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菌落總數(shù)測量不確定度評定及對生產(chǎn)過程的指導

2019-11-29 02:43:02徐騰月
質量安全與檢驗檢測 2019年5期
關鍵詞:干糧總數(shù)菌落

徐騰月

(中國人民解放軍食品檢測試驗中心 北京 101301)

1 前言

菌落總數(shù)可反映被檢樣品在生產(chǎn)、加工及銷售過程中是否符合衛(wèi)生要求,可為被檢樣品的衛(wèi)生學評價提供依據(jù)[1],是壓縮干糧評價的重要微生物指標。本文依據(jù)GB 4789.2—2016《食品微生物學檢驗菌落總數(shù)測定》[2]和JJF 1059.1—2012《測量不確定度評定與表示》[3]對菌落總數(shù)進行了不確定度評定。在實際檢測過程中,檢測結果部分合格,有些在限量標準附近,這時僅依靠檢驗結果就直接進行判定是不合理的[4]。測量不確定度是對測量結果質量的定量表征,很大程度上決定了測量結果的可用性。在ISO/IEC17025《校準和檢測實驗室能力的通用要求》[5]中明確指出,檢測實驗室在必要時需對測量不確定度予以說明,如測定結果在限量值附近時,就要對測量結果進行不確定度的評定[6,7]。國內外研究表明,相關學者大多只是進行不確定度的評定研究,對于測量不確定度在生產(chǎn)過程的指導意義研究較少[8]。

2 材料與方法

2.1 材料與試劑

樣品:同一批次壓縮干糧(食品車間);培養(yǎng)基和試劑:平板計數(shù)瓊脂(PCA)(北京陸橋技術有限責任公司)、氯化鈉(北京化工廠)。

2.2 儀器與設備

LDZX-75KBS 立式壓力蒸汽滅菌器(上海申安醫(yī)療器械廠);BSC-1500ⅡA2-X 生物安全柜(濟南鑫貝西生物技術有限公司);400VW 均質器(interscience);LRH-250 生化培養(yǎng)箱(上海一恒科技有限公司);菌落計數(shù)器;DK-98-Ⅱ-A 水浴鍋(天津市泰斯特儀器有限公司)。

2.3 方法

2.3.1 壓縮干糧中菌落總數(shù)的測定

依據(jù)GB 4789.2—2016 進行檢驗。操作步驟如下:稱取樣品;10 倍系列稀釋;選取3 個適宜稀釋倍數(shù)的稀釋液,各取1 mL 分別加入無菌培養(yǎng)皿內,同時做空白對照;加入適量的15~20 mL 平板計數(shù)瓊脂,混勻;放置于(36±1)℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(48±2)h;培養(yǎng)完成后取出,用肉眼觀察,記錄同一稀釋度中各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)量;進行菌落總數(shù)的報告[9]。

2.3.2 不確定度來源

微生物測試的主要影響因素包括:取樣、樣品量、樣品種類、目標微生物在樣品中的分布、樣品中含有微生物數(shù)量、樣品的穩(wěn)定性、稀釋倍數(shù)、讀數(shù)、重復測試等。本文樣品是單一樣品,且由同一人員操作完成,故不確定度來源主要是樣品的稱量過程、稀釋過程及菌落計數(shù)過程。在微生物檢測過程中,B 類不確定度貢獻較小,而重復測量帶來的不確定度占主要部分,故采用A 類不確定度進行評定。

2.3.3 不確定度分析

建立數(shù)學模型:

其中,X—菌落總數(shù);Y—實驗結果。

3 結果與分析

本次實驗由同一人員在一定時間內對同一批次的樣品做了15 次平行測定,得到的菌落總數(shù)測定結果詳見表1。本次實驗空白對照無菌落生長。

表1 壓縮干糧菌落總數(shù)15 次重復測量結果

具體計算過程如下:

(1)列出測量結果xi。

(2)取對數(shù)lgxi,得到對數(shù)lgxi的平均值為:

(3)求殘差lgxi-lg。

(4)求殘差的平方(lgxi-lg)2,得到殘差平方和為

(5)合成標準不確定度:

測量結果為15 次重復測量的平均值,故平均值的標準不確定度為

(6)擴展不確定度:

由于置信概率p=95%,自由度ν=15-1=14,由t分布表可得k=2.145。

于是U95=k×u(lg)=2.145×0.062 89=0.134 9。

(7)取反對數(shù),由lgx坐標回到x坐標:

由于lg 與x之間的非線性關系,不能直接求擴展不確定度U的反對數(shù)。因此,首先確定lgx的取值范圍為:lgx=3.481 9±0.134 9,或寫成

取反對數(shù)后可得2 200≤x≤4 100。

4 結論

(1)本次實驗的樣品是均一的、穩(wěn)定的;(2)若本次實驗的空白對照有菌落生長,說明實驗室潔凈度不符合要求,實驗結果無效,需重新進行檢測;(3)該批壓縮干糧菌落總數(shù)測量不確定度為2200~4100CFU/g,p=95%。GB/T 20980—2007《壓縮餅干》[10]中規(guī)定的壓縮干糧菌落總數(shù)限量標準為≤2000 CFU/g,依據(jù)《聲明檢測或校準結果及與規(guī)范符合性的指南》,該批壓縮干糧不符合規(guī)范要求;(4)若在本批產(chǎn)品中只進行常規(guī)檢測,而不進行測量不確定度的評定,會得到不同的結果。例如,x4(1 300 CFU/g)檢測結果表明產(chǎn)品是合格的,x15(2 000 CFU/g)檢測結果等于限量值,而x5(9 400 CFU/g)是不合格的。

5 指導意義

通過15 次重復檢測可以看出,同一批次壓縮干糧菌落總數(shù)檢測結果并不穩(wěn)定,表明生產(chǎn)過程的穩(wěn)定性較差。食品生產(chǎn)企業(yè)可以對造成生產(chǎn)過程不穩(wěn)定的原因進行分析。另外,通過菌落總數(shù)測量不確定度的評定顯示產(chǎn)品的菌落總數(shù)不符合產(chǎn)品規(guī)范要求,菌落總數(shù)超標。菌落總數(shù)超標主要是生產(chǎn)工藝中的衛(wèi)生問題和包裝過程中的污染問題造成的。食品生產(chǎn)企業(yè)可以根據(jù)生產(chǎn)工藝的關鍵控制點進行監(jiān)控,查找產(chǎn)品生產(chǎn)期間未嚴格按照工廠衛(wèi)生標準操作程序(SSOP)的操作,對不規(guī)范的操作進行糾正指導,再對生產(chǎn)出的產(chǎn)品進行檢測,觀察問題是否得到解決。造成菌落總數(shù)不穩(wěn)定的主要原因是設備設施不穩(wěn)定,應對導致菌落總數(shù)升高的設備進行排查,找出影響設備,定期對設備設施進行維護保養(yǎng)清潔消毒,保證其完好性和穩(wěn)定性。

生產(chǎn)企業(yè)應通過理解并運用不確定度,規(guī)范食品生產(chǎn)過程,找出影響產(chǎn)品衛(wèi)生的關鍵環(huán)節(jié),通過對生產(chǎn)過程進行控制,提高產(chǎn)品質量。

6 結語

菌落總數(shù)測量不確定度評定可使檢測結果更加接近真實值,可用于評價實驗室的測量能力,且提高了人們利用檢測結果判定產(chǎn)品合格與否的準確率,可為食品生產(chǎn)企業(yè)發(fā)現(xiàn)其食品生產(chǎn)問題提供參考。

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