胡 凱，陳 康，周小秋*

（1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所，成都 611130；2.成都農(nóng)業(yè)科技職業(yè)學(xué)院畜牧獸醫(yī)分院，成都 611130）

飼料中添加微量元素是防止養(yǎng)殖動(dòng)物微量元素缺乏的主要途徑。長(zhǎng)期以來，主要以無機(jī)微量元素的形式添加。然而，無機(jī)微量元素由于生物學(xué)有效性低，致使在動(dòng)物生產(chǎn)中超量添加，給動(dòng)物帶來應(yīng)激、健康問題及環(huán)境污染[1-2]。因此，提高動(dòng)物對(duì)微量元素利用率是目前礦物元素營(yíng)養(yǎng)的研究熱點(diǎn)之一。包被復(fù)合微量元素通過物理隔離，減少了微量元素間及飼料中維生素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的氧化作用，同時(shí)降低了無機(jī)金屬離子對(duì)動(dòng)物消化道黏膜的刺激損傷，提高了其利用率。零星研究表明，飼料中添加包被復(fù)合微量元素提高了育肥豬平均日采食量[3]，黃羽肉雞、育肥豬平均日增重[3-4]，顯著降低黃羽肉雞和育肥豬料重比[3，5]。然而，關(guān)于飼料中添加包被復(fù)合微量元素對(duì)魚類生產(chǎn)性能、消化吸收能力和腸道生長(zhǎng)發(fā)育的影響及其與常規(guī)微量元素作用效果的系統(tǒng)比較研究未見報(bào)道。因此，本試驗(yàn)通過比較研究包被復(fù)合微量元素與常規(guī)微量元素對(duì)生長(zhǎng)中期草魚生產(chǎn)性能、消化吸收能力、腸道生長(zhǎng)發(fā)育和腸道微的影響，探討包被復(fù)合微量元素在淡水魚飼料中的添加效應(yīng)及應(yīng)用，為包被復(fù)合微量元素在淡水魚養(yǎng)殖上的應(yīng)用提供部分參考。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)飼料

試驗(yàn)所用包被復(fù)合微量元素由福建深納生物工程有限公司提供，其微量元素種類及含量見表1。以魚粉、豆粕、棉籽粕和菜粕為主要蛋白源配置基礎(chǔ)飼料，組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表2。試驗(yàn)設(shè)計(jì)參考宋瓊莉等[6]方法進(jìn)行，即試驗(yàn)Ⅰ～Ⅴ組為包被符合微量元素添加組，分別向基礎(chǔ)飼料中添加0、150、300、400和450 mg/kg 包被復(fù)合微量元素；Ⅵ組為常規(guī)微量元素組[對(duì)照組，NRC（2011）]，向基礎(chǔ)飼料中添加常規(guī)微量元素預(yù)混料。各處理組中微量元素添加水平見表3；其他營(yíng)養(yǎng)水平各處理組保持一致。

表1 包被復(fù)合微量元素中微量元素組成及含量Table 1 Trace element composition of coated slow-release multi-trace elements g·kg-1

表2 基礎(chǔ)日糧配方及主要營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)Table 2 Composition and nutrients content of the basal diets %

表3 各處理組試驗(yàn)飼料中微量元素添加水平Table 3 The levels of trace elements in treatment feed mg·kg-1

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所水生動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究基地進(jìn)行。草魚購(gòu)回經(jīng)4 周馴養(yǎng)后，選擇初始體重為（266.0±60.60）g 的健康中期草魚540尾，隨機(jī)分到 18 個(gè)網(wǎng)箱（1.4 m×1.4 m×1.4 m），每個(gè)網(wǎng)箱30 尾（隨機(jī)分為6 組，每組3 個(gè)重復(fù)）。分別飼喂對(duì)照和試驗(yàn)飼料，試驗(yàn)期8 周。飼養(yǎng)管理參照本實(shí)驗(yàn)室前期研究建立的管理模式進(jìn)行[8]，即每天定點(diǎn)投喂4 次，每次投喂30 min 后收集殘餌并烘干后稱重；試驗(yàn)期間，水溫和pH 分別維持在（28±2）℃和 7.2±0.2，養(yǎng)殖水體中溶氧＞6 mg/L。

1.3 樣品采集與指標(biāo)測(cè)定

生長(zhǎng)試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)分別以網(wǎng)箱為單位稱量試驗(yàn)魚體重，用以計(jì)算體增重（weight gain，WG）和特定生長(zhǎng)率（specific growth rate，SGR）。每日記錄投餌量，收集殘餌并稱重用于采食量（feed intake，F(xiàn)I）和餌料系數(shù)（feed coefficient，F(xiàn)C）的計(jì)算。正式試驗(yàn)期間記錄各組試驗(yàn)魚死亡數(shù)用于成活率（survival rate，SR）計(jì)算。飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，參照本實(shí)驗(yàn)室前期建立的樣品采集方法進(jìn)行樣品采集[9]。每組隨機(jī)選擇12 尾生長(zhǎng)中期草魚，進(jìn)行稱重、體長(zhǎng)測(cè)量、采血，隨后迅速分離腸道并稱重，測(cè)量腸長(zhǎng)，分離前、中、后腸，再用液氮迅速冷凍后置于超低溫冰箱（-80 ℃）中保存待測(cè)。此外，每組隨機(jī)另選5 尾試驗(yàn)魚，參照Lin Y.等[10]描述的方法測(cè)量腸道皺襞高度。全腸蛋白含量，全腸胰蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活力，前腸膽囊收縮素（cholecystokinin，CCK）含量，前、中、后腸堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP）、肌酸激酶（creatine kinase，CK）、Na+，K+-ATP 酶（Na+，K+-ATPase）、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（γglutamyl transpeptidase，γ-GT）活力的測(cè)定均參照Z(yǔ)eng Y.Y.等[9]描述的方法進(jìn)行。腸道微生物測(cè)定參照Feng L.等[11]描述的方法進(jìn)行。

1.4 計(jì)算公式

SR、WG、FI、FC、SGR、腸體指數(shù)（intestosomatic index，ISI）和腸長(zhǎng)指數(shù)（relative gut length，RGL）的計(jì)算。

SR（%）= [初始魚總數(shù)（尾）-死亡魚數(shù)（尾）]/初始魚總數(shù)（尾）×100

WG（g/尾）=試驗(yàn)魚末重（g/尾）-試驗(yàn)魚初始重（g/尾）

FI（g/尾）=總投餌量（g/尾）-總殘餌量（g/尾）

FC=采食量（g/尾）/增重（g/尾）

SGR={[ln 終末體重（g）-ln 初始體重（g）]/試驗(yàn)天數(shù)（d）}×100

ISI=腸重（g/尾）/體重（g/尾）×100

RGL=腸長(zhǎng)（cm）/體長(zhǎng)（cm）×100

1.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SPSS18.0 對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。對(duì)不同添加水平的包被復(fù)合微量元素組試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，并結(jié)合Duncan 氏法進(jìn)行多重比較，以P＜0.05 作為差異顯著水平。對(duì)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著的包被復(fù)合微量元素組試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析。將包被復(fù)合物微量元素組（生產(chǎn)性能最佳）與常規(guī)微量元素組 [對(duì)照組，NRC（2011）]試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行 t 檢驗(yàn)，以檢驗(yàn)不同處理之間的差異顯著性，顯著水平為P＜0.05。

2 結(jié)果

2.1 包被復(fù)合微量元素和常規(guī)微量元素對(duì)生長(zhǎng)中期草魚生產(chǎn)性能的影響

所有處理組生長(zhǎng)中期草魚SR 均為100%。包被復(fù)合微量元素對(duì)生長(zhǎng)中期草魚生產(chǎn)性能有顯著影響（表4，P＜0.05）。生長(zhǎng)中期草魚終末體重（Final boday weight，F(xiàn)BW）、WG、FI、SGR 先隨飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平的增加而顯著提高（P＜0.05），當(dāng)飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平為300 mg/kg 時(shí)均達(dá)到最大值，而后均隨著飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平的進(jìn)一步添加而顯著降低（P＜0.05）。包被復(fù)合微量元素對(duì)生長(zhǎng)中期草魚FC 的影響與FI的趨勢(shì)相反，當(dāng)其添加水平為300 mg/kg 時(shí)達(dá)到最小值?；貧w分析表明：飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平（x）分別與生長(zhǎng)中期草魚的 WG（yWG）、SGR（ySGR）、FI（yFI）和FC（yFC）呈極顯著二次曲線關(guān)系，回歸方程分別為 yWG=-2.717E-3x2+1.298x+286.296（R2=0.924，P＜0.01）、ySGR=-7.712E-6x2+0.004x+1.309（R2=0.934，P＜0.01）、yFI=-3.058E-3x2+1.475x+583.621（R2=0.960，P＜0.01）、yFC=5.488-6x2-0.003x+2.026（R2=0.823，P＜0.01）。與常規(guī)微量元素組（對(duì)照組）相比，包被復(fù)合微量元素組（生產(chǎn)性能最佳，300 mg/kg）生長(zhǎng)中期草魚的FBW、WG、FI 和SGR 顯著高于常規(guī)微量元素組（P＜0.05），而 FC 顯著降低（P＜0.05）。分別以 SGR和FI 為標(biāo)識(shí)，通過二次曲線分析確定生長(zhǎng)中期草魚（266～716 g）飼料中包被復(fù)合微量元素最適添加水平分別為239.32 和241.20 mg/kg。

表4 添加包被復(fù)合微量元素對(duì)生長(zhǎng)中期草魚生產(chǎn)性能的影響Table 4 Effects of the coated slow-release multi-trace elements on the growth performance in young grass carp （Ctenopharyngodon idella）

2.2 包被復(fù)合微量元素和常規(guī)微量元素對(duì)生長(zhǎng)中期草魚消化酶活力和CCK 的影響

由表5 可知，生長(zhǎng)中期草魚全腸胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活力，前腸CCK 含量先隨飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平的增加而顯著升高（P＜0.05），當(dāng)飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平均為300 mg/kg時(shí)達(dá)到最大值，而后隨著飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平的進(jìn)一步增加而顯著降低（P＜0.05）。生長(zhǎng)中期草魚全腸糜蛋白酶活力隨飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平的增加而顯著提高（P＜0.05）?；貧w分析表明：飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平（x）與生長(zhǎng)中期草魚前場(chǎng) CCK 含量（YCCK，PI）呈極顯著二次曲線關(guān)系，回歸方程為yCCK，PI=-6.778E-4x2+0.275x+161.113（R2=0.659，P＜0.01）。與常規(guī)微量元素組相比，包被復(fù)合微量元素組（生產(chǎn)性能最佳，300 mg/kg）生長(zhǎng)中期草魚全腸胰蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活力顯著高于常規(guī)微量元素組（P＜0.05），而前腸CCK 含量與常規(guī)微量元素組差異不顯著（P＞0.05）。

2.3 包被復(fù)合微量元素和常規(guī)微量元素對(duì)生長(zhǎng)中期草魚腸道刷狀緣酶活力的影響

由表 6 可知，生長(zhǎng)中期草魚前腸AKP 和γ-GT活力先隨飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平的增加而顯著提高（P＜0.05），當(dāng)飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平分別為300 和150 mg/kg 時(shí)，前腸AKP和γ-GT 活力達(dá)到最大值，而后隨著飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平的進(jìn)一步增加，前腸AKP 和hγ-GT 活力均顯著降低（P＜0.05）。飼料中添加不同水平包被復(fù)合微量元素對(duì)生長(zhǎng)中期草魚中、后腸AKP 活力，前、中、后腸 CK、Na+，K+-ATP 酶和后腸 γ-GT 活力影響的變化趨勢(shì)與前腸AKP 相似，而中腸γ-GT活力與前腸γ-GT 活力的變化趨勢(shì)一致。回歸分析表明：飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平（x）分別與生長(zhǎng)中期草魚的中腸 AKP 酶活力（yAKP，MI）、前、中、后腸 CK（yCK，PI，MI，DI）和 γ-GT（yγ-GT，PI，MI，DI）活力呈極顯著二次曲線關(guān)系，回歸方程分別為yAKP，MI=-6.059E-4x2+0.280x+50.617（R2=0.768，P＜0.01）、yCK，PI=-1.079E-3x2+0.512x+116.792（R2=0.822，P＜0.01）、yCK，MI=-3.957E-4x2+0.185x+87.962（R2=0.708，P＜0.01），yCK，DI=-5.800E-3x2+0.278x+58.838（R2=0.783，P＜0.01）、yγ-GT，PI=-9.087E-34x2+0.401x+128.101（R2=0.757，P＜0.01）、yγ-GT，MI=-1.299E-3x2+0.583x+99.488（R2=0.798，P＜0.01）、yγ-GT，DI=-8.675E-4x2+0.431x+62.132（R2=0.750，P＜0.01）。與常規(guī)微量元素組相比，包被復(fù)合微量元素組（生產(chǎn)性能最佳，300 mg/kg）生長(zhǎng)中期草魚前、中、后腸AKP、CK 以及前、后腸Na+，K+-ATP 酶和γ-GT 活力顯著高于常規(guī)微量元素組（P＜0.05），而中腸 Na+，K+-ATP 酶和 γ-GT 活力與常規(guī)微量元素組差異不顯著（P＞0.05）。

表5 添加包被復(fù)合微量元素對(duì)生長(zhǎng)中期草魚全腸消化酶活力和前腸膽囊收縮素含量的影響Table 5 Effects of coated slow-release multi-trace elements on the digestive enzyme activities （U/g tissue）in the whole intestine and cholecystokinin （CCK） content （ng/g protein） in the proximal intestine of young grass carp （Ctenopharyngodon idella）

表6 添加包被復(fù)合微量元素對(duì)生長(zhǎng)中期草魚腸道刷狀緣酶活力的影響Table 6 Effects of coated slow-release multi-trace elements on the brush-border enzyme activities in the intestine of young grass carp （Ctenopharyngodon idella） U·g-1

2.4 包被復(fù)合微量元素和常規(guī)微量元素對(duì)生長(zhǎng)中期草魚腸道生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo)的影響

由表7 可知，生長(zhǎng)中期草魚腸重、腸長(zhǎng)、腸蛋白含量以及前、中、后腸皺襞高度先隨飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平的增加而顯著提高（P＜0.05），當(dāng)飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平達(dá)到300 mg/kg時(shí)，生長(zhǎng)中期草魚腸重、腸長(zhǎng)、腸蛋白含量以及前、中、后腸皺襞高度達(dá)到最大值，而后隨著飼料中包被復(fù)合微量元素的進(jìn)一步增加顯著降低（P＜0.05）。飼料中添加包被復(fù)合微量元素對(duì)生長(zhǎng)中期草魚ISI和RGL 沒有影響（P＞0.05）?；貧w分析表明：飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平（x）分別與生長(zhǎng)中期草魚前、中、后腸皺襞高度（yFoldheight，PI，MI，DI）呈極顯著二次曲線關(guān)系，回歸方程分別為yFoldheight，PI=-8.714E-3x2+4.413x+1181.773（R2=0.801，P＜0.01）、yFoldheight，MI=-7.506E-3x2+3.554x+1047.894（R2=0.859，P＜0.01）、yFoldheight，DI=-5.308E-3x2+2.471x+887.550（R2=0.801，P＜0.01）。與常規(guī)微量元素組相比，包被復(fù)合微量元素組（生產(chǎn)性能最佳，300 mg/kg）生長(zhǎng)中期草魚腸重、腸蛋白含量以及前、中、后腸皺襞高度顯著高于常規(guī)微量元素組（P＜0.05），而 ISI、腸長(zhǎng)和 RGL 與常規(guī)微量元素組差異不顯著（P＞0.05）。

2.5 包被復(fù)合微量元素和常規(guī)微量元素對(duì)生長(zhǎng)中期草魚腸道微生物的影響

由表8 可知，生長(zhǎng)中期草魚腸道乳酸桿菌和芽孢桿菌數(shù)量先隨飼料中包被復(fù)合微量元素水平的增加而顯著提高（P＜0.05），當(dāng)飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平均達(dá)到300mg/kg 時(shí)，腸道乳酸桿菌和芽孢桿菌數(shù)量達(dá)到最大值，而后隨著飼料中包被復(fù)合微量元素的進(jìn)一步增加顯著降低（P＜0.05）。飼料中添加包被復(fù)合微量元素對(duì)生長(zhǎng)中期草魚腸道大腸桿菌和嗜水氣單胞菌的影響與腸道乳酸桿菌的趨勢(shì)相反（P＜0.05）?；貧w分析表明：飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平（x）分別與生長(zhǎng)中期草魚腸道乳酸桿菌（yLactobacillus）、芽孢桿菌（yBacillus）、大腸桿菌（yEscherichiacoli）和嗜水氣單胞菌（yAeromonas）數(shù)量呈極顯著二次曲線關(guān)系，回歸方程分別為yLactobacillus=-1.164E-5x2+0.006x+6.267（R2=0.845，P＜0.01）、yBacillus=-1.059E-5x2+0.005x+6.382（R2=0.866，P＜0.01）、yEscherichiacoli=1.083E-5x2-0.005x+6.519（R2=0.753，P＜0.01）、yAeromonas=7.912E-6x2-0.004x+6.676（R2=0.799，P＜0.01）。與常規(guī)微量元素組相比，包被復(fù)合微量元素組（生產(chǎn)性能最佳，300 mg/kg）生長(zhǎng)中期草魚腸道乳酸桿菌和芽孢桿菌數(shù)量顯著高于常規(guī)微量元素組（P＜0.05），而大腸桿菌和嗜水氣單胞菌數(shù)量顯著低于常規(guī)微量元素組（P＜0.05）。

3 討論

3.1 包被復(fù)合微量元素與常規(guī)微量元素對(duì)生長(zhǎng)中期草魚生產(chǎn)性能的比較研究

微量礦物元素是魚類健康生長(zhǎng)所需的微量元素[7]，缺乏將引起魚類疾病抵抗力下降、生長(zhǎng)受阻、肌肉品質(zhì)變差[12-17]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼料中添加包被復(fù)合微量元素提高了生長(zhǎng)中期草魚FBW、WG 和SGR，促進(jìn)魚類生長(zhǎng)，且與常規(guī)微量元素組相比，生產(chǎn)性能最佳包被復(fù)合微量元素組（300 mg/kg）生長(zhǎng)中期草魚FBW、WG 和SGR 分別顯著高于常規(guī)微量元素組。飼料中包被復(fù)合微量元素添加水平分別與生長(zhǎng)中期草魚的WG 和SGR 呈極顯著二次曲線關(guān)系，當(dāng)飼糧中包被復(fù)合微量元素低于300 mg/kg 時(shí)，可能由于其提供的微量元素不足，導(dǎo)致魚類微量元素缺乏，不能滿足生長(zhǎng)中期草魚生長(zhǎng)需要，進(jìn)而降低了生長(zhǎng)中期草魚WG 和SGR。當(dāng)飼糧中包被復(fù)合微量元素添加水平超過 300 mg/kg（Mn，17.10 mg/kg）時(shí)，可能導(dǎo)致飼料中Mn 等部分微量元素的過量。Tang R.等[16]研究表明：當(dāng)飼糧中Mn 含量超過18.24 mg/kg時(shí)，顯著降低生長(zhǎng)中期草魚（264 g）的SGR。此外，與常規(guī)微量元素組比較，雖然150 mg/kg 包被復(fù)合微量元素組飼料中 Cu、Fe、Mn、Zn、Se 和 I 含量?jī)H為常規(guī)微量元素組的 31%、14%、71%、40%、12%和75%，但對(duì)生長(zhǎng)中期草魚的促生長(zhǎng)效果則顯著優(yōu)于常規(guī)微量元素（P＜0.05），說明包被復(fù)合微量元素在魚上的生物學(xué)效價(jià)可能優(yōu)于常規(guī)微量元素。目前，關(guān)于包被復(fù)合微量元素在魚上的研究未見報(bào)道。在陸生動(dòng)物上的零星研究表明，包被復(fù)合微量元素對(duì)黃羽肉雞和育肥豬日增重的作用效果優(yōu)于常規(guī)微量元素[3-4]，與本試驗(yàn)結(jié)果相似。包被復(fù)合微量元素促進(jìn)魚類生長(zhǎng)的原因一方面可能由于通過物理隔離，消除微量元素間的氧化作用，并在飼料加工和貯存過程中減少了對(duì)飼料中脂肪、維生素和氨基酸等營(yíng)養(yǎng)素的氧化破壞作用[18]；另一方面，通過物理包被工藝可能減小了無機(jī)金屬離子對(duì)動(dòng)物消化道黏膜的刺激損傷，改善了飼料適口性，提高動(dòng)物采食量。本試驗(yàn)結(jié)果表明：飼料中添加300 mg/kg 包被復(fù)合微量元素顯著提高了生長(zhǎng)中期草魚FI，降低FC，且與常規(guī)微量元素組相比，包被復(fù)合微量元素組（300 mg/kg）生長(zhǎng)中期草魚FI 和FC 分別顯著高于或低于常規(guī)微量元素組，該結(jié)果與在育成豬上的研究結(jié)果類似[3]。張海濤等[19]研究發(fā)現(xiàn)，包被鋅促進(jìn)凡納濱對(duì)蝦對(duì)飼料中蛋白質(zhì)的消化吸收。這些結(jié)果說明，包被復(fù)合微量元素對(duì)魚類的促生長(zhǎng)作用可能與其提高了魚類的采食量和飼料利用率有關(guān)，且作用效果優(yōu)于常規(guī)微量元素。分別以SGR 和FI 為標(biāo)識(shí)，生長(zhǎng)中期草魚（266～716 g）飼料中包被復(fù)合微量元素最適添加水平分別為239.32 和241.20 mg/kg。

3.2 包被復(fù)合微量元素與常規(guī)微量元素對(duì)生長(zhǎng)中期草魚消化吸收能力和腸道生長(zhǎng)發(fā)育的比較研究

魚類FI 和飼料利用率的提高通常與其消化吸收能力的增強(qiáng)有關(guān)[14]。腸道是魚類消化吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的主要場(chǎng)所，腸道內(nèi)消化酶活力可反映魚類的消化能力[9]。本試驗(yàn)結(jié)果表明：飼料中添加包被復(fù)合微量元素可提高生長(zhǎng)中期草魚腸道胰蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活力，且與常規(guī)微量元素組相比，包被緩釋微量元素組（300 mg/kg）這些酶的活力均顯著高于常規(guī)微量元素組，說明包被復(fù)合微量元素提高魚類對(duì)飼料中蛋白質(zhì)、脂肪和淀粉的消化能力，且作用效果優(yōu)于常規(guī)微量元素。然而，關(guān)于包被復(fù)合微量元素對(duì)動(dòng)物消化酶活力的影響未見研究報(bào)道。魚類腸道內(nèi)的消化酶來源于胰腺合成消化酶的外分泌[20]。CCK 是調(diào)節(jié)胰腺外分泌的胃腸多肽，具有很強(qiáng)的促胰酶（如胰蛋白酶等胰消化酶）釋放作用，在魚上主要由其前腸分泌[9，21]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，包被復(fù)合微量元素顯著提高生長(zhǎng)中期草魚前腸CCK 含量，說明包被復(fù)合微量元素可能通過促進(jìn)胰腺消化酶的分泌，進(jìn)而提高腸道內(nèi)消化酶的酶量。然而，包被復(fù)合微量元素組（300 mg/kg）與常規(guī)微量元素對(duì)生長(zhǎng)中期草魚腸道CCK 含量沒有顯著影響，說明魚類腸道CCK 的分泌可能與微量元素的添加形式無關(guān)，但其可能的作用方式需要進(jìn)一步研究。

魚類對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力與魚類腸道刷狀緣酶活力有關(guān)。AKP 是一種膜結(jié)合蛋白，在生物體內(nèi)分部廣泛，其中分布于動(dòng)物腸道上皮刷狀緣細(xì)胞表面的腸型AKP 與維生素D、鈣、氨基酸、脂類和葡萄糖等多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收有關(guān)。CK 通過促進(jìn)ATP 生成，為動(dòng)物腸道吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)提供能量。Na+，K+-ATPase 與大部分氨基酸和葡萄糖的吸收有關(guān)。γ-GT 能促進(jìn)動(dòng)物腸道氨基酸向細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)。因此，CK、Na+，K+-ATPase 和 γ-GT 常用于評(píng)價(jià)魚類腸道吸收能力。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼料中添加包被復(fù)合微量元素可提高生長(zhǎng)中期草魚前、中、后腸CK、Na+，K+-ATPase 和 γ-GT 活力。此外，與常規(guī)微量元素組相比，包被復(fù)合微量元素組（300 mg/kg）生長(zhǎng)中期草魚前、中、后腸AKP 和CK 活力以及前、后腸Na+，K+-ATPase 和 γ-GT 活力顯著提高，而中腸Na+，K+-ATPase 和 γ-GT 活力與常規(guī)微量元素組差異不顯著。結(jié)果說明，包被復(fù)合微量元素可能通過提高魚類腸道消化吸收酶活力，進(jìn)而提高了魚類的消化吸收能力，且作用效果顯著優(yōu)于常規(guī)微量元素。另一方面，魚類的消化吸收能力還與其腸道的吸收面積大小有關(guān)，腸道皺襞高度是反映魚類腸道吸收面積的重要指標(biāo)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼料中添加包被復(fù)合微量元素提高了生長(zhǎng)中期草魚前、中、后腸腸道皺襞高度，且與常規(guī)微量元素組比，包被復(fù)合微量元素組（300 mg/kg）生長(zhǎng)中期草魚前、中、后腸腸道皺襞高度顯著高于常規(guī)微量元素組，結(jié)果說明包被復(fù)合微量元素可能通過提高了魚類腸道吸收面積進(jìn)而促進(jìn)了魚類的消化吸收能力，且作用效果優(yōu)于常規(guī)微量元素。

魚類腸道消化吸收能力的增強(qiáng)通常依賴于腸道的正常生長(zhǎng)發(fā)育。腸重、ISI、腸長(zhǎng)、RGL 和腸蛋白含量是評(píng)價(jià)魚類腸道生長(zhǎng)發(fā)育的重要指標(biāo)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼料中添加包被復(fù)合微量元素可提高生長(zhǎng)中期草魚腸重、腸長(zhǎng)和腸蛋白含量，且與常規(guī)微量元素組比較，包被復(fù)合微量元素組（300 mg/kg）生長(zhǎng)中期草魚腸重、腸長(zhǎng)和腸蛋白含量顯著提高，說明包被復(fù)合微量元素促進(jìn)了魚類腸道生長(zhǎng)發(fā)育，且作用效果優(yōu)于常規(guī)微量元素組。

3.3 包被復(fù)合微量元素與常規(guī)微量元素對(duì)生長(zhǎng)中期草魚腸道微生物菌群的比較研究

魚類腸道正常微生物群落不僅參與機(jī)體的防御，維護(hù)機(jī)體健康，同時(shí)在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收中發(fā)揮著不可缺少的作用[22-23]。乳酸桿菌通過分泌代謝產(chǎn)物、競(jìng)爭(zhēng)排斥、免疫調(diào)節(jié)等多種方式抑制大腸桿菌等腸道有害菌調(diào)節(jié)腸道微生物區(qū)系平衡，增強(qiáng)動(dòng)物腸道屏障和免疫功能，促進(jìn)腸道生長(zhǎng)發(fā)育[24]。魚類腸道中的正常菌群如芽孢桿菌等可分泌多種消化酶，進(jìn)而促進(jìn)宿主對(duì)一些營(yíng)養(yǎng)物的消化[25]。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼料中添加包被復(fù)合微量元素增加了生長(zhǎng)中期草魚腸道有益微生物乳酸桿菌和芽孢桿菌數(shù)量，減少了有害微生物大腸桿菌和嗜水氣單胞菌數(shù)量，且常規(guī)微量元素組的比較，包被復(fù)合微量元素（300 mg/kg）對(duì)魚類腸道微生物調(diào)節(jié)的作用效果優(yōu)于常規(guī)微量元素。喻哲昊[3]在育肥豬上的研究顯示，與常規(guī)微量元素組相比，包被復(fù)合微量元素組顯著提高了育肥豬腸道乳酸桿菌和雙歧桿菌的數(shù)量，而大腸桿菌數(shù)量顯著減低，與本試驗(yàn)結(jié)果類似。微量元素促進(jìn)動(dòng)物乳酸桿菌和芽孢桿菌的生長(zhǎng)可能與其營(yíng)養(yǎng)作用有關(guān)。研究表明：大量微生物的生長(zhǎng)依賴于較高水平的微量元素（如鐵、錳、鋅等）[26]。而微量元素抑制有害菌大腸桿菌和嗜水氣單胞菌數(shù)量可能與其促進(jìn)了乳酸桿菌的生長(zhǎng)有關(guān)。一方面，乳酸桿菌可通過分泌代謝產(chǎn)物、競(jìng)爭(zhēng)排斥、免疫調(diào)節(jié)等多種方式抑制大腸桿菌等腸道有害菌的生長(zhǎng)[24]。另一方面，乳酸桿菌能分泌p-hydroxyphenyllactic acid（HPLA）分子將 Fe3+還原為 Fe2+，促進(jìn)動(dòng)物腸上皮細(xì)胞對(duì)鐵離子的吸收，進(jìn)而降低有害菌利用鐵的概率[27]。包被復(fù)合微量元素對(duì)腸道微生物的作用優(yōu)于常規(guī)微量元素可能部分與其緩釋作用有關(guān)。這些結(jié)果說明包被復(fù)合微量元素促進(jìn)了腸道有益菌乳酸桿菌和芽孢桿菌的增殖，降低了腸道有害菌大腸桿菌和嗜水氣單胞菌的增殖，從而發(fā)揮腸道微生物的益生作用，且作用效果優(yōu)于常規(guī)微量元素。

4 結(jié)論

①包被復(fù)合微量元素比常規(guī)微量元素能更有效地促進(jìn)生長(zhǎng)中期草魚生長(zhǎng)，提高采食量及飼料利用率。

②與常規(guī)微量元素相比，包被復(fù)合微量元素能更有效地促進(jìn)生長(zhǎng)中期草魚腸道生長(zhǎng)發(fā)育，增加腸道消化吸收面積，提高消化吸收酶活力，促進(jìn)了腸道有益菌乳酸桿菌和芽孢桿菌的增殖，降低了腸道有害菌大腸桿菌和嗜水氣單胞菌的增殖，進(jìn)而增強(qiáng)了消化吸收能力。

③以SGR 和FI 為標(biāo)識(shí)，生長(zhǎng)中期草魚（266～716 g）飼料中包被復(fù)合微量元素最適添水平分別為239.32 和 241.20 mg/kg。