袁建平　盧云龍　田園

【摘要】目的：篩選出優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的金蕎麥品種進行栽培，提高金蕎麥的品質(zhì)和產(chǎn)量，促進金蕎麥產(chǎn)業(yè)發(fā)展的標準化和規(guī)范化。方法：在2009年金蕎麥種質(zhì)資源調(diào)查的基礎(chǔ)上，對符合質(zhì)量標準的野生金蕎麥進行引種馴化，從栽培品中篩選出3種植物性狀穩(wěn)定的金蕎麥進行栽培，通過有效成分含量檢測及產(chǎn)量差異分析，從3種植物性狀穩(wěn)定的金蕎麥中篩選出各項性狀表現(xiàn)良好的優(yōu)良單株進行栽培。結(jié)果：金蕎麥3個類型塊根在性狀上存在差異，在質(zhì)量方面，圓錐形塊根表兒茶素含量最高，圓柱形其次，在產(chǎn)量方面，圓柱形根和圓錐形根差異不大，但均顯著高于拳狀根。結(jié)論：在栽培過程中應(yīng)選擇圓錐形塊根和圓柱形塊根做種苗進行培育。

【關(guān)鍵詞】金蕎麥;表兒茶素;良種選育

【中圖分類號】R282.2【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2019）9-0023-04

金蕎麥Fagopyrum dibotrys （D.Don） Hara系蓼科蕎麥屬多年生草本植物[1]，性涼，味微辛、酸澀，具有清熱解毒、排膿祛瘀之功。臨床主要用于治療肺膿瘍、肺炎、扁桃體周圍膿腫[2]。金蕎麥分布于我國黃河以南的多個省區(qū)，主要以云、貴、川三省野生資源儲量最大[3]，其中云南是世界蕎麥資源遺傳多樣性中心和生態(tài)多樣性中心之一，也是中國蕎麥野生種的分布中心[4-5]。研究發(fā)現(xiàn)，云南高海拔地區(qū)野生金蕎麥核心分布區(qū)所產(chǎn)的金蕎麥，具有有效成分含量高、藥材質(zhì)量好的特點[6-7]。20世紀90年代，由于金蕎麥野生資源遭到了極大的破壞，國家林業(yè)局、農(nóng)業(yè)部聯(lián)合將金蕎麥列入首批《國家重點保護野生植物名錄》，為Ⅱ級保護植物。目前云、貴、川金蕎麥野生資源雖然分布廣，由于缺乏資源保護，其野生資源已急劇減少，盡管有不少種植戶對金蕎麥進行引種馴化，且也獲得了成功，但是金蕎麥種植品種混亂、產(chǎn)量低的現(xiàn)象并未緩解、市場對野生金蕎麥帶來的壓力并未減輕，因此選育高產(chǎn)、有效成分含量高的金蕎麥新品種是金蕎麥資源保護和可持續(xù)開發(fā)利用的需求。但是，目前對于金蕎麥品種選育方面的研究很少見報道。

筆者在金蕎麥種質(zhì)資源調(diào)查的基礎(chǔ)上，篩選出3種植物性狀穩(wěn)定的金蕎麥進行人工栽培，通過金蕎麥產(chǎn)量、內(nèi)在質(zhì)量及商品性狀等指標進行金蕎麥優(yōu)良品種的選育研究，以期為生產(chǎn)用栽培品種的優(yōu)化提供技術(shù)保障，促進金蕎麥產(chǎn)業(yè)持續(xù)健康發(fā)展。

1儀器及試藥

1.1儀器Agilent Technologies 1260高效液相色譜儀;LIV-2600紫外分光光度計;DHG-9240A恒溫干燥箱（上海一恒科學儀器有限公司）;ME55電子天平（瑞士梅特勒-托利多）;RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）。

1.2試藥表兒茶素對照品（中國食品藥品檢定研究院，供含量測定用）;液相分析用試劑為色譜純，其余試劑均為分析純，水為蒸餾水、超純水。

2金蕎麥良種的選育

2.1野生金蕎麥的篩選王莉花等[8]對云南野生金蕎麥野生資源地理分布的考察研究發(fā)現(xiàn)，云南的野生金蕎麥資源具有獨特的優(yōu)越性，如耐脊、耐霜凍、藥用成分高等特性。在云南省境內(nèi)采集野生金蕎麥并進行質(zhì)量評價，2012年4月將質(zhì)量評價合格的野生金蕎麥進行人工種植10畝。見表1。

2.1野生金蕎麥的引種馴化2014年11月下旬金蕎麥地上部分枯萎后進行采挖，經(jīng)篩選在栽培區(qū)獲得3個性狀穩(wěn)定的栽培類型。見表2。

3金蕎麥優(yōu)良品種的篩選

3.1品比試驗與生產(chǎn)試驗2015年4月將篩選出的3個植物性狀穩(wěn)定的金蕎麥進行栽培，選擇地勢平坦、肥力均勻、交通便利、灌溉條件差異不大的地塊，統(tǒng)一按常規(guī)栽培方法和田間管理進行田間試驗。隨機區(qū)組法進行試驗設(shè)計，每個栽培類型進行4次重復試驗。品比試驗以每個類型310?m2進行。測定小區(qū)產(chǎn)量為傳統(tǒng)加工方法干燥的干品產(chǎn)量。

3.2質(zhì)量評價方法

3.2.1檢測方法依據(jù)《中華人民共和國藥典》（2015年版一部）進行檢測。

3.2.2水分測定將供試品粉碎成直徑不超過3?mm的顆?；蛩槠?，取供試品4?g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過5?mm，疏松供試品不超過10?mm，精密稱定，打開瓶蓋在100～105?℃干燥5?h，將瓶蓋蓋好，移置干燥器中，冷卻30?min，精密稱定，再在上述溫度干燥1?h，冷卻，稱重，至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5?mg為止。根據(jù)減失的重量，計算樣品中的水分含量（%），水分不得過15.0%。

3.2.3浸出物測定取供試品約4?g，精密稱定，置250～300?mL的錐形瓶中，精密加75%乙醇溶液100?mL，密塞，冷浸，前6?h內(nèi)時時振搖，再靜置18?h，用干燥濾器迅速濾過，精密量取續(xù)濾液20?mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105?℃干燥3?h，置干燥器中冷卻30?min，迅速精密稱定重量。除另有規(guī)定外，以干燥品計算供試品中醇溶性浸出物的含量（%），含量不低于14%。

3.2.4表兒茶素含量測定

3.2.4.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;乙腈-0.004%磷酸溶液（10∶90）;檢測波長為280?nm。理論板數(shù)按表兒茶素峰計算應(yīng)不低于6000。

3.2.4.2對照品溶液的制備取表兒茶素對照品適量，精密稱定，加流動相制成每1?mL含25?μg的溶液，即得。

3.2.4.3供試品溶液的制備取本品粗粉約2?g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50?mL，密塞，精密稱定，放置1?h，加熱回流1?h，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液25?mL，減壓濃縮（50～70?℃）至近干，殘渣加乙腈-水（10∶90）混合溶液分次洗滌，洗液轉(zhuǎn)移至10?mL量瓶中，加乙腈-水（10∶90）混合溶液至刻度，搖勻，離心（轉(zhuǎn)速為每分鐘3000轉(zhuǎn)）5?min。精密量取上清液5?mL，加入聚酰胺柱（30～60目，內(nèi)徑1.0?cm，柱長為15?cm，濕法裝柱）上，以水50?mL洗脫，棄去水液，再用乙醇100?mL洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮（50～70?℃）混合溶液至近干，殘渣用乙腈-水（10∶90）混合溶液溶解并轉(zhuǎn)移至10?mL量瓶中，加乙腈-水（10∶90）混合溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。

3.2.4.4測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20?μL，注入液相色譜儀，測定，即得。按干燥品計算樣品含表兒茶素的量（%），含量不得低于0.042%。

3.3結(jié)果分析

3.3.1品比試驗產(chǎn)量比較及方差分析結(jié)果由表3、4、5可知，圓柱形根與圓錐形根在產(chǎn)量上無顯著差異，但與拳狀根相比，存在顯著性差異。

3.3.2不同栽培類型金蕎麥塊根浸出物含量比較在3個栽培類型中圓錐形塊根浸出物含量最高達27.3%，遠高于2015版中國藥典規(guī)定的14.0%，其次是圓柱形塊根，含量最低的是拳狀塊根。

3.3.3不同類型金蕎麥塊根表兒茶素含量 圓錐形快根表兒茶素含量最高達0.133%遠高于2015版中國藥典規(guī)定的0.020%，圓柱形塊根含量其次，拳狀塊根表兒茶素含量最低。

4金蕎麥的栽培技術(shù)

4.1選地和整地吳惠群等[9]通過對金蕎麥生態(tài)環(huán)境的研究發(fā)現(xiàn)，金蕎麥適宜在弱堿性土壤中生長。選取弱堿性的沙壤土地塊，耕深35?cm，每塊地施加5?kg過磷酸鈣為底肥，耙細，整平。

4.2繁殖

4.2.1直播育苗金蕎麥種子繁殖分為春播和秋播，春播在每年4月進行，秋播在8月上旬開始。整地并施足底肥備用，將當年采收成熟飽滿無病蟲害的金蕎麥種子用溫水浸泡2?h后撈出，用草木灰以2∶1的比例與種子拌勻。穴播法：株行距20?cm×30?cm，每穴播種6粒種子，播種后蓋上1～2?cm的細土;撒播法：將處理好的種子均勻地撒在整好的地里，蓋上適當?shù)耐?，畝用種量為4～5?kg。

4.2.2扦插育苗扦插育苗以腐殖土、農(nóng)家肥、細土為基質(zhì)，以2.5?m×8?m起畦，并在扦插前用多菌靈消毒，剪取組織充實無病蟲害的金蕎麥枝條，長15～20?cm，具節(jié)2～3個，用500倍多菌靈液浸泡枝條10?min后扦插于苗床上;以株行距為9?cm×12?cm扦插，插條深為枝條長的2/3;用80%遮陰網(wǎng)覆蓋避免陽光直，扦插后及時澆水透水，防止扦插苗脫水，澆水保濕。

4.2.3塊根育苗冬季于金蕎麥地上部分枯萎后，采挖出地下根莖，選取無機械損害和無病蟲害的根莖，集中埋于地里，上面覆蓋10～15?cm的土。于次年4月挖出，將根莖切成若干小塊，每個切塊留有2～3個芽苞。將切好的塊莖放置于陰涼通風處，噴以500倍多菌靈液，12?h后進行播種，播種以穴播為主，穴深10?cm，株行距為30?cm×40?cm，栽時芽頭向上，用土與草木灰1∶1的比例混合，施入穴中，蓋土即可，移栽后應(yīng)注意保持土壤濕度，25?d后側(cè)芽開始萌發(fā);每畝用苗量為120～150?kg。

4.2.4組培育苗選擇飽滿、無病蟲害的金蕎麥種子作為培植材料。

4.2.4.1滅菌用濃硫酸浸泡種子4～6?min，用自來水沖洗浸泡過的種子3～4次至無硫酸殘留，然后加適量水，再加2～3滴吐溫-80，振搖10～15?min，自來水沖淋40～60?min。轉(zhuǎn)移至超凈工作臺，用75%酒精消毒30～40?s，無菌水洗3～4次，再用飽和漂白粉溶液消毒25～30?min，無菌水洗3～4次，最后0.1%升汞溶液加1～2滴吐溫-80消毒10～11?min，無菌水洗6～7次。

4.2.4.2接種將消毒好的種子用無菌濾紙吸凈表層水，接種于MS+3.0?mg/LGA3的培養(yǎng)基中，在溫度23～27℃，光照強度3000～4000lux，單日光照時間為12?h的環(huán)境條件下培養(yǎng)。

4.2.4.3增殖金蕎麥種子經(jīng)誘導產(chǎn)生無菌芽后，將其無菌芽切成約1～2?cm的單芽莖段，接種于MS+0.1mg/L IBA+1.5mg/L BA +1.5?mg/L KT的增殖培養(yǎng)基中，在溫度23～27℃，光照強度3000～4000lux，單日光照時間為12?h的條件下培養(yǎng)。

4.2.4.4生根將增殖后的無菌芽切成單芽，接種于MS+1.0mg/L NAA+1.5mg/LIBA+1.0?g/L 活性炭的生根培養(yǎng)基中，在溫度23～27℃，光照強度3000～4000lux，單日光照時間為12?h的環(huán)境下培養(yǎng)。

4.3田間管理4月份播種時施過磷酸鈣為底肥，每地塊5?kg。第1年8月施肥1次，肥料配方為施譜潤高鉀型葉面肥，第2年6月施肥1次，肥料配方為過磷酸鈣底肥+磷酸二氫鉀+根莖膨大鉀寶+元和微生物肥料，每年7月份、11月份除草一次。目前發(fā)現(xiàn)金蕎麥的主要病害有病毒病和蚜蟲，對于病毒病在選種時進行篩選，噴灑多菌靈減少病毒的侵害;對于蚜蟲病可采用高效氯氟氰菊酯進行噴灑。

4.4采收及加工楊明宏等[10]結(jié)合太極集團原料生產(chǎn)基地的特點，分析金蕎麥的采收時間和期限對金蕎麥品質(zhì)質(zhì)量和產(chǎn)量的相關(guān)影響，確定金蕎麥的最佳采收期為栽培第2年從10月中旬地上部分枯萎。因此在10月下旬地上部分枯萎后采挖，采挖后去須根，鮮切片，將切好片的金蕎麥塊根直接放在陽光下曝曬，并不定時的翻動使其都能在陽光下照射均勻的散失水分，晾曬至使其水分含量不超過13%即可。

5討論

2015版《中華人民共和藥典》從外觀形狀、顯微鑒別、水分、總灰分、醇溶性浸出物含量及表兒茶素含量幾方面對金蕎麥進行質(zhì)量控制[2]。金蕎麥中的主要化學成分是一類原花色素的縮合性單寧的混合物，其中表兒茶素是主要指標性成分[11]。因此，在進行金蕎麥種質(zhì)資源普查時，筆者以表兒茶素含量為金蕎麥質(zhì)量評價的指標，從而篩選出質(zhì)量合格的野生金蕎麥進行人工栽培。在栽培品中采挖過程中，發(fā)現(xiàn)金蕎麥3種植物性狀穩(wěn)定的金蕎麥，即：圓柱形塊根、圓錐形塊根、拳狀塊根。將這3種植物性狀穩(wěn)定的金蕎麥進行栽培并進行評比性試驗，從產(chǎn)量上看，圓柱形塊根產(chǎn)量最高，其次是圓錐形，最后是拳狀塊根，從質(zhì)量上看，圓錐形塊根質(zhì)量最佳，浸出物含量為27.3%，表兒茶素含量為0.133%;其次是圓柱形塊根，浸出物含量為25.8%，表兒茶素含量為0.09%;最后是拳狀塊根，浸出物含量為19.8%，表兒茶素含量為0.045%。在今后的栽培過程中應(yīng)選擇圓柱形及圓錐形金蕎麥做種苗，以更大程度提高金蕎麥的產(chǎn)量和品質(zhì)。

金蕎麥除具有顯著的抗癌、抑制腫瘤細胞肺侵襲和轉(zhuǎn)移的作用外，還有消炎抗菌、解熱抗炎、祛痰鎮(zhèn)咳、抗血小板聚集、抗突變、抗高巨噬細胞的吞噬功能等重要作用[12]。目前，金蕎麥已廣泛應(yīng)用到醫(yī)藥生產(chǎn)中，已開發(fā)研制出的產(chǎn)品有威麥寧膠囊、急支糖漿和金蕎麥膠囊等知名中成藥及一些特色醫(yī)院制劑如復方威麥寧膠囊、消炎利喉口服液、金蕎麥止咳膏、復方螺旋藻膠囊、急支片的主要原料。隨著市場對金蕎麥原材料的需求日益增加，野生金蕎麥資源逐漸匱乏，對野生金蕎麥進行引種馴化、選育優(yōu)良品種不僅能逐漸緩解金蕎麥供應(yīng)短缺、質(zhì)量不穩(wěn)定的現(xiàn)實矛盾，還能更好的保護野生金蕎麥資源及生態(tài)環(huán)境，為金蕎麥產(chǎn)業(yè)化發(fā)展奠定夯實的基礎(chǔ)。

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