細胞質(zhì)或細胞器中的部分成分。因SS發(fā)病主要是由各種因素導致的自身免疫功能紊亂和自身抗體反應，ANAs檢測作為臨床常用靶抗原確認實驗，對SS等自身免疫性疾病的診斷和鑒別具有重要作用[10-11]。本研究顯示，117例SS患者nRNP/Sm、SSA、SSB、CENPB、Ro-52、Scl-70、Jo-1、ds-DNA、核小體、組蛋白及核糖體P蛋白等10項ANAs檢測項目陽性率均顯著高于對照組。進一步分析不同類型SS患者ANAs檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PSS患者nRNP/Sm、Sm、AMA-M2、PM-Scl、ds-DNA、核小體、組蛋白及核糖體P蛋白陽性率均顯著低于SSS患者，其原因可能是因為上述指標在SSS患者原發(fā)疾病中可出現(xiàn)陽性表達，可在特定情況下用于PSS和SSS的鑒別診斷。而SSA、SSB及Ro-52在117例SS患者中的陽性率分別為60.68%、30.77%、56.41%，與對照組比較陽性率差異有統(tǒng)計學意義，不同類型的SS患者陽性率差異無統(tǒng)計學意義，提示此3項指標對SS診斷具有高度特異性，與陸歡平等[12]的研究結(jié)果具有一致性。

logistics回歸是醫(yī)學研究中常用數(shù)學模型[13]。本研究采用logistics回歸分析了ANAs各項檢測與SS和SS分型的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)nRNP/Sm、SSA、SSB、Ro-52、核小體、組蛋白及核糖體P蛋白與SS均具有良好的相關(guān)性，而且以SSA、SSB、Ro-52相關(guān)性最為突出，其OR值分別為4.166、4.600和5.150。SSA、Ro-52是由小分子RAN及相應蛋白組成的核糖核蛋白顆粒，SSB為小分子核糖核蛋白顆粒，其中SSA和Ro-52可在多種自身免疫性疾病發(fā)現(xiàn)，其用于SS診斷的靈敏度較高，但特異性稍低于SSB[3]，本研究中SS患者SSB檢測的陽性率僅為30.77%，也證實了其靈敏度較低而特異性較高的特點。進一步采用logistics回歸分析研究各項ANAs檢測指標與不同類型SS的相關(guān)性，結(jié)果顯示nRNP/Sm、Sm、PM-Scl、ds-DNA、核小體、組蛋白及核糖體P蛋白等指標與SS的分類相關(guān)，分析原因可能是這些指標在其他免疫性疾病中呈陽性表達，而在PSS和SSS患者中的表達水平呈現(xiàn)明顯差異，從而可有效鑒別PSS和SSS。

4 結(jié) 論

綜上所述，ANAs檢測15項指標中SSA、SSB及Ro-52與SS的相關(guān)性極高，nRNP/Sm、Sm、PM-Scl、ds-DNA、核小體、組蛋白及核糖體P蛋白診斷SS時特異性較差，但在特定情況下與SS的類型相關(guān)，可為疾病的篩查、分類等方面提供依據(jù)。