宋 婷 ，王 穎 ，王相超 ，崔 壯

（1.天津醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計學(xué)系，天津300070；2.天津市濱海新區(qū)疾病預(yù)防控制中心傳控科，天津300453）

手足口病（hand-foot-and-mouth disease,HFMD）是一種幼兒常見的急性腸道傳染病，以發(fā)熱和手、足、口等部位出現(xiàn)皮疹為主要臨床表現(xiàn)。1995年，中國首次從手足口病患者分離出腸道病毒71型（EV71）[1]。近年來，EV71手足口病疫情持續(xù)在我國大規(guī)模流行。在我國手足口病病原學(xué)調(diào)查中，70%的重癥病例和90%以上的死亡病例均由EV71引起[2]，引起了社會的恐慌和政府的關(guān)注。手足口病是一種急性自限性傳染病，人類機體感染腸道病毒后可產(chǎn)生保護性中和抗體，在體內(nèi)長期存在，能有效保護機體，避免再次感染[3]。而目前針對普通人群EV71中和抗體血清流行病學(xué)的研究還較少，僅在小年齡組兒童范圍內(nèi)開展研究[1,3-4]，對于有效防控EV71流行非常不利。本研究通過血清流行病學(xué)調(diào)查研究，了解濱海新區(qū)2010-2017年8年間濱海新區(qū)健康人群人腸道病毒71型血清中和抗體的動態(tài)變化，評價當(dāng)前人群的免疫水平，進(jìn)而為EV71引起的手足口病監(jiān)測系統(tǒng)的完善提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究人群及資料 2010-2017年，在濱海新區(qū)地區(qū)開展，每年選擇未患過手足口病的在濱海新區(qū)居住超過6個月以上的健康人群，分5歲及以下年齡組、5歲以上至15歲年齡組、15歲以上至25歲年齡組、25歲以上至35歲年齡組及35歲以上年齡組。在知情同意的前提下，每年每個年齡組均采用單純隨機的方法至少選擇8人，8年共368人。工作人員進(jìn)行流調(diào)隨訪，填寫人口學(xué)資料、生活習(xí)慣、環(huán)境及既往史等信息。

1.2 標(biāo)本采集 除5歲及以下年齡組人群采集3mL靜脈血外，其余年齡組人群均采集5 mL靜脈血。全血標(biāo)本置于真空無菌采血管中，自凝后，分離血清，將血清移到2 mL外螺旋的血清保存管中，外表粘上帶有唯一識別號碼的標(biāo)簽。將血清置于-20℃以下冰箱中冷凍保存。

1.3 檢測方法及判斷標(biāo)準(zhǔn) 按照原衛(wèi)生部發(fā)布的《手足口病預(yù)防控制指南（2009年版）》中的病毒中和抗體測定的操作步驟進(jìn)行檢測，每份血清標(biāo)本進(jìn)行 4 倍系列稀釋，即 1:4、1:16、1:64、1:256、1:1 024。以＜1:4判為陰性，≥1:4判為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 全部資料錄入EXCEL數(shù)據(jù)庫，用EXCEL2003制作線圖，用SPSS15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗，影響因素的分析采用Logistic回歸分析。檢驗水準(zhǔn)為0.05。

2 結(jié)果

2.1 調(diào)查對象基本特征 2010-2017年共采集天津市濱海新區(qū)368名健康人群的血清標(biāo)本，年齡范圍在出生至50歲，年齡中位數(shù)為20歲，其中5歲及以下年齡組81人，5歲以上至15歲年齡組71人，15歲以上至25歲年齡組75人，25歲以上至35歲年齡組71人，35歲以上年齡組70人。男女比為1∶0.94。368人中有292人EV-A71抗體陽性，占調(diào)查對象的79.35%。

2.2 不同年份健康人群EV-A71抗體陽性率 2010-2017年天津市濱海新區(qū)健康人群EV-A71抗體陽性率呈周期性變化，有整體逐漸下降的趨勢（χ2=6.695，P=0.0 1），2011 年最高為 100%，2016 年最低為70.21%。見圖1。

圖1 2010-2017年天津市濱海新區(qū)健康人群EV-A71抗體陽性率變化動態(tài)趨勢Fig 1 The trend in the positive rate of EV-A71 neutralizing antibody among healthy people in Binhai New Area of Tianjin,2010-2017

2.3 不同年齡組健康人群EV-A71抗體陽性率

2.3.1 性別 368人中男性178人，EV-A71抗體陽性的為134人，陽性率為75.28%；女性190人，EV-A71抗體陽性的為158人，陽性率為83.16%；經(jīng)χ2檢驗，男、女EV-A71抗體陽性率無統(tǒng)計學(xué)意義，χ2=3.480，P=0.062。

2.3.2年齡 對不同年齡組人群的EV-A71抗體陽性率進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)小于等于5歲的人群抗體陽性率最低為59.26%，隨著年齡的上升，EV-A71抗體陽性率也逐步升高，至大于35歲年齡組EV-A71抗體陽性率略有下降。經(jīng)卡方趨勢檢驗χ2=46.531，P＜0.01，有統(tǒng)計學(xué)意義，見表 1。

對5歲及以下年齡人群EV-A71抗體陽性率進(jìn)行比較，1歲年齡組人群EV-A71抗體陽性率最高，為65.00%，隨后隨著年齡的增加逐漸降低，4歲組EV-A71抗體陽性率最低，為46.67%，至5歲年齡組又略有升高，為55.56%。但對5歲以下各年齡組人群的EV-A71抗體陽性率進(jìn)行χ2檢驗發(fā)現(xiàn)5歲以下各年齡組人群的EV-A71抗體陽性率沒有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=1.481，P=0.830）。

表1 2010-2017年天津市濱海新區(qū)不同年齡組健康人群EV-A71抗體陽性率比較Tab 1 Comparison of the positive rates of EV-A71 neutralizing antibody among different ages of healthy people in Binhai New Area of Tianjin,2010-2017

2.3.3 抗體滴度 對不同年齡EV-A71抗體滴度進(jìn)一步分析，發(fā)現(xiàn)5歲組及以下年齡組、5歲以上至15歲年齡組、15歲以上至25歲年齡組、25歲以上至35歲年齡組和35歲以上年齡組人群不同抗體滴度構(gòu)成比有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=25.310，P＜0.01），結(jié)果顯示不同年齡組人群的EV-A71不同抗體滴度構(gòu)成比有差異。對5個年齡組抗體滴度的構(gòu)成比采用χ2檢驗進(jìn)行兩兩比較，發(fā)現(xiàn)5歲及以下年齡組與5歲以上至15歲年齡組人群的EV-A71抗體滴度構(gòu)成比沒有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=2.523，P=0.773）；與其它 3個年齡組人群的EV-A71抗體滴度構(gòu)成比有統(tǒng)計學(xué)意義 （χ2=32.252，P＜0.01；χ2=32.557，P＜0.01；χ2=36.104，P＜0.01）。5歲以上至15歲年齡組與其它3個年齡組人群的EV-A71抗體滴度構(gòu)成比也有統(tǒng)計學(xué)意義 （χ2=22.365，P＜0.01；χ2=25.544，P＜0.01；χ2=25.255，P＜0.01）。其余年齡組兩兩間比較均無統(tǒng)計學(xué)意義（15歲以上至25歲年齡組與25歲以上至35 歲年齡組 χ2=2.341，P=0.800；15 歲以上至 25 歲年齡組與35歲以上年齡組χ2=2.770，P=0.735；25歲以上至35歲年齡組與35歲以上年齡組χ2=6.153，P=0.292），見圖 2。

圖2 2010-2017年天津市濱海新區(qū)不同年齡組健康人群EV-A71抗體滴度變化情況Fig 2 Change in the titer of EV-A71 nertralizing antibody among different ages of healthy people in Binhai New Area of Tianjin,2010-2017

2.4 影響因素

2.4.1 單因素Logistic回歸分析結(jié)果 本次調(diào)查共涉及8個因素，將所有變量進(jìn)行單因素條件Logistic回歸分析，以α≤0.05初步篩選出與健康人群EVA71抗體陽性率有關(guān)的因素為：接觸過手足口病患者、半年內(nèi)去過醫(yī)院2項，見表2。

表2 天津市濱海新區(qū)健康人群EV-A71抗體陽性率影響因素單因素Logistic回歸分析Tab 2 Univariate Logistic regression analysis of the rate of EV-A71 neutralizing antibody of healthy people in Binhai New Area of Tianjin

2.4.2 多因素的條件Logistic回歸分析結(jié)果 將單因素分析篩選出有意義的變量及被調(diào)查者年齡納入多因素Logistic回歸模型，分析結(jié)果表明年齡越大、半年內(nèi)去過醫(yī)院患病的風(fēng)險增加，見表3。

表3 天津市濱海新區(qū)健康人群EV-A71抗體陽性率影響因素多因素Logistic回歸分析Tab 3 Multivariate Logistic regression analysis of the rate of EVA71 neutralizing antibody of healthy people in Binhai New Area of Tianjin

3 討論

手足口病是腸道病毒引起的全球性傳染病，1980年后我國內(nèi)地出現(xiàn)相關(guān)報道[5]。EV-A71作為手足口病主要病原體之一，是引起重癥及死亡病例的主要病原體，患者、無癥狀帶毒者和隱形感染者均是本病的傳染源。本研究采集了368名健康人群的血清學(xué)標(biāo)本，標(biāo)本覆蓋了嬰幼兒及成人，使用χ2檢驗及Logistic回歸兩種方法對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析。因此比較全面客觀的反應(yīng)EV-A71中和抗體在健康人群中的變化特征。

本次通過對天津市濱海新區(qū)健康人群EV-A71中和抗體連續(xù)8年的橫斷面調(diào)查研究，顯示人群抗體陽性率較高，為79.35%。說明手足口病以隱性感染為主，這與天津市河?xùn)|區(qū)健康人群隱性感染狀況一致[6]，不同年齡組人群血清EV-A71中和抗體陽性率存在統(tǒng)計學(xué)差異，隨著年齡的增長呈上升趨勢[7]，年齡每增加1歲，EV-A71抗體陽性率就增加9.00%。5歲及以下年齡組兒童中和抗體陽性率僅為59.26%，而5歲及以下年齡組人群EV-A71抗體陽性率變化無統(tǒng)計學(xué)意義，提示5歲以下年齡組是EV-A71感染引起手足口病流行的最易感人群，由于該年齡組人群于外界接觸密切，集中在托幼機構(gòu)，可通過日常接觸、玩具和其他教學(xué)用具傳播EV-A71病毒，故該年齡組應(yīng)作為EV-A71防控的重點對象[8]。

從人群血清EV-A71抗體構(gòu)成比來看，不同年齡組人群的EV-A71不同抗體滴度構(gòu)成比有差異（χ2=25.310，P＜0.01）。通過兩兩比較發(fā)現(xiàn) 5 歲及以下年齡組與5歲以上至15歲年齡組人群的EV-A71抗體滴度構(gòu)成比沒有統(tǒng)計學(xué)意義，但兩年齡組人群分別與其它3個年齡組人群的EV-A71抗體滴度構(gòu)成比有統(tǒng)計學(xué)意義。說明15歲及以下年齡組人群的EV-A71抗體滴度保持在1:4水平，而15歲以上年齡組人群的EV-A71抗體滴度保持在1:4、1:16及1:64等3個水平上。滴度≥1 024在各個年齡組人群中均有，提示人們對EV-A71普遍易感[9]。

經(jīng)多因素Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，半年內(nèi)未出入過醫(yī)院人群隱性感染發(fā)生的風(fēng)險小，這可能是由于醫(yī)療機構(gòu)是各種病人聚集的場所，大大增加了直接或間接接觸導(dǎo)致感染的概率。這一研究結(jié)果與天津市健康人群EV-A71抗體動態(tài)變化研究結(jié)果一致[10]。

手足口病是濱海新區(qū)的主要法定傳染病之一，雖然從2017年引進(jìn)了手足口病疫苗，但其為自費疫苗，群眾的接受程度未知，所以作為防控工作者，要開拓思路，對手足口病防控知識的宣傳要做到多角多方面。要多通過電視、廣播、報紙等大眾媒體在人群中普及手足口病防控知識，尤其加強幼兒園老師及家長等重點人群的手足口病相關(guān)知識的普及；加強學(xué)校、托幼機構(gòu)以及醫(yī)療機構(gòu)的聯(lián)合防控，學(xué)校、托幼機構(gòu)應(yīng)多組織手足口病防控知識的講座活動，醫(yī)療機構(gòu)應(yīng)設(shè)立手足口病診療專室或?qū)^(qū)，規(guī)范手足口病患兒的就診流程，一旦發(fā)現(xiàn)手足口病患者，應(yīng)立即轉(zhuǎn)至手足口病專區(qū)進(jìn)行就診，防止院內(nèi)的交叉感染；醫(yī)療機構(gòu)還應(yīng)加強相關(guān)科室醫(yī)務(wù)人員的數(shù)量，加快就診速度，降低就診人員滯留時間，醫(yī)務(wù)人員應(yīng)做到一診一洗手，并加強病區(qū)的消毒工作。

通過本研究，初步掌握了濱海新區(qū)健康人群血清EV-A71抗體分布情況，流行規(guī)律及影響因素等流行病學(xué)特點，為制定手足口病預(yù)防與控制措施，完善EV-A71流行監(jiān)測系統(tǒng)提供了幫助。