李紫燕

（常州市腫瘤醫(yī)院 病理科，江蘇 常州 213000）

0 引言

宮頸癌屬于臨床常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，對(duì)女性生命健康造成嚴(yán)重威脅。宮頸癌和癌前病變與高危型人乳頭瘤病毒（HPV）感染關(guān)系密切[1]。早期檢測(cè)高危型HPV，對(duì)篩查宮頸癌和癌前病灶意義重大。另有研究指出，HPV 持續(xù)性感染會(huì)造成P16 蛋白過(guò)度表達(dá)[2]。本研究選擇2018 年1 月至2019 年3 月在我院經(jīng)第二代雜交捕獲法（HC2）、薄層液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)（TCT）聯(lián)合檢測(cè)確診的135 例HPV 陽(yáng)性患者，旨在分析HPV 陽(yáng)性患者行宮頸活檢及免疫組化P16 蛋白檢測(cè)的臨床意義，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018 年1 月至2019 年3 月在我院行常規(guī)子宮頸活檢的135 例高危型HPV 陽(yáng)性患者為研究對(duì)象，均經(jīng)HC2、TCT 聯(lián)合檢測(cè)確診；其中年齡20-78 歲，平均（45.31±2.25）歲。免疫組化及病理切片均由兩位高年資醫(yī)師聯(lián)合診斷。入組患者均簽署知情同意書(shū)。本研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 宮頸細(xì)胞學(xué)

使用TCT 實(shí)施宮頸細(xì)胞學(xué)檢查，用TBS 分類(lèi)法診斷。分為未明確診斷意義的不典型鱗狀上皮細(xì)胞（ASU）、無(wú)宮頸上皮內(nèi)病變（NILM）、高度鱗狀上皮病變（HSIL）、低度鱗狀上皮細(xì)胞病變（LSIL）。

1.2.2 高危型HPV 檢測(cè)

使用專(zhuān)用細(xì)胞采集器采集標(biāo)本，HC2 法定量檢測(cè)HPV68、59、58、56、52、51、45、39、35、33、31、18 型等13 種HPV-DNA 含量。使用美國(guó)Digene公司HC2 基因雜交捕獲儀與HPV DNA 高危型檢測(cè)試劑盒。結(jié)果判斷：HPV-DNA＜1.0 pg/mL 為陰性，反之為陽(yáng)性。

1.2.3 免疫組織化學(xué)

使用Max Vision 法對(duì)P16 蛋白檢測(cè)。經(jīng)4 %甲醛溶液固定標(biāo)本，常規(guī)石蠟包埋，4 μm 切片備用。嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行染色操作。試劑盒與抗體均購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)有限公司。P16 表達(dá)定位于細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核，≥90%的上皮細(xì)胞彌漫表達(dá)為（+++），10-90 %的上皮細(xì)胞表達(dá)為（++），經(jīng)副基底層、基底層有少量散在細(xì)胞P16 陽(yáng)性為（+），鱗狀上皮無(wú)表達(dá)（-）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS 21.0 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，卡方（χ2）檢驗(yàn)，計(jì)量資料用(±s)表示，t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 宮頸細(xì)胞學(xué)與宮頸活檢

宮頸細(xì)胞學(xué)：135 例患者經(jīng)檢測(cè)HSIL 27 例，LSIL 46 例，ASU 19 例，NILM 43 例。宮頸活檢：高級(jí)別上皮病變者33 例，低級(jí)別上皮病變者59 例，炎癥/萎縮43 例。TCT 檢查NILM 中經(jīng)病理活檢有5例為陽(yáng)性，漏診率為11.63%，見(jiàn)表1。

表1 宮頸細(xì)胞學(xué)與宮頸活檢對(duì)比

2.2 P16 蛋白表達(dá)

高級(jí)別上皮病變中P16 蛋白層彌漫陽(yáng)性，低級(jí)別上皮病變中大部分患者P16 呈局灶性陽(yáng)性，陽(yáng)性細(xì)胞占據(jù)鱗狀上皮的下1/3；炎癥/萎縮中多無(wú)P16 蛋白表達(dá)。P16 蛋白在高級(jí)別上皮病變、低級(jí)別上皮病變、炎癥/萎縮陽(yáng)性表達(dá)率分別為100.00 %（33/33）、83.05 %（49/59）、34.88 %（15/43），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=45.653，P=0.000），見(jiàn)表2，圖1-3。

表2 P16 蛋白在宮頸活檢中的表達(dá)

圖1

圖2

圖3 高級(jí)別上皮病變P16 蛋白表達(dá)（HE×100）

3 討論

女性生殖系統(tǒng)HPV 感染極為常見(jiàn)，感染后8-10個(gè)月多數(shù)患者癥狀可自行消除，僅有5 %-10 % 患者存在持續(xù)感染，并發(fā)展為宮頸癌高危人群[3-4]。HPV 是宮頸癌的重要病因，而高危型HPV 感染是宮頸癌發(fā)生的必要條件。我國(guó)宮頸癌的普查率相對(duì)較低，尚無(wú)成熟的篩查模式。早期發(fā)現(xiàn)高危型HPV感染，盡早實(shí)施正確有效的干預(yù)措施治療，預(yù)防宮頸癌的發(fā)生。

高危型HPV 檢測(cè)與宮頸細(xì)胞學(xué)檢查是臨床用于宮頸病變篩查的常用手段，可有效確定高風(fēng)險(xiǎn)人群，提高診斷準(zhǔn)確率，但細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果易受到檢測(cè)醫(yī)生的主觀影響，重復(fù)性欠佳。本研究中，TCT 檢查NILM 中經(jīng)病理活檢有5 例為陽(yáng)性，漏診率為11.63 %，提示針對(duì)TCT 和HPV 陽(yáng)性者，應(yīng)及時(shí)實(shí)施宮頸活檢檢查確診，降低漏診率。p16 基因位于人類(lèi)染色體9P21，屬于抑癌基因，對(duì)有絲分裂具有負(fù)反饋調(diào)節(jié)作用。在正常組織和HR-HPV 陰性的宮頸癌中無(wú)p16 陽(yáng)性表達(dá)，但p16 陽(yáng)性表達(dá)在宮頸癌前病變和HR-HPV 陽(yáng)性的宮頸癌中較高[5]。相關(guān)研究顯示[6]，多種腫瘤的發(fā)生、進(jìn)展與P16 蛋白異常甲基化密切相關(guān)。P16 蛋白于宮頸組織中強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，提示宿主細(xì)胞中的HPV進(jìn)行整合。P16 蛋白與HR-HPV 聯(lián)合檢測(cè)，可有效分流TCT 中ASUS 患者。本研究結(jié)果顯示，P16 蛋白在高級(jí)別上皮病變、低級(jí)別上皮病變、炎癥/萎縮陽(yáng)性表達(dá)率分別為100.00 %、83.05 %、34.88 %，隨著病變級(jí)別的進(jìn)展P16 蛋白表達(dá)逐漸升高。高級(jí)別上皮病變、低級(jí)別上皮病變、炎癥/萎縮中P16 蛋白分別呈彌漫陽(yáng)性、局灶性陽(yáng)性、無(wú)表達(dá)，提示檢測(cè)P16 蛋白表達(dá)情況，利于臨床鑒別炎癥/萎縮、宮頸上皮病變。

綜上所述，對(duì)HC2 篩查高危型HPV 陽(yáng)性患者應(yīng)及時(shí)實(shí)施病理活檢聯(lián)合免疫組化P16 蛋白檢測(cè)，降低誤診或漏診率，利于臨床早期實(shí)施干預(yù)措施，改善患者預(yù)后。