杜忠偉 胡志強(qiáng) 亢學(xué)平 李 建 王 旭 王 鑫
(延邊朝鮮族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院,吉林 延邊 133000)
樺剝管菌[Piptoporus betulinus(Bull.ex Fr.)Karst.]又名樺孔菌、樺滴孔菌、樺多孔菌,市場(chǎng)流通名為“白靈芝”。隸屬于真菌界(Fungi)、擔(dān)子菌亞門(Basidiomycota)、層菌綱(Hymenomycetes)、非褶菌目(Polyporales)、多孔菌科(Polyporaceae)、剝管菌屬(Piptoporus)。該菌生于樺樹(shù)的樹(shù)干或倒木上,主要分布在我國(guó)黑龍江、吉林、遼寧、內(nèi)蒙古、甘肅、四川、云南、貴州、新疆、西藏、河南、陜西、福建、安徽、湖南等地[1,2]。
子實(shí)體中等至較大,無(wú)柄或幾乎無(wú)柄。菌蓋扁平,扁半球形,近肉質(zhì)至革質(zhì),靠基部著生部分常凸起,大小 4~24×5~35(cm),厚 1.5~9.0 cm,表面光滑,初期乳白色,后呈褐色,有一層薄表皮,可剝離露出白色菌肉,邊緣內(nèi)卷[3]。樺剝管菌是一種木材褐腐真菌,可分泌纖維素和半纖維素酶,能高效分解纖維素。嫩時(shí)可食用,子實(shí)體可分離多孔菌酸、蹄菌酸等多種藥用物質(zhì),有抑制分枝桿菌、抵抗化膿小球菌生長(zhǎng)、抑制小白鼠肉瘤、抵抗小白鼠及猴子的脊髓灰質(zhì)炎等作用[4,5]。
目前我國(guó)未見(jiàn)有人工栽培的報(bào)道,而野生的樺剝管菌在民間已有很長(zhǎng)的食用和藥用歷史,作為一種藥用大型真菌應(yīng)該得到重視與開(kāi)發(fā)。因此,我們對(duì)采集的野生樺剝管菌進(jìn)行人工馴化栽培試驗(yàn),以期為開(kāi)發(fā)應(yīng)用研究提供基礎(chǔ)資料。
采集自長(zhǎng)白山地區(qū)樺樹(shù)林中的野生大型真菌,經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定,確定為樺剝管菌(P.betulinus)。對(duì)子實(shí)體進(jìn)行組織分離獲得菌種,編號(hào)為YBHB-1,保存于延邊農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所。
PDA培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g/L,葡萄糖20 g/L,瓊脂粉20 g/L,蒸餾水定容至1 L,pH自然。采用20×200(mm)的玻璃試管,接種后放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),觀察記錄菌絲的定植時(shí)間、長(zhǎng)勢(shì)、顏色、滿管時(shí)間。
按照玉米粒80%、木屑10%、麩皮8%、石膏1%、白灰1%的培養(yǎng)基混合配制,含水量60%。選用750 mL專用菌種瓶裝料,接種后放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),觀察記錄菌絲的定植時(shí)間、長(zhǎng)勢(shì)、顏色及滿瓶時(shí)間。
培養(yǎng)料配方:樺樹(shù)木屑76%,麥麩20%,黃豆粉2%,白灰1%,石膏1%,含水量60%~65%。采用15×30×0.06(cm)規(guī)格的聚丙烯塑料袋裝料,每袋裝濕料重1.25 kg。裝好后放入高壓滅菌鍋,121℃滅菌2 h,冷卻至30℃以下,轉(zhuǎn)移至接種室接種。接種后置于25℃培養(yǎng)室,前期避光培養(yǎng),后期給予適當(dāng)?shù)纳⑸涔獯龠M(jìn)原基形成,觀察記錄菌絲長(zhǎng)滿袋時(shí)間和原基形成時(shí)間。
形成原基后轉(zhuǎn)移至出菇實(shí)驗(yàn)室,根據(jù)其原始生長(zhǎng)環(huán)境特點(diǎn),保持生長(zhǎng)溫度不高于25℃,相對(duì)空氣濕度為80%~85%,保持散射光照,通風(fēng)良好,促進(jìn)子實(shí)體生長(zhǎng)。觀察記錄子實(shí)體的形態(tài)特征。
通過(guò)對(duì)樺剝管菌母種、原種及栽培種的培養(yǎng)發(fā)現(xiàn),其菌絲在PDA培養(yǎng)基中生長(zhǎng)速度快,且菌絲潔白、粗壯,少有氣生菌絲產(chǎn)生。原種接種后第2天開(kāi)始萌發(fā)吃料,經(jīng)過(guò)15天左右菌絲基本長(zhǎng)滿原種瓶,18天完全長(zhǎng)滿瓶。栽培種接種后3天菌絲萌發(fā),35~40天菌絲長(zhǎng)滿袋,此時(shí)菌袋表面菌絲不濃密但粗壯,部分菌包會(huì)吐水,有異味,菌包不緊實(shí),隨著光照的刺激會(huì)在菌包表面長(zhǎng)出圓球狀的原基(表1)。
出菇情況詳見(jiàn)圖1。原基形成后進(jìn)行開(kāi)口出菇,選擇在長(zhǎng)出原基的部位劃口,不要?jiǎng)潅?。?jīng)過(guò)15天左右培養(yǎng),原基分化形成半圓形子實(shí)體。通過(guò)比較形態(tài)特征,發(fā)現(xiàn)其與野生的相似,子實(shí)體半圓形,初期顏色潔白,后期在菌蓋表面產(chǎn)生深棕色色素,使菌蓋表面形成深棕色菌皮。菌柄短小,待菌蓋完全形成后測(cè)量子實(shí)體大小為8~10×5~8(cm),厚度1~3 cm。采收成熟子實(shí)體,經(jīng)烘干后菌蓋表面出現(xiàn)裂紋,稱重為9~20 g/個(gè)。
圖1 樺剝管菌子實(shí)體形態(tài)特征
對(duì)采自長(zhǎng)白山地區(qū)的野生樺剝管菌菌株YBHB-1進(jìn)行馴化栽培試驗(yàn),根據(jù)原生環(huán)境,選用樺木屑作為主要栽培原料,成功獲得栽培子實(shí)體。研究發(fā)現(xiàn),其菌絲在PDA母種培養(yǎng)基和玉米粒為主的原種培養(yǎng)基中生長(zhǎng)快速,在以樺木屑為主的栽培種培養(yǎng)料中生長(zhǎng)正常。菌絲長(zhǎng)滿菌袋后,表現(xiàn)菌絲不濃密,菌袋不緊實(shí),易產(chǎn)生黃水,能使木屑培養(yǎng)基腐爛,產(chǎn)生異味。后期在菌袋表面形成圓球狀原基。出菇培養(yǎng)期間發(fā)現(xiàn),該菌子實(shí)體生長(zhǎng)階段需要充足的氧氣,在18~25℃下均能形成子實(shí)體。
劉欣等的研究表明,樺剝管菌對(duì)白樺木材具有較強(qiáng)的降解能力,且其腐朽后的木材呈紅褐色,易粉碎[6]。李翠珍等研究表明,樺剝管菌是一種典型的褐腐菌,可分泌纖維素和半纖維素酶,分解木材中的纖維素和半纖維素[7]。根據(jù)本研究結(jié)果,它是一種分解能力較強(qiáng)的木腐菌。
2016 年,Ma?gorzata Pleszczyńska等報(bào)道,樺剝管菌人工栽培獲得成功,并證實(shí)人工栽培的子實(shí)體與野生的具有相當(dāng)?shù)目拱┨匦訹8]。樺剝管菌作為一種藥用真菌,國(guó)內(nèi)研究主要集中在木材的降解機(jī)理、藥用價(jià)值及有機(jī)污染物降解作用等方面[9,10],未見(jiàn)對(duì)其栽培特性的研究報(bào)道。我們利用菌株YBHB-1進(jìn)行栽培試驗(yàn),成功獲得子實(shí)體,為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用樺剝管菌提供了基礎(chǔ)資料。未來(lái)將探索研究其最佳生長(zhǎng)條件和規(guī)?;a(chǎn),使之成為一種能廣泛開(kāi)發(fā)應(yīng)用的藥用真菌。