龔鳳萍 上官端琳 竹 瑋 段慶虎 張宗源 尹川川 易紅巖 冉忠萍 張應(yīng)香

（信陽(yáng)市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，河南信陽(yáng)464000）

灰樹花是擔(dān)子菌亞門的非褶菌目、多孔菌科、奇果屬，俗稱栗蘑，是一種名貴的食、藥兼用菌[1]，其營(yíng)養(yǎng)豐富，肉質(zhì)鮮嫩，味如雞絲，脆似玉蘭，藥用價(jià)值更高，富含硒等人體必需微量元素，尤其富含灰樹花多糖（以β-葡聚糖為主），是一種極好的天然免疫調(diào)節(jié)劑，具有顯著的防癌抗癌和改善健康功效，目前作為一種高級(jí)保健品風(fēng)行日本、美國(guó)市場(chǎng)[2]。灰樹花的食用及藥用價(jià)值正引起人們廣泛關(guān)注，市場(chǎng)需求量逐年上升，其市場(chǎng)前景廣闊。

我國(guó)在20世紀(jì)80年代開始人工馴化栽培灰樹花。目前已經(jīng)形成浙江慶元第一季割口出菇、第二季脫袋覆土出菇和河北遷西的覆土出菇兩種模式。有報(bào)道野生灰樹花發(fā)生于夏秋間的栗樹根部周圍及櫟、栲等闊葉樹的樹干及木樁周圍[3]。豫南山區(qū)分布大量的殼斗科樹種，每年的板栗樹開花季節(jié)雨后在其根部能采到野生灰樹花，說(shuō)明豫南山區(qū)具有栽培灰樹花的自然條件。同時(shí)，豫南山區(qū)栽培大面積板栗樹，僅新縣就有2萬(wàn)hm2。每年栗園改造、修剪產(chǎn)生大量廢枝條等，為灰樹花栽培提供了充足的原料。由此可見，豫南山區(qū)有著栽培灰樹花氣候條件和資源優(yōu)勢(shì)。為此筆者開展灰樹花引種及比較試驗(yàn)，以期為當(dāng)?shù)鼗覙浠ㄔ耘嗵峁﹨⒖肌?/p>

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試灰樹花菌株:從灰樹花主產(chǎn)地河北遷西、河南省農(nóng)科院（植物營(yíng)養(yǎng)與資源環(huán)境研究所保藏）引進(jìn)灰樹花菌株5個(gè)，詳見表1。

表1 各供試灰樹花菌株及來(lái)源

母種配方:去皮馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，蛋白胨1.5 g，磷酸二氫鉀2 g，硫酸鎂 0.5 g，維生素B1 20 mg，加水1000 mL，pH 6.0。

原種配方:棉籽殼80%，麩皮17%，石膏1%，葡萄糖1%，硫酸鎂1%。

栽培種配方:木屑45%，棉籽殼32%，麩皮15%，豆粉5%，糖1%，石膏1%，硫酸鎂1%，料含水量50%～53%。

1.2 試驗(yàn)方法

1.3 拮抗試驗(yàn)及菌絲培養(yǎng)比較試驗(yàn)

供試灰樹花菌株拮抗試驗(yàn)及菌絲培養(yǎng)試驗(yàn)參考文獻(xiàn)[4]。將滅過菌的母種培養(yǎng)基在60～70℃時(shí)趁熱倒入9 cm的培養(yǎng)皿中，冷卻備用。用直徑為0.5 cm的打孔器截取供試灰樹花母種各一塊，兩兩接種于培養(yǎng)皿中央，間距1 cm以上，封口置25℃培養(yǎng)。待兩菌落長(zhǎng)至一起1～2 d，觀察菌落連接處有無(wú)拮抗線。同樣挑取供試灰樹花母種一塊于培養(yǎng)皿中央，封口置25℃培養(yǎng)。待菌絲生長(zhǎng)7 d后劃線一次，培養(yǎng)14 d后第二次劃線。用游標(biāo)卡尺測(cè)定兩次劃線的間距（cm），除以培養(yǎng)天數(shù)即可得出各個(gè)供試菌株的菌絲日均長(zhǎng)速。

1.4 栽培比較試驗(yàn)

2016年5月11日接種一批，2017年2月19日接種一批。栽培料配方參照栽培種配方。主料木屑、棉籽殼先預(yù)濕堆悶1～2 d，裝袋前將麩皮等輔料拌入主料中混勻，調(diào)至培養(yǎng)料含水量50%～53%。拌料完畢立即裝袋，栽培袋為規(guī)格20 cm×38 cm×0.005 cm高壓聚丙烯袋。每個(gè)供試灰樹花菌株接種20袋，三次重復(fù)。料裝袋完畢后插入接種棒封口。袋肩料面離封口處留約1 cm空間，便于后期現(xiàn)原基。高壓滅菌，126℃保持2.5 h。采用立體打穴接種，棉塞封口。接種后料袋置于23～25℃暗培養(yǎng)。保持發(fā)菌室內(nèi)空氣新鮮、氧氣充足。

菌絲培養(yǎng)30～40 d基本發(fā)菌滿袋，菌袋表面有白色菌膜表明菌絲達(dá)到生理成熟，此時(shí)加強(qiáng)通風(fēng)和給予50 lx散射光刺激原基形成。當(dāng)白色菌膜漸變成灰黑色隆起，開口催蕾。方法:一是用刀在原基形處劃“V”或“X”形的刀口；二是直接將封口塞子拔掉或割掉。開口后覆蓋地膜保濕，提高空氣相對(duì)濕度到80%以上，溫度20～23℃無(wú)光培養(yǎng)，使開口處菌絲復(fù)白，約7～10 d形成饅頭狀原基。當(dāng)原基表面分泌淡黃色液滴并出現(xiàn)凹陷時(shí)，應(yīng)當(dāng)注意，不可將黃色液滴沖掉，否則子實(shí)體會(huì)停止發(fā)育。當(dāng)子實(shí)體分化成珊瑚狀小梗時(shí)可以進(jìn)入出菇棚進(jìn)行出菇管理。出菇要求空氣相對(duì)濕度90%～95%，溫度20～25℃，避免環(huán)境因素劇烈變化影響原基分化及其進(jìn)一步生長(zhǎng)。噴霧時(shí)盡量不要噴灑在子實(shí)體上，在走道或棚內(nèi)空間噴霧增濕，地面噴水保濕。當(dāng)菌蓋邊緣白色生長(zhǎng)圈消失、背面出現(xiàn)小孔時(shí)表明子實(shí)體發(fā)育成熟，可以采收。在20～25℃的溫度條件下從原基形成到子實(shí)體采收大約25 d。

觀察記錄灰樹花菌絲長(zhǎng)勢(shì)（顏色、粗細(xì)、致密度等）、菌絲滿袋時(shí)間、開口催蕾后染雜菌情況、現(xiàn)原基時(shí)間及子實(shí)體形態(tài)特征。

2 結(jié)果與分析

2.1 供試灰樹花菌株拮抗試驗(yàn)結(jié)果

通過拮抗試驗(yàn)觀察（表2），除了HSH4、HSH5之間無(wú)拮抗線外，其余均有明顯的拮抗線，表明這兩個(gè)菌株為同種異名?？梢源_定供試5個(gè)菌株實(shí)際為4個(gè)。

表2 供試灰樹花菌株拮抗試驗(yàn)結(jié)果

2.2 供試灰樹花菌株的菌絲長(zhǎng)速、長(zhǎng)勢(shì)

由圖1可看出，菌絲長(zhǎng)速較快的是HSH6，日均長(zhǎng)速為3.3 mm∕d，其次為HSH4，日均長(zhǎng)速為 3.2 mm∕d，再次為HSH2，日均長(zhǎng)速為 2.9 mm∕d，最慢的是HSH3，日均長(zhǎng)速為2.0 mm∕d。菌絲長(zhǎng)勢(shì)（表2）:菌絲最為濃密、長(zhǎng)勢(shì)最強(qiáng)的是HSH6，尖端菌絲整齊、顏色潔白、濃密；其次是HSH4，尖端菌絲整齊、分叉較多、顏色白、較密；較差的是HSH2、HSH3，尖端菌絲較整齊，顏色較白、較稀疏。

由此可見，四個(gè)供試灰樹花菌株中HSH6菌絲長(zhǎng)勢(shì)最好，長(zhǎng)速最快；其次是HSH4；最差的是HSH2、HSH3。

表2 供試灰樹花菌株菌絲生長(zhǎng)情況

圖1 供試灰樹花菌株菌絲長(zhǎng)速

2.3 供試灰樹花菌株栽培試驗(yàn)結(jié)果

2016年栽培試驗(yàn)結(jié)果見表3。從表3可看出，4個(gè)菌株中表現(xiàn)最好的是HSH4，具有抗性強(qiáng)、易現(xiàn)原基的特性；其次是HSH2，雖然可以現(xiàn)原基，但是菌絲抗逆性較差，菌袋開口后有易感染雜菌的現(xiàn)象；HSH3、HSH6可能菌絲沒達(dá)到生理成熟，在7月中旬沒能現(xiàn)原基，到了8月因高溫未能出菇。

HSH4菌株一潮菇平均袋產(chǎn)為143 g，HSH2一潮菇平均袋產(chǎn)量為122 g。所有供試菌株在出過一潮菇后因遇到高溫天氣，菌絲受高溫?zé)岷?，沒能繼續(xù)出菇。

2017年2月19日栽培試驗(yàn)結(jié)果見表4。由表4看出，HSH2菌絲長(zhǎng)勢(shì)較弱，開口催蕾時(shí)易感染雜菌，出菇較晚，頭潮單袋產(chǎn)量為110 g，子實(shí)體覆瓦狀，色澤灰黑色，菌蓋邊緣有一圈白色，菇形較好（圖2）。HSH4菌絲抗性較強(qiáng)、長(zhǎng)速快，菌絲滿袋時(shí)間較HSH2提早近15 d。菌絲開口后易形成白色原基，且不易感染雜菌。產(chǎn)量上明顯高于HSH2，頭潮單袋產(chǎn)量為204 g。子實(shí)體呈灰白色，珊瑚狀分支較多（圖3）。HSH3、HSH6未出菇。

灰樹花在分化階段，光照不足、通風(fēng)不良時(shí)子實(shí)體易出“菜花菇”（圖4）。

出菇一潮后按照河北遷西模式進(jìn)行覆土栽培管理。時(shí)值5月底高溫天氣，棚內(nèi)溫度接近30℃，出過一潮菇的菌袋已經(jīng)出現(xiàn)吐黃水現(xiàn)象，菌絲抗性降低，覆土后透氣性差，菌袋變軟腐爛。

表3 供試灰樹花菌株栽培試驗(yàn)出菇情況（2016）

圖2 灰樹花菌株HSH2子實(shí)體

圖3 灰樹花菌株HSH4子實(shí)體

圖4 畸形灰樹花

圖5 單層地?cái)[出菇

表4 供試灰樹花栽培試驗(yàn)出菇情況（2017）

3 小結(jié)與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，從生物學(xué)性狀試驗(yàn)結(jié)果看，HSH6、HSH3菌絲長(zhǎng)速快、長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)，但是兩批栽培試驗(yàn)均不能正常出菇?？翟创旱葘?duì)雙孢蘑菇試驗(yàn)，初步得出菌絲生長(zhǎng)強(qiáng)弱與其產(chǎn)量有一定相關(guān)性，但菌絲生長(zhǎng)快、活力旺、抗逆力強(qiáng)的品種其產(chǎn)量并不一定很高[5]。HSH6、HSH3菌株菌絲長(zhǎng)速快、長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)、其不出菇是否因出菇方式不適合或是其他原因還有待進(jìn)一步研究。

栽培試驗(yàn)表明，HSH4適應(yīng)性較強(qiáng)，開口后菌絲抗逆性較強(qiáng)，現(xiàn)原基袋數(shù)可達(dá)100%，子實(shí)體色澤灰白。管理上可較為粗放些，較穩(wěn)產(chǎn)；HSH2菌袋開口催蕾時(shí)易染雜菌，現(xiàn)原基袋數(shù)在90%左右，因此，需要更精細(xì)管理，才能促其現(xiàn)蕾提高產(chǎn)量，但其子實(shí)體色澤灰黑色，菇形好，受市場(chǎng)歡迎。

觀察發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)架外側(cè)的菌袋袋口菌絲出現(xiàn)過早吐黃水現(xiàn)象，而培養(yǎng)架內(nèi)側(cè)的菌袋沒有發(fā)現(xiàn)這種現(xiàn)象。說(shuō)明灰樹花發(fā)菌過程中需要完全黑暗，否則有散射光會(huì)促使菌絲過早由營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)轉(zhuǎn)為生殖生長(zhǎng)，如果達(dá)不到催蕾環(huán)境條件要求，菌絲會(huì)出現(xiàn)吐黃水現(xiàn)象，易滋生雜菌，造成菌袋污染，影響后期出菇。

灰樹花出菇管理最大難點(diǎn)是催蕾環(huán)節(jié)，這個(gè)環(huán)節(jié)掌握不好會(huì)造成不出菇導(dǎo)致絕收。割口出菇管理更為復(fù)雜，對(duì)環(huán)境要求很苛刻，溫、光、濕、氣有一個(gè)因素控制不好會(huì)出現(xiàn)菌絲變干，很難達(dá)到100%現(xiàn)原基。割口菌袋裸露菌絲抗性差易染雜菌。筆者發(fā)現(xiàn)利用棉塞（無(wú)棉蓋體）封口或扎繩封口方式，當(dāng)菌絲滿袋袋壁出現(xiàn)白色菌膜時(shí)稍稍松開扎繩，或松動(dòng)棉塞，增強(qiáng)袋口透氣性，在袋內(nèi)現(xiàn)腦狀原基，進(jìn)而分化成蜂窩狀菇蕾。這種催蕾方式優(yōu)點(diǎn)是，利用菌絲在微微透氣后呼吸旺盛產(chǎn)生水氣達(dá)到保濕作用，當(dāng)溫度在20～25℃時(shí)，10 d左右即可由白毛團(tuán)形成原基。催蕾溫度低于18℃以下灰樹花較難形成原基，只有當(dāng)腦狀原基分化后，再進(jìn)入出菇棚進(jìn)行出菇管理，方可穩(wěn)產(chǎn)。

豫南地區(qū)灰樹花栽培頭潮菇在開口保濕、加強(qiáng)光照和通風(fēng)等條件下能正?，F(xiàn)蕾、出菇（圖5），但是如何能保證第二潮、第三潮菇高產(chǎn)還有待進(jìn)一步探索。