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中國熱科院生物所發(fā)表新型分子克隆系統(tǒng)

2020-01-08 18:41
種業(yè)導(dǎo)刊 2020年2期
關(guān)鍵詞:克隆技術(shù)環(huán)狀無縫

日前,中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所言普副研究員等人經(jīng)過多年研究,開發(fā)了一種新型的標(biāo)準(zhǔn)化分子克隆技術(shù)——Nimble Cloning。該技術(shù)能將目標(biāo)DNA通過一步反應(yīng)直接克隆到環(huán)狀目標(biāo)載體。該技術(shù)以《NimbleCloning:ASimple,Versatile,andEfficientSystemforStandardizedMolecularCloning》為題發(fā)表在國際期刊FrontiersinBioengineeringandBiotechnology。

Nimble Cloning技術(shù)集成了目前幾種克隆技術(shù)的優(yōu)點(diǎn),并較好的解決了它們的不足之處。優(yōu)點(diǎn):一是直接將DNA克隆到環(huán)狀載體,避免了載體的線性化酶切和回收等步驟,簡化了實(shí)驗(yàn)操作,提高了克隆效率。二是使用靈活,用途廣泛。PCR產(chǎn)物和環(huán)狀質(zhì)粒上的DNA(入門克隆)均可克隆到目標(biāo)載體,并且可用于單片段、多片段和多位點(diǎn)等多種形式的克隆。三是可靈活用于標(biāo)準(zhǔn)化克隆和無縫克隆?;蚣訋ㄓ媒宇^序列后可克隆到系統(tǒng)任何一個(gè)載體,形成一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化的克隆系統(tǒng)。如有不使用通用接頭序列的無縫克隆要求,只需將目標(biāo)基因與載體的重疊序列設(shè)計(jì)在通用接頭的外圍,通用接頭可在克隆反應(yīng)中消除,在不改變載體的情況下實(shí)現(xiàn)無縫克隆。

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