魏來

胸腹腔積液在臨床中較為常見,可以由炎癥、腫瘤等多種因素導致。臨床導致胸腹腔積液的疾病眾多,發(fā)病機制各異。胸腹腔積液的檢查對于良性、惡性疾病的診斷治療具有十分重要的意義［1］。臨床明確胸腹腔積液性質(zhì)對于疾病治療具有較大影響,因此需要引起足夠重視［2］。胸腹水脫落細胞學檢查雖然是臨床重要的診斷方法,但無法提供準確的病理診斷。近年來,臨床常利用胸腹水細胞塊切片結合免疫組化技術提高診斷準確性,進而有效評估疾病嚴重程度。本研究選擇本院2019年1～12月收治的250份臨床送檢胸腹水標本,對標本進行細胞塊切片結合免疫組化和HE染色檢查,探討臨床病理診斷中的胸腹水細胞塊切片結合免疫組化的應用,報告如下。

1 材料與方法

1.1材料來源 納入本院2019年1～12月收治的250份臨床送檢的胸腹水標本,標本對應患者中男142例,女108例；年齡37～79歲,平均年齡(56.2±7.6)歲。

1.2納入及排除標準 納入標準：①患者臨床上因各種原因?qū)е滦馗骨环e液需要進行胸腹水檢查,病歷完整；②患者簽署本研究知情同意書。排除標準：①合并嚴重精神障礙性疾病的患者；②妊娠期或哺乳期女性患者；③合并嚴重心肺功能障礙的患者。

1.3方法 對納入的所有胸腹水標本進行液基細胞學檢查,將檢查結果中疑似存在腫瘤細胞的50份標本進行細胞塊以及切片制作,對切片進行HE常規(guī)染色、細胞塊切片結合免疫組化染色。

細胞沉渣切片制作方法為將疑似惡性胸腹腔積液的標本裝于離心管中差速離心10 min并用吸管吸取上清液。在離心管加入20 ml的10% 中性福爾馬林并使用震蕩儀震蕩后再次離心10 min,棄去上清液將沉淀物用鑷子取出,使用擦鏡紙將沉淀物包裝,隨后進行透明、脫水、浸蠟、包埋、切片、染色等操作。對于血性成分較多的胸腹水標本可以加入20 ml 乙醇與冰醋酸的混合液充分混合再進行離心。

細胞塊切片結合免疫組化染色嚴格按照試劑說明書的相關規(guī)定進行,檢測CK7、CEA、Calretinin、WT-1等相關分子的表達。

1.4觀察指標 觀察分析標本病理結果；對比兩種方法檢測陽性率；并比較腺癌和惡性間皮瘤CK7、CEA、Calretinin、WT-1抗體表達陽性情況。

1.5統(tǒng)計學方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行處理。計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1標本病理結果分析 250份臨床送檢的胸腹水標本,其中50份疑似腫瘤性胸腹腔積液標本,包括27份腺癌,8份鱗狀細胞癌,5份小細胞癌,4份反應性間皮細胞,6份惡性間皮瘤。

2.2兩種方法檢測陽性率比較 細胞塊切片結合免疫組化檢測的陽性率為100.00%(50/50),高于HE染色檢測的68.00%(34/50),差異有統(tǒng)計學意義(χ2=19.05,P＜0.05)。

2.3腺癌和惡性間皮瘤CK7、CEA、Calretinin、WT-1抗體表達陽性情況比較 腺癌和惡性間皮瘤的WT-1抗體表達陽性率比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；腺癌的CK7、CEA抗體表達陽性率高于惡性間皮瘤,Calretinin抗體表達陽性率低于惡性間皮瘤,差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 腺癌和惡性間皮瘤CK7、CEA、Calretinin、WT-1抗體陽性表達情況比較［n(%)］

3 討論

胸腹腔積液是有多種疾病導致的胸部、腹部液體滲出并在局部腔隙中聚集導致的疾病,主要由于液體吸收和形成不平衡導致［3］。胸腹腔積液根據(jù)積液形成的原因不同分為滲出性胸腔積液以及漏出性胸腔積液兩種［4］。滲出性胸腔積液通過增加局部血管的滲透性或者局部組織的滲透情況而導致胸腹腔積液,腫瘤性胸腔積液主要由腫瘤細胞侵犯局部組織導致組織間隙擴大或失去原有分子屏障,從而導致胸腹腔積液［5］。

胸腹水細胞學檢查是臨床檢測胸腹腔積液性質(zhì)的重要檢測方法,通過檢測胸腹水中相關細胞的比例組成情況有利于疾病的準確診斷［6］。胸腹水細胞學檢查方法簡便、檢測迅速、經(jīng)濟有效,具有重要的臨床價值。炎性、惡性胸腹水的鑒別診斷是臨床重要的研究熱點,對于后續(xù)疾病治療方案的制定具有決定性的意義。細胞塊切片與細胞塊切片結合免疫組化聯(lián)合用于胸腹水的檢測有利于提高診斷的陽性率。臨床檢驗的過程中通過對細胞沉渣石蠟進行石蠟包埋、連續(xù)切片可以制作高效的標本［7］。石蠟包埋有利于避免涂片過厚導致細胞結構不清晰、細胞重疊、細胞成團等情況,從而輔助檢驗科工作人員快速診斷［8］。胸腹水沉渣蠟塊可以進行反復切片,有利于進行細胞塊切片結合免疫組化染色、原位核酸分子雜交染色等多種檢測過程,提高臨床整體檢測效果［9］。

本研究探討臨床病理診斷中的胸腹水細胞塊切片結合免疫組化的應用。結果表明,250份臨床送檢的胸腹水標本,其中50份疑似腫瘤性胸腹腔積液標本,包括27份腺癌,8份鱗狀細胞癌,5份小細胞癌,4份反應性間皮細胞,6份惡性間皮瘤。細胞塊切片結合免疫組化檢測的陽性率為100.00%(50/50),高于HE染色檢測的68.00%(34/50),差異有統(tǒng)計學意義(χ2=19.05,P＜0.05)。腺癌和惡性間皮瘤的WT-1抗體表達陽性率比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；腺癌的CK7、CEA抗體表達陽性率高于惡性間皮瘤,Calretinin抗體表達陽性率低于惡性間皮瘤,差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。結合研究結果進一步分析,細胞學涂片檢查是胸腹腔積液的重要檢查手段,對于胸腹水具有一定的檢測意義,但總體上檢測靈敏度低。本研究中細胞塊切片結合免疫組化相比之下優(yōu)勢明顯,檢測陽性率更高,檢測更加靈敏。常規(guī)細胞涂片染色的方法難以區(qū)分轉移性癌癥和原發(fā)性惡性間皮瘤的胸腹水細胞學形態(tài),染色定位不夠準確,很難分辨疾病類型［10］。細胞塊切片結合免疫組化的方法主要通過二次離心分離技術獲取細胞沉渣,并進一步強化胸腹水標本的脫水、石蠟包埋、切片等操作,從而一定程度上提高臨床檢測的準確性。胸腹水腫CK7、CR、TIF-1、CEA、Villin、EMA、Vim 等相關分子的表達在不同類型的疾病中存在一定的差異［11］。結合本研究結果腺癌和惡性間皮瘤的分子表達情況具有明顯的差別,分子表達的情況可以作為細胞塊切片和常規(guī)切片的重要差異對比項目,是細胞塊切片的優(yōu)勢所在。雖然常規(guī)細胞涂片結合細胞塊切片結合免疫組化的方法一定程度上也可以顯示相關分子蛋白的表達情況,但細胞塊切片的顯示結果更加明顯［12］,顯示差異更方便臨床觀察。常規(guī)胸腹水脫落細胞學涂片檢查雖然對于典型的細胞可以準確診斷,但由于陽性率較低容易出現(xiàn)疾病的誤診、漏診情況,尤其對于退變的間皮細胞、炎性胸腹水增生等難以和惡性細胞相互區(qū)分,不利于臨床準確診斷?？傮w上,細胞塊切片結合免疫組化的方法是對于傳統(tǒng)細胞涂片方法的重要補充,是具有重要的臨床應用價值的檢測項目。

綜上所述,胸腹水積液的性質(zhì)對于后續(xù)臨床方案的制定以及預后評估意義重大,胸腹水細胞塊切片結合免疫組化應用對于病理診斷具有明顯的價值,檢測方法快速、便捷,有利于提高腫瘤細胞診斷的陽性率,明確原發(fā)疾病類型,值得臨床推廣使用。