張愛(ài)華， 賴鵬英， 何怡丹， 肖志紅

(1.湖南省林業(yè)科學(xué)院, 湖南 長(zhǎng)沙 410004; 2.中南林業(yè)科技大學(xué)， 湖南 長(zhǎng)沙 410004)

山蒼子是我國(guó)特有的香料植物，資源量主要分布于我國(guó)湖南、廣西和貴州等省份，資源量大約每年350萬(wàn)t鮮果。山蒼子目前利用成分為山蒼子精油，是由鮮果經(jīng)水蒸氣蒸餾獲得，精油含量一般為3%～7%之間[1-3]。目前90%以上的山蒼子資源處于丟棄狀態(tài)[4]，不僅造成資源的極大浪費(fèi)，還會(huì)引起局部的環(huán)境生態(tài)污染，因此開發(fā)山蒼子資源具有深遠(yuǎn)意義。

山蒼子核仁富含油脂，油脂含量為10%～20%，山蒼子核仁油脂肪酸構(gòu)成主要包含月桂酸和癸酸，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值[5-7]。賴鵬英等[8]前期對(duì)山蒼子核仁油制備方法進(jìn)行了綜述研究，發(fā)現(xiàn)浸出制油的方法比較先進(jìn)，應(yīng)用較為廣泛，雖需要脫溶劑過(guò)程但效率也比較高。何怡丹等[9]用微波輔助水代法提取山蒼子核仁油，在優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件下，山蒼子核仁油的提取率為 29.36 %，是一種較為高效環(huán)保的提取方法。朱輝等[10]通過(guò)微波輔助提取技術(shù)結(jié)合響應(yīng)面法優(yōu)化山蒼子核仁油，得出山蒼子核仁油提取最佳工藝條件為液料比116，萃取溫度為69 ℃，微波功率為337 W，萃取時(shí)間為63 min，在此條件下山蒼子核仁油提取率為37.42%，與環(huán)己烷溶劑回流法相比較提取率提高了30.11%。袁先友等[11]介紹了索氏提取法和超臨界萃取法提取山蒼子核仁油的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，發(fā)現(xiàn)索氏提取出油率為27.5%，超臨界制油為25.8%。

亞臨界流體萃取利用亞臨界丁烷流體作為萃取劑，在密閉、低壓的容器內(nèi)，依據(jù)有機(jī)物相似相溶的原理，通過(guò)油料中油脂分子在萃取劑中的梯度擴(kuò)散達(dá)到油脂的制備[12-14]，特別是以祁鯤為代表的研究人員成功將亞臨界流體萃取實(shí)現(xiàn)工業(yè)化[15-17]，這項(xiàng)新技術(shù)得到了生機(jī)勃勃的發(fā)展。本研究在前期工作的基礎(chǔ)上，創(chuàng)新引用亞臨界制油工藝進(jìn)行山蒼子核仁油的制備，為該工藝在山蒼子制油領(lǐng)域的推廣應(yīng)用提供堅(jiān)實(shí)的理論和技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 亞臨界流體萃取設(shè)備CBA-10(河南省亞臨界生物技術(shù)有限公司)；粉碎機(jī)WJX-200(上海緣沃工貿(mào)有限公司)；干燥箱LL881Y-2(立龍電熱設(shè)備有限公司)；分析天平FA1204B(上海精密儀器廠)；索氏提取儀QSXT-06(上海啟前電子科技有限公司)。

1.1.2 試劑 丁烷(AR級(jí)，河南亞臨界生物有限公司)；乙醚(AR級(jí)，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；正己烷(AR級(jí)，河南亞臨界生物有限公司)；氫氧化鈉(AR級(jí)，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。

1.2 方法

將山蒼子核仁烘干，粉碎過(guò)篩。準(zhǔn)確稱取山蒼子核仁粉300 g，放置萃取釜內(nèi)，通過(guò)真空泵抽取至負(fù)壓。將丁烷溶劑泵至萃取釜，打開攪拌機(jī)，并調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為1 000 r·min-1。用循環(huán)熱水將萃取釜內(nèi)溶劑加熱到指定溫度后開始計(jì)時(shí)，反應(yīng)到指定時(shí)間后，將混合液相通過(guò)分離網(wǎng)與固相分離，并將混合油泵至蒸發(fā)釜內(nèi)，升溫氣化溶劑獲得山蒼子核仁油(圖1)。

2 結(jié)果與分析

2.1 山蒼子核仁油制備單因素實(shí)驗(yàn)

2.1.1 原料粒徑對(duì)萃取率的影響 由圖2可知，粒徑在400～800 μm狀態(tài)下萃取率最好。粒徑越小反而萃取率有所降低，這主要是由于粒子越小，越易發(fā)生粒子團(tuán)聚，這會(huì)阻礙萃取劑與物料的接觸，從而降低萃取率；粒子越大，其表面積越小，溶劑與物料接觸面積也會(huì)變小，從而產(chǎn)生類似與小粒徑顆粒的狀態(tài)，影響核仁油的萃取率。

2.1.2 溫度和時(shí)間對(duì)萃取率的影響 由圖3可知，在萃取初始階段存在一個(gè)快速的萃取過(guò)程，這是由于山蒼子在粉碎過(guò)程中造成大量細(xì)胞壁的破裂，從而產(chǎn)生大量的游離油脂。在機(jī)械攪拌作用下，這些游離油脂能夠快速溶解于溶劑中，從而產(chǎn)生一個(gè)快速萃取階段。在前10 min的萃取時(shí)間內(nèi)基本將80%左右的油脂萃取出來(lái)，后面階段進(jìn)入緩慢萃取過(guò)程，這是因?yàn)橛椭忾]在細(xì)胞內(nèi)，由于細(xì)胞壁的阻隔作用，大大減緩了油脂的分子擴(kuò)散作用，從而造成油脂萃取時(shí)間的延長(zhǎng)。圖3可見(jiàn)，在不同溫度條件下，在40 min的萃取時(shí)間內(nèi)基本能夠達(dá)到萃取平衡，因此單因素選取萃取時(shí)間為40 min；溫度變化對(duì)萃取率的影響也可以看出在50 ℃為最佳溫度，再增加溫度不僅造成資源浪費(fèi)，也會(huì)造成果實(shí)中蛋白質(zhì)的變性，從而影響油脂的析出。

2.1.3 原料水分對(duì)萃取率的影響 由圖4可知，隨著含水率的增加萃取率呈下降趨勢(shì)。這是由于水分子具有強(qiáng)極性，溶劑和油脂為非極性組分。果實(shí)中水分的存在能夠降低溶劑與油脂分子之間的傳遞阻力，造成萃取率的降低。但是若要一味降低含水率不僅造成熱能的損耗，還會(huì)延長(zhǎng)工藝制油時(shí)間，因此選取山蒼子核仁含水率為6.82%。

2.2 山蒼子核仁油制備正交試驗(yàn)

通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)選取對(duì)山蒼子核仁油萃取率有較大影響的A(含水率/%)、B(萃取溫度/℃)、C(萃取時(shí)間/min)進(jìn)行三因素三水平的正交試驗(yàn)，因素水平安排見(jiàn)表1。

以山蒼子核仁油的萃取率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)山蒼子核仁含水率、亞臨界萃取溫度和時(shí)間等因素進(jìn)行評(píng)價(jià)，經(jīng)方差分析得到最佳工藝配方組合，相關(guān)試驗(yàn)數(shù)據(jù)見(jiàn)表2。

表1 三因素三水平正交試驗(yàn)安排Tab.1 L9(34) Orthogonal experiment arrangement水平變量ABC154535265040375545

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果Tab.2 Orthogonal experiment results實(shí)驗(yàn)ABC萃取率/%15453569.0125504072.5935554576.0346454075.1156504580.2366553588.9777454596.4387503592.1597554098.09K172.54378.77079.870K293.30780.80380.287K375.80082.07781.493R20.7643.3071.623

由表2可知，三個(gè)因素對(duì)山蒼子核仁亞臨界萃取率影響大小的順序：含水率>萃取溫度>萃取時(shí)間， 萃取的最佳因素組合為含水率6%，溫度55℃，萃取時(shí)間為45 min。結(jié)合上述單因素實(shí)驗(yàn)，由于在亞臨界實(shí)驗(yàn)過(guò)程中高溫會(huì)造成設(shè)備的壓力增大，且操作溫度45 ℃與50 ℃之間對(duì)萃取率的影響不是很大，因此最終選擇最佳因素組合為含水率6%，溫度50 ℃，萃取時(shí)間為45 min。此外，方差分析表明，含水率對(duì)萃取率有顯著影響(P<0.05)。

2.3 山蒼子核仁油分析

由表3可知，山蒼子核仁油主要成分為月桂酸，占53.3%?？梢?jiàn)月桂酸是用途廣泛的一種工業(yè)原料，經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高，因此提取山蒼子核仁油很有經(jīng)濟(jì)價(jià)值和市場(chǎng)前景。

表3 山蒼子核仁油成分分析Tab.3 Composition analysis of Litsea cubeba kernel oil成分指標(biāo)保留時(shí)間/min含量/%C10∶116.400 0.918C10∶016.622 8.512 C12∶119.183 8.973 C12∶019.432 53.269C14∶121.559 1.718C14∶021.761 3.125C16∶024.027 4.869C18∶227.130 6.083C18∶127.229 10.603C18∶027.631 0.564

3 結(jié)論與討論

目前山蒼子資源主要利用成分為精油，95%左右的組分主要以丟棄為主，為更大限度利用山蒼子資源，變廢為寶，本研究嘗試通過(guò)亞臨界工藝進(jìn)行山蒼子核仁油的萃取制備，得出以下結(jié)論：

(1) 山蒼子原料年產(chǎn)350萬(wàn)t左右，其中核仁油占比為10%～20%，資源量極大。山蒼子核仁油主要成分為月桂酸，占比大于50%。月桂酸是一種用途廣泛的工業(yè)原料，經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高，因此提取山蒼子核仁油具有很好的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和市場(chǎng)前景。

(2) 通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)可知，亞臨界工藝在制取山蒼子核仁油過(guò)程中，核仁破碎粒度對(duì)工藝萃取率有著顯著影響，過(guò)大過(guò)小的比表面積都會(huì)影響油脂的萃取效率，通過(guò)實(shí)驗(yàn)可知山蒼子核仁最佳破碎粒度為400～800 μm。

(3) 通過(guò)正交試驗(yàn)對(duì)影響萃取效率較大的三個(gè)因素(核仁含水率、萃取溫度、萃取時(shí)間)進(jìn)行優(yōu)化組合，確定亞臨界工藝制備山蒼子核仁油的最佳因素組合為：核仁含水率6%，萃取溫度50 ℃，萃取時(shí)間45 min。此外經(jīng)方差分析表明，核仁含水率對(duì)亞臨界工藝的萃取率有著顯著影響(P<0.05)。

(4) 通過(guò)本試驗(yàn)驗(yàn)證，亞臨界工藝能夠很好的制備山蒼子核仁油，提取條件溫和，本研究可為該工藝在山蒼子制油領(lǐng)域的推廣應(yīng)用提供堅(jiān)實(shí)的理論和技術(shù)支撐。