邵海峰

(商水縣疾病預(yù)防控制中心，河南 周口 466100)

肺結(jié)核屬臨床常見嚴(yán)重慢性傳染性疾病，由結(jié)核分歧桿菌感染引起，可侵及機(jī)體多個臟器，多與患者免疫能力下降、細(xì)胞變態(tài)反應(yīng)升高有關(guān)[1]。利福平是臨床治療肺結(jié)核的一線藥物，屬廣譜抗生素藥物，具有較強(qiáng)抗菌活性，可有效抑制致病菌RNA合成，阻斷其轉(zhuǎn)錄過程，影響DNA及蛋白合成。但患者服藥后血藥濃度個體差異較大，部分患者可因血藥濃度過低而影響治療效果，長期服藥后還可導(dǎo)致肝功能損傷、藥物半衰期縮短等不良影響，且易產(chǎn)生較高耐藥性[2]。因此，加強(qiáng)利福平血藥濃度監(jiān)測，是保證臨床安全、合理用藥的關(guān)鍵。本研究選取商水縣疾病預(yù)防控制中心收治的127例肺結(jié)核患者，旨在分析高效液相色譜法在肺結(jié)核患者利福平血藥濃度監(jiān)測中的應(yīng)用效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批通過。選取2018年5月至2019年5月商水縣疾病預(yù)防控制中心收治的127例肺結(jié)核患者，其中男65例，女62例；年齡23～64歲，平均(44.38±9.58)歲。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)經(jīng)影像學(xué)檢查、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)測定確診為肺結(jié)核；(2)痰菌檢查結(jié)果為陽性；(3)胸部X片結(jié)果顯示病變呈進(jìn)展或空洞增大趨勢；(4)對本研究知情并簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)存在藥物使用禁忌證；(2)血液類疾??；(3)精神類疾??；(4)認(rèn)知功能障礙；(5)妊娠、哺乳期女性；(6)肝腎功能異常；(7)代謝、內(nèi)分泌、循環(huán)系統(tǒng)疾病。

1.3 測定方法

1.3.1治療方案 口服利福平(成都奧邦藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H51020707，規(guī)格：0.15 g)實(shí)施聯(lián)合化療，晨起給藥，每日0.45 g。

1.3.2利福平血藥濃度線性關(guān)系測定 采用高效液相色譜柱(安捷倫，Symmetry C18)進(jìn)行分析，選擇甲醇、乙腈、磷酸二氫鉀(30∶30∶40)為流動相，設(shè)置流速為1 mL·min-1，柱溫為40 ℃，檢測波長為340 nm，進(jìn)樣體積為20 μL；精密吸取利福平對照品適量，加入到空白血漿，分別配制成1 mL血漿藥物濃度為0.3、0.5、2.4、5、10、15、20、25、30 μg·mL-1的樣品溶液，加入磷酸二氫鈉緩沖液10 mL，乙酸乙酯2 mL，漩渦混合2 min，以2 300 r·min-1轉(zhuǎn)速離心5 min，取上清液，采用0.45 μm濾膜過濾后取樣至進(jìn)樣器小瓶進(jìn)樣檢測，觀察色譜圖，作線性回歸方程，分析利福平血藥濃度線性范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系。

1.3.3患者血藥濃度測定 儀器及參數(shù)設(shè)定同1.3.2，于第5天給藥后8 h采用真空抗凝管采集血樣約2 mL，以3 000 r·min-1轉(zhuǎn)速離心15 min，取上層血漿300 μL，加入甲醇溶液0.5 mL，漩渦混合10 min，以3 000 r·min-1轉(zhuǎn)速離心15 min，取20 μL上層清液進(jìn)樣檢測。

1.4 觀察指標(biāo)(1)利福平血藥濃度線性范圍。(2)患者服藥5 d后利福平血藥濃度。

2 結(jié)果

2.1 利福平血藥濃度線性關(guān)系采用高效液相色譜法測定利福平血藥濃度線性范圍為0.3～30 μg·mL-1，根據(jù)線性回歸方程分析，血漿中利福平在0.3～30 μg·mL-1范圍內(nèi)時，血藥濃度與峰面積線性關(guān)系良好(r=0.994 1)。

2.2 服藥5 d后利福平血藥濃度高效液相色譜法檢測結(jié)果顯示，127例肺結(jié)核患者中，血藥濃度0.3～0.5 μg·mL-19例，0.5～30 μg·mL-1117例，僅1例患者因血藥濃度<0.3 μg·mL-1未經(jīng)高效液相色譜法測出，高效液相色譜法檢測有效率為99.21%(126/127)。

3 討論

肺結(jié)核主要通過呼吸道傳播，易出現(xiàn)低熱、乏力、咳嗽、咯血等臨床癥狀，嚴(yán)重威脅患者生命安全。

利福平是臨床治療肺結(jié)核的一線用藥，屬利福霉素類抗菌藥物，可有效殺滅結(jié)核分歧桿菌，且口服吸收較好，可于2 h左右達(dá)到血藥濃度峰值。由于個體差異較大，患者服藥后血藥濃度易受影響，長期服藥后可使藥物半衰期縮短，血藥濃度下降，還可產(chǎn)生耐藥性、肝功能損傷等毒副作用，影響治療效果。學(xué)者認(rèn)為，應(yīng)加強(qiáng)利福平血藥濃度監(jiān)測，實(shí)現(xiàn)服藥劑量個性化，優(yōu)化并縮短療程對肺結(jié)核患者的治療具有重要意義[3]。本研究采用高效液相色譜法對肺結(jié)核患者進(jìn)行利福平血藥濃度測定，所用色譜柱可在乙腈-磷酸鹽體系中準(zhǔn)確分離并分析利福平濃度，將檢測波長設(shè)置為利福平特征吸收波長，可有效避免溶劑峰對利福平濃度分析造成影響，且對溶劑無干擾作用。利福平為一種弱酸，在酸性環(huán)境下穩(wěn)定性較高，在流動相配制及樣品提取中應(yīng)采用緩沖液將流動相調(diào)節(jié)至弱酸性，既往多以乙腈作為流動相，可使利福平保持最佳穩(wěn)定性，但價格較昂貴。本研究所用流動相為甲醇、乙腈、磷酸二氫鉀混合溶液，比例性質(zhì)較穩(wěn)定，且具有良好分離效果，經(jīng)濟(jì)實(shí)用，長久放置后其質(zhì)量及濃度不易發(fā)生變化[4]。本研究所建立的高效液相色譜血藥濃度線性范圍為0.3～30 μg·mL-1，結(jié)果顯示，在此范圍內(nèi)血藥濃度與峰面積線性關(guān)系良好(r=0.994 1)，126例肺結(jié)核患者可通過高效液相色譜法檢測其血藥濃度，有效率為99.21%。這說明借助高效液相色譜法可實(shí)現(xiàn)肺結(jié)核患者利福平血藥濃度監(jiān)測，及時發(fā)現(xiàn)個體差異引起的血藥濃度偏離，采取有效解決方案，為實(shí)現(xiàn)個體化治療提供數(shù)據(jù)支持?；颊哐帩舛绕蛣t表示劑量不足，血藥濃度低、代謝快均是導(dǎo)致耐藥性發(fā)生的主要原因，通過血藥濃度監(jiān)測有利于及時對患者實(shí)施足量給藥，減少耐藥性發(fā)生；其次血藥濃度過高可嚴(yán)重影響患者肝功能，根據(jù)血藥濃度監(jiān)測結(jié)果及時減少用藥劑量，可有效避免毒副作用發(fā)生。通過高效液相色譜法對肺結(jié)核患者利福平血藥濃度進(jìn)行監(jiān)測，可為臨床安全合理用藥及不良反應(yīng)監(jiān)測提供參考依據(jù)，對臨床治療具有重要指導(dǎo)意義[5]。

綜上，采用高效液相色譜法可準(zhǔn)確測定肺結(jié)核患者服用利福平治療期間血藥濃度，且操作簡便、快速，適用于肺結(jié)核患者治療監(jiān)測，對臨床安全、合理用藥具有重要指導(dǎo)意義。