李 娜 馬婷婷 倪 楠 李群偉 侯佩強(qiáng),3

1.山東第一醫(yī)科大學(xué)(山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院)，山東 泰安 271016;2.泰安市疾病預(yù)防控制中心，山東 泰安 271000;3.山東省新發(fā)傳染病溯源與防控協(xié)同創(chuàng)新中心，山東 泰安 271016

流行性感冒是由流感病毒在人群間傳播引起的一類呼吸道傳染病，主要會(huì)引起人體的呼吸系統(tǒng)疾病。流感病毒傳播迅速，波及范圍廣，發(fā)病率和死亡率高，對(duì)人民的健康構(gòu)成了巨大的威脅。甲型流感主要會(huì)引起世界范圍的大流行，而乙型流感主要為局部流行[1- 3]。為了解泰安市近6年流行性感冒的流行特點(diǎn)，掌握優(yōu)勢(shì)毒株變異的動(dòng)態(tài)變化，我們統(tǒng)計(jì)了2013—2018年每年度10月1日至次年3月31日流感高發(fā)季節(jié)的監(jiān)測(cè)資料，對(duì)其流行病學(xué)監(jiān)測(cè)結(jié)果和實(shí)驗(yàn)室病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了整理和分析。

1 材料與方法

1.1 樣品來(lái)源

收集泰安市兩所國(guó)家級(jí)流感哨點(diǎn)醫(yī)院及一所省級(jí)流感哨點(diǎn)醫(yī)院的門(mén)診流感樣病例(ILI)資料，采集的鼻咽拭子當(dāng)日低溫送至流感實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病毒分離，對(duì)于當(dāng)日不能檢測(cè)的樣品置于-70℃進(jìn)行保存。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料

病毒采樣試劑盒購(gòu)自友康恒業(yè)生物科技有限公司；EDTA- 胰酶、D- MEM培養(yǎng)基、HEPES緩沖液、Pen- strep雙抗試劑以及胎牛血清均購(gòu)自GIBCO公司；核酸提取試劑盒、流感病毒分型試劑盒購(gòu)自江蘇碩世生物科技股份有限公司；人O型血紅細(xì)胞由泰安市血站提供；MDCK細(xì)胞、流感病毒標(biāo)準(zhǔn)血清均由中國(guó)國(guó)家流感中心提供。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

生物安全柜ClassⅡ由美國(guó)NUAIR公司制造；核酸提取儀購(gòu)自西安天隆科技有限公司；7500熒光定量PCR購(gòu)自ABI生物科技有限公司。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

根據(jù)有關(guān)方案要求，對(duì)流感樣病例送檢的咽拭子采用MDCK細(xì)胞培養(yǎng)法進(jìn)行病毒分離，對(duì)發(fā)生病變的細(xì)胞收獲病毒生長(zhǎng)液，采用國(guó)家流感中心提供的標(biāo)準(zhǔn)抗原、抗血清進(jìn)一步做紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)以及紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)，對(duì)未知病毒進(jìn)行分型鑒定。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS 22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，采用卡方檢驗(yàn)，P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 ILI監(jiān)測(cè)結(jié)果

2013—2018年泰安市流感高發(fā)季節(jié)監(jiān)測(cè)ILI總計(jì)42 779例，以2018年度監(jiān)測(cè)例數(shù)最高，計(jì)11 564例，ILI%為4.27%。而2014年度最少，僅監(jiān)測(cè)4 212例，ILI%為2.20%。由圖1可見(jiàn)，ILI監(jiān)測(cè)總數(shù)以及ILI%近幾年呈現(xiàn)增高趨勢(shì)，每年ILI%的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=269.59，P<0.01)。

圖1 2013—2018年流感樣病例監(jiān)測(cè)情況

2.1.1ILI時(shí)間分布 2013—2018年(10月至次年3月)流感樣病例會(huì)有1～2個(gè)高峰期，集中在每年的冬季至次年春季，月份主要集中在11月到次年2月份。流感樣病例最多的是2017年12月，病例數(shù)有3 584例，占比達(dá)35.64%，而最少的是2014年10月的413例，占構(gòu)成比9.81%。見(jiàn)圖2。

2.1.2ILI年齡分布 2013—2018年泰安市ILI數(shù)最高的年齡組均為0～5歲，其次為5～15歲年齡組。2013至2018年流感流行季節(jié)0～5歲年齡組分別占監(jiān)測(cè)總數(shù)的49.26%、46.94%、47.96%、46.15%、46.53%和51.93%。2013—2018年ILI各年齡組水平構(gòu)成差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=407.38，P<0.01)，見(jiàn)表1。

2.1.3ILI性別分布 2013—2018年泰安市各哨點(diǎn)醫(yī)院門(mén)診ILI送檢標(biāo)本的性別男女總數(shù)之比約1.15∶1，且每年男性均略高于女性。其中2014年ILI男性所占比重明顯高于女性，2013年的差別最不明顯。2013—2018年ILI的性別構(gòu)成比的差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.91，P=0.562)，見(jiàn)表2。

2.2 病原學(xué)檢測(cè)

2013—2018年的流感流行季節(jié)，共分離出676份陽(yáng)性標(biāo)本，其中流感季節(jié)陽(yáng)性標(biāo)本檢出率以2014年最高，為19.75%；2015年以15.53%次之；以2016年檢出率最低，為3.11%； 2018年檢出率也較低，僅4.69%；2013年和2017年的檢出率比較接近，分別為7.42%和8.31%；每年的陽(yáng)性檢出率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=200.63，P<0.01)。見(jiàn)表3。

2013—2018年(10月至次年3月)分離出的陽(yáng)性標(biāo)本分別為83份、223份、170份、33份、109份和58份。2013、2017年度主要以B型流感病毒流行為主，分別占95.18%和66.97%。2014和2016年以A(H3N2)型為優(yōu)勢(shì)流感病毒，分別占99.1%和100%。2015和2018年以新甲H1型流感病毒為主要優(yōu)勢(shì)流感病毒，尤其是2018年，新A(H1NI)型流感病毒占比達(dá)到100%，而2015年也達(dá)到了71.18%。流感病毒甲H3亞型已連續(xù)2年在泰安市處于較低水平流行，2017年占構(gòu)成比14.68%，2018年則未檢出。每年的流感型別的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=875.34，P<0.01)。

2.3 暴發(fā)疫情

2013—2018年的流感高發(fā)季節(jié)，泰安市共報(bào)告46起流感/ILI暴發(fā)疫情，其中20起發(fā)生在高校、中小學(xué)及托幼機(jī)構(gòu)，有17起發(fā)生在中小學(xué)及托幼機(jī)構(gòu)，占疫情總數(shù)的36.96%。所有疫情共報(bào)告發(fā)病623例，死亡2例，波及人數(shù)達(dá)24057人。2013至2018年暴發(fā)疫情數(shù)分別為2起、8起、6起、1起、21起和8起，可見(jiàn)近2年有增高趨勢(shì)。

2.4 流感季節(jié)ILI%與樣品陽(yáng)性率相關(guān)性分析

經(jīng)Spearman秩相關(guān)分析，2013—2018年泰安市流感季節(jié)ILI%與樣品陽(yáng)性率之間不存在關(guān)聯(lián)性，相關(guān)性系數(shù)沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

圖2 2013—2018年泰安市全年ILI病例監(jiān)測(cè)情況

表1 泰安市2013—2018年哨點(diǎn)醫(yī)院流感樣病例年齡構(gòu)成

表2 泰安市2013—2018年ILI性別構(gòu)成[n(%)]

表3 泰安市2013—2018年流感病毒陽(yáng)性分型

3 討 論

通過(guò)對(duì)泰安市2013—2018年(10月至次年3月)流感流行病學(xué)監(jiān)測(cè)結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)，每年流感流行的高峰期出現(xiàn)在北半球冬春季節(jié)，全部人群皆易感，以5歲及以下幼兒為主要易感人群，這與我省其他地區(qū)流感監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示的易感人群結(jié)果一致[4- 6]。同時(shí)流感季節(jié)暴發(fā)疫情監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，2013—2018年泰安市36.96%的疫情暴發(fā)發(fā)生在中小學(xué)及托幼機(jī)構(gòu)，因此，青少年兒童仍是流感侵襲和防控的重點(diǎn)人群，應(yīng)對(duì)該人群加大健康教育力度，提高流感疫苗接種率。泰安市3家哨點(diǎn)醫(yī)院2013—2018年(10月至次年3月)監(jiān)測(cè)到ILI例數(shù)總計(jì)42 779例，以2018年監(jiān)測(cè)例數(shù)最高，為11 564例，2017年次之，10 057例。2017、2018年的流感樣病例監(jiān)測(cè)數(shù)相較于前4年在明顯增高，ILI%也有所增高。有研究表明，傳染病的發(fā)生與氣象因素有關(guān)[7]，流感的發(fā)生與風(fēng)速、氣溫、氣濕、累計(jì)日照時(shí)長(zhǎng)等氣象因素具有明顯的相關(guān)性[8]。由山東省氣象局及泰安市氣象局公布?xì)庀髷?shù)據(jù)可知，2018年初冬泰安出現(xiàn)大范圍霧和霾天氣，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，空氣污染嚴(yán)重；且年末出現(xiàn)2次寒潮大風(fēng)，最低氣溫達(dá)-11℃，這可能是導(dǎo)致2018年ILI報(bào)告例數(shù)增多，且ILI%增高的原因之一。

泰安市2013—2018年(10月至次年3月)ILI病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示，流感樣本陽(yáng)性檢出率在3.11%～19.75%之間，以2014年陽(yáng)性率最高。2017、2018年ILI%增高，但陽(yáng)性檢出率較低。對(duì)2013—2018年(10月至次年3月)泰安市ILI%與樣品陽(yáng)性率進(jìn)行Spearman秩相關(guān)分析，發(fā)現(xiàn)兩者之間不存在關(guān)聯(lián)性，這與李海等人[9]得出的樣品陽(yáng)性檢出率與ILI%呈正相關(guān)的結(jié)論完全不同。這可能是因?yàn)樘┌彩懈魃邳c(diǎn)醫(yī)院對(duì)流感的關(guān)注度和敏感性加強(qiáng)，導(dǎo)致ILI上報(bào)率過(guò)高。還可能是因?yàn)楸茄适米硬杉实?，?dǎo)致陽(yáng)性檢出率低。經(jīng)查閱歷年全年監(jiān)測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，泰安市流感陽(yáng)性樣本在年后4、5月份仍有檢出，提示泰安市流感流行時(shí)間相較其他地區(qū)滯后。

另外，流感病毒分型結(jié)果顯示，分離流感病毒以新甲H1型、甲H3型和B型為主，每年的優(yōu)勢(shì)毒株不同，一般是每隔1～3年更換一次優(yōu)勢(shì)毒株，且每年的主要毒株在次年都只會(huì)出現(xiàn)低水平流行。流感流行季節(jié)的樣本檢出情況不同，會(huì)出現(xiàn)全部只檢出一種流感分型，而其他流感分型不能檢出的情況，這間接表現(xiàn)出流感病毒流行的不確定性，與李海等人的結(jié)論較為一致[9]。2017年流感季節(jié)66.97%的陽(yáng)性標(biāo)本為B型，而2018年均為新甲H1，甲H3亞型病毒已連續(xù)2年在泰安市處于較低水平流行，應(yīng)警惕該毒株在2019年度流感流行季節(jié)成為流行株。

綜上所述，全年開(kāi)展流感樣病例監(jiān)測(cè)，對(duì)于掌握流感病毒的動(dòng)態(tài)變化具有非常重要的意義。泰安市流感防控的重點(diǎn)人群仍應(yīng)是5歲及以下幼兒，預(yù)測(cè)甲H3亞型病毒成為2019年度的流行株。各級(jí)衛(wèi)生單位應(yīng)加強(qiáng)流感健康教育工作，提高流感疫苗接種率，做好流感防控工作。