劉彬　毛林夏　李昱賢　李恒

摘 要 在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，農(nóng)藥的廣泛使用已成為發(fā)展中國家的一種常見做法，而這些有害農(nóng)藥在水果和蔬菜中會有一定殘留?；诖?，根據(jù)改良的QuEChERS方法從紅河地區(qū)水果和蔬菜中提取農(nóng)藥殘留物，使用氣相色譜儀分析其中的主要農(nóng)藥殘留物。結(jié)果顯示，紅河地區(qū)不同區(qū)域含有的農(nóng)藥殘留濃度不同，整體來說，氯吡硫磷的殘留較為嚴重。但根據(jù)健康風險評估計算，監(jiān)測區(qū)域農(nóng)藥殘留均未超過規(guī)定范圍，表明紅河地區(qū)農(nóng)殘管理制度較為完善。

關(guān)鍵詞 農(nóng)藥殘留;氣相色譜;有機磷酸酯類;QuEChERS方法;健康風險評估

中圖分類號：F302.1 文獻標志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2019.24.063

農(nóng)藥是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的重要投入，可有效提高農(nóng)業(yè)產(chǎn)量。目前，中國大量使用了各種類型的農(nóng)藥，包括有機氯、有機磷、氨基甲酸酯、鄰苯二甲酰亞胺以及擬除蟲菊酯等，用于預防水果和蔬菜中的害蟲[1]。通過皮膚和口服攝入這些有毒化學物質(zhì)可能會導致嚴重的急性和慢性疾病，如免疫抑制，激素紊亂，生殖缺陷和癌癥等[2]。

殺蟲劑（包括有機磷和擬除蟲菊酯）和殺菌劑（包括三唑和氯腈）常用于發(fā)展中國家，用于病蟲害防治和病媒根除。由于農(nóng)民使用農(nóng)藥的方法不當，且經(jīng)常使用毒性較大的農(nóng)藥，而相關(guān)部門對這些化學品的管理和監(jiān)管不力，導致發(fā)展中國家農(nóng)藥中毒的發(fā)生情況遠遠大于發(fā)達國家[3]。此外，由于市場對農(nóng)產(chǎn)品的高需求以及對食品中農(nóng)藥殘留的毒性影響認識不足，一些農(nóng)民在水果蔬菜收獲前噴灑農(nóng)藥，導致農(nóng)藥殘留更為嚴重[4]。因此，必須進行風險評估，以確定食物中農(nóng)藥殘留攝入量對人體健康的影響。

云南紅河地區(qū)是云南重要的果蔬生產(chǎn)地區(qū)。因此，有必要評估這些直接用于食用的食品中的農(nóng)藥殘留情況。基于此，分析紅河地區(qū)水果和蔬菜中常用的6種有機磷農(nóng)藥（敵敵畏、樂果、甲基對硫磷、毒死蜱、馬拉硫磷和殺樸磷）殘留情況，并檢查其是否符合現(xiàn)行法規(guī)，對該地區(qū)水果蔬菜中農(nóng)藥殘留所帶來的健康風險進行評估。

1 材料與方法

1.1 研究區(qū)域

研究區(qū)為位于云南紅河地區(qū)的蒙自縣、彌勒縣和石屏縣，是云南重要的果蔬生產(chǎn)地區(qū)，具體位置如圖1所示。

云南省紅河哈尼族彝族自治州水果種植面積近10萬公頃，產(chǎn)量約100萬噸，產(chǎn)量和品質(zhì)居云南省第一;蔬菜種植面積6.67萬公頃，產(chǎn)量100余萬噸，是云南省重要的生產(chǎn)基地。其中蒙自縣水果種植面積2.3萬公頃，蔬菜種植面積1.0萬公頃;彌勒縣蔬菜種植面積1.72萬公頃，水果種植面積1.80萬公頃;石屏縣蔬菜種植面積1.00萬公頃，水果種植面積1.53萬公頃。

1.2 樣品采集

樣品采集以《農(nóng)藥殘留檢測方法國家標準編制指南》為依據(jù)進行。從研究區(qū)的三個區(qū)域（蒙自縣、彌勒縣和石屏縣）收集水果和蔬菜樣品，用于分析農(nóng)藥殘留。將樣品收集在滅菌塑料袋中并在24 h內(nèi)送至實驗室，儲存在4 ℃的冰箱中直至檢測分析。

1.3 試劑與儀器

農(nóng)藥標準品敵敵畏、樂果、甲基對硫磷、毒死蜱、馬拉硫磷和殺樸磷，均購自德國默克，純度為99.9%;分析純甲醇，分析純乙腈，優(yōu)級純無水硫酸鎂，優(yōu)級純氯化鈉。

氣相色譜儀（島津Nexis GC-2030）;臺式冷凍離心機（Thermo Fisher）。

1.4 樣品制備

利用甲醇適當稀釋農(nóng)藥標準品，制備不同濃度的標準工作溶液，并儲存在4 ℃冰箱里。要求使用的玻璃器皿沒有受到任何化學污染。

采用改良的QuEChERS方法用于樣品制備和農(nóng)藥提取。QuEChERS方法被推薦用于含水量為75%的基質(zhì)。根據(jù)該方法，手動搖動10 g在50 mL特氟隆離心管中具有10 mL乙腈的研磨復合樣品，然后在渦旋振蕩器中使樣品混合均勻。向混合物中加入5 mL水、4 g無水MgSO4和1 g NaCl，劇烈振蕩1 min。再次將混合物在渦旋振蕩器中勻漿1 min，并以3 000 rpm離心5 min。將5 mL上清液轉(zhuǎn)移至15 mL特氟隆離心管中，該離心管含有750 mg無水MgSO4，125 mg伯仲胺（PSA）和C18吸附劑的混合物。手動搖動混合物，然后在渦旋振蕩器中均化1 min，并以3 000 rpm離心5 min。使用0.068 947 6 MPa壓力的N2氣體在30 ℃下在Turbo Vap蒸發(fā)器中蒸發(fā)2 mL，提取樣品的一部分，使用正己烷重構(gòu)殘基用于GC 中的分析。

1.5 GC中的農(nóng)藥殘留分析

氣相色譜具有高分辨率，檢測器具有可選擇性，是農(nóng)藥分析中使用較為廣泛的技術(shù)。注入樣品（1 uL）并通過氣相色譜（GC 2030）和選擇性電子捕獲檢測器（ECD）分析農(nóng)藥的存在，即使在痕量濃度下也能檢測污染物。在DB-1701毛細管柱（30 m，0.25 mm內(nèi)徑和0.25 μm的薄膜厚度）上分離化合物，使用超純化的氮氣作為載氣，注射器溫度設(shè)定為250 ℃，柱箱溫度最初設(shè)定為90 ℃并保持2 min，按每分鐘8 ℃速度升至250 ℃，然后保持12 min，檢測器溫度設(shè)定為240 ℃。將峰面積與校準標準物的峰面積進行比較，以定量測定殘留物。每種農(nóng)藥的方法檢出限（DL）為0.01 mg kg-1，在GC的工作條件下，使用3∶1的信噪比重復測量低濃度樣品，以計算檢出限。

1.6 質(zhì)量控制和量化

將由儲備溶液制成的已知濃度的標準農(nóng)藥的混合物自動注入儀器中。使用六種不同濃度的農(nóng)藥標準品校準儀器，每種濃度范圍為0.000 3～0.100 0 g·mL-1，線性校準曲線的R2值在0.98～0.99變化。濃度為0.03 g·mL-1的標準農(nóng)藥的總離子色譜圖如圖2所示。

對空白樣品進行強化農(nóng)藥標準品的回收實驗，以保證檢測的準確性。再制備濃度為0.15 mg·kg-1和0.01 mg·kg-1農(nóng)藥標準品的加標樣品，采用3∶1和10∶1的信噪比（S/N）分別確定定量限（LOQ）和檢測限（LOD）。LOQ、LOD、回收率和相對標準偏差（RSD）顯示，LOD范圍為0.0011～0.0120 g·kg-1，LOQ范圍為0.0012～0.0350 g·kg-1，加標樣品的回收率為94%～99%，表明農(nóng)藥提取的方法具有精確度和可重復性。RSD的范圍為3.3%～8.1%，利用其校正數(shù)據(jù)，分析試劑的空白并確定干擾物質(zhì)。

根據(jù)糧農(nóng)組織/世衛(wèi)組織（1997）的建議，使用以下公式確定每種殺蟲劑的估計日攝入量（EDI）。

EDI_pi=C_pi×FER/BW

其中EDIpi為估計日農(nóng)藥攝入量（p），Cpi為農(nóng)藥平均殘留濃度，F(xiàn)ER為食物攝取率，BW為人體體重。食物攝取率數(shù)據(jù)由國家估算每日攝入量來計算，兒童和成人的體重分別假設(shè)為10 kg和60 kg。健康危害指數(shù)預測是食用化學殘留物污染的食品所造成的長期健康危害風險。如下列公式所示，其表示為估計日攝入量（EDI）與可接受日攝入量（ADI）的比值。本研究采用FAO/WHO（2017）所示的農(nóng)藥日攝入量。

HHI_pi=EDI_pi/ADI_pi

其中HHIpi為健康危害指數(shù)，EDI_pi為估計日攝入量，ADI_pi為可接受的第i類農(nóng)藥殘留日攝入量。

2 結(jié)果與分析

2.1 水果和蔬菜中的農(nóng)藥殘留

蒙自縣，彌勒縣和石屏縣的梨、葡萄、西蘭花、卷心菜的敵敵畏、樂果、甲基對硫磷、毒死蜱、馬拉硫磷和殺樸磷的殘留量檢測結(jié)果如表1所示。可以看出，所有樣品中，只有毒死蜱和樂果被檢出，其他農(nóng)藥均為未檢出狀態(tài)，說明試驗地區(qū)毒死蜱、樂果農(nóng)藥用量較多，其中葡萄中的毒死蜱含量分別為蒙自縣0.011±0.005 mg·kg-1，石屏縣0.011±0.003 mg·kg-1;梨中的毒死蜱含量為蒙自縣0.017±0.007 mg·kg-1。西蘭花中的毒死蜱含量分別為蒙自縣0.015±0.003 mg·kg-1;西蘭花中樂果含量為石屏縣0.046±0.003 mg·kg-1;卷心菜中毒死蜱含量為蒙自縣0.012±0.006 mg·kg-1;毒死蜱是樣品中最常檢測到的殺蟲劑，其較高的濃度可能是由于其在食物基質(zhì)中持續(xù)存在和積累。

2.2 健康風險評估

我國估算每日攝入量中蔬菜為285.5 g，水果為49.5 g。

根據(jù)檢測結(jié)果計算農(nóng)藥殘留的平均濃度，進而進行健康風險評估。由于只有毒死蜱和樂果被檢出，因此分析這兩種農(nóng)藥的健康風險，表2、表3顯示了水果和蔬菜中存在的農(nóng)藥殘留相關(guān)的預計健康風險。在2種農(nóng)藥中，兒童和成人的健康指數(shù)都為合格，表明了紅河地區(qū)農(nóng)殘管理制度較為完善。

3 結(jié)論

本研究表明，紅河地區(qū)蒙自縣、彌勒縣和石屏縣的水果和蔬菜敵敵畏、樂果、甲基對硫磷、毒死蜱、馬拉硫磷和殺樸磷6種農(nóng)藥的殘留量均在正常的范圍內(nèi)，兒童和成人的健康指數(shù)都為合格，說明紅河地區(qū)農(nóng)藥監(jiān)管制度較為完善。

參考文獻：

[1] 張一賓.農(nóng)藥劑型的設(shè)計和新劑型的開發(fā)[J].世界農(nóng)藥，2016，38（3）：9-13.

[2] 張超.我國農(nóng)民的農(nóng)藥施用行為及其健康影響與干預效果研究[D].北京：北京理工大學，2016.

[3] Steven M Edworthy，汪鶯昱.發(fā)展中國家的遠程醫(yī)療──其影響超過發(fā)達國家[J].英國醫(yī)學雜志（中文版），2002（3）：121-122.

[4] 張紅霞.食品農(nóng)藥殘留檢測中樣品前處理技術(shù)研究進展[J].農(nóng)業(yè)開發(fā)與裝備，2018（10）：70-71.

（責任編輯：趙中正）