高 磊，蘇 暢，蘇 瑩

（吉林省藥品檢驗所，吉林 長春 130000）

藥品檢驗意在規(guī)避不合格藥品流入市場而為公眾帶來人身和財產(chǎn)損害，繼而保障藥品的安全性，廣義上的藥品檢驗其工作內(nèi)容涉及藥品質(zhì)量、成分、不良反應(yīng)、理化、安全、缺陷等檢測，是藥品檢驗所高度重視的藥品安全問題。目前，可供藥學(xué)工作者檢驗藥品質(zhì)量、含量等的技術(shù)方法諸多，包括毛細(xì)管電泳法、薄層掃描法、分光光度法、高效液相色譜法等，其中，高效液相色譜法以可操作性強、適用范圍廣、靈敏度高、結(jié)果測定速度快等優(yōu)勢得到了快速發(fā)展和應(yīng)用。本文就高效液相色譜法的作用原理、特點以及其在藥品檢驗中的具體應(yīng)用進行綜合闡述。

1 高效液相色譜法的作用原理和特點

高效液相色譜法被視為主流色譜分析方法之一，它將液體視為流動相，在高壓輸液系統(tǒng)的支持下，單一溶劑、混合溶劑、緩沖液等不同極性的流動相被泵注到裝有固定相的色譜柱內(nèi)，并在柱內(nèi)實現(xiàn)各成分的分離，流經(jīng)檢驗器完成不同成分的檢測和化學(xué)分析，其功用和價值主要體現(xiàn)在高壓輸液泵以及靈敏度超高的檢測儀上，而這也是高效液相色譜法區(qū)別于傳統(tǒng)經(jīng)典液相色譜法的重點技術(shù)指標(biāo)。另一方面，高效液相色譜法所使用的高壓輸液泵，其工作效率和效能高，不僅能夠在短時間內(nèi)完成不同成分的檢驗，還可以高效分離受檢藥品的不同成分。值得一提的是，依托于高選擇性、高靈敏度、高檢出率等技術(shù)優(yōu)勢，高效液相色譜法在藥品檢驗中的應(yīng)用領(lǐng)域愈佳寬泛。

2 高效液相色譜法在藥品檢驗中的應(yīng)用

2.1 藥品含量的測定

眾所周知，制藥是一個繁瑣的過程，個中工序諸多，而所取藥品原料中的組分和雜質(zhì)在性、質(zhì)、量等方面無疑會存在較大差異，這便對藥品有效成分的測定提出了考驗。另外，在藥品有效成份測定方面，還會受諸多因素的干擾。舉例而言，吡羅昔康是一種酞胺類化合物，遇水易被水解，與氧氣接觸存在氧化的風(fēng)險，因而需要效率更高的可靠技術(shù)方案進行含量的測定。另外，筆者在實踐中發(fā)現(xiàn)，在測定過程中以鹽酸甲醇溶液（0.01 mol/L）作為溶劑，一方面可強化溶劑的溶解性，一方面可強化吡羅昔康溶液的穩(wěn)定性，從而獲取更精準(zhǔn)的測定結(jié)果。此外，以高效液相色譜法可實現(xiàn)四環(huán)素類抗生素及其立體異構(gòu)體的分離和測定，可測定螺旋霉素發(fā)酵液中有機酸的含量，且可解決高分子物質(zhì)在鹽酸萘甲唑啉鼻用凝膠劑含量測定中所形成的堵塞性干擾問題[1]。

2.2 中藥質(zhì)量的測定

中藥相對于西藥其成分、質(zhì)量檢測的難度系數(shù)更高，若以傳統(tǒng)的檢測方法恐難獲得準(zhǔn)確的結(jié)果，這便為藥物的有效性、安全性評價帶來了隱患。舉例而言，丹參根部內(nèi)含丹參酮，常被入藥調(diào)經(jīng)疏絡(luò)、活血祛瘀、消腫鎮(zhèn)痛，其中丹參酮IIA是丹參脂溶性成分的代表物質(zhì)，被廣泛用于冠心病防治。但是，丹參入藥采購、運輸、選品、有效成分測定等各個環(huán)節(jié)均存在危險因素，尤其是成分分離環(huán)節(jié)，是定性、定量檢測的關(guān)鍵，故需要依靠高效液相色譜法，以彌補看、摸、聞、嘗傳統(tǒng)四步性狀特征鑒別法的不足。總之，科學(xué)有效的丹參中藥材鑒定策略不僅能夠為丹參藥材質(zhì)量控制提供支持，還可以為丹參的栽培種植、藥用部位擴展、品質(zhì)鑒定、有效成分劑量研究等提供參考依據(jù)。舉一反三，在其他中藥質(zhì)量的測定中，高效液相色譜法仍可發(fā)揮重要作用，故應(yīng)引起重視。

2.3 抗生素雜質(zhì)限制

抗生素藥物是引起藥物致不良反應(yīng)的重要類型，歸其根本是藥物中含有過量的雜質(zhì)如降解產(chǎn)物、中間體、聚合物等。筆者采用高效液相色譜法測定氨芐西林丙磺舒分散片中雜質(zhì)含量，在分離藥品主要成分和降解產(chǎn)物、有關(guān)物質(zhì)環(huán)節(jié)用時較短，且定量檢測結(jié)果可靠，足以印證高效液相色譜法在抗生素雜質(zhì)限量中的應(yīng)用價值。

2.4 藥物鑒別和有關(guān)物質(zhì)測定

藥物的鑒別可確保物盡其用，在鑒別過程中應(yīng)用高效液相色譜技術(shù)可明確藥物定性參數(shù)如南北五味子的鑒別，從而明確不同五味子的組分含量，為其臨床應(yīng)用提供參考。另外，在藥物的制備、存儲、運輸、流通等環(huán)節(jié)難免會被有關(guān)物質(zhì)污染，從而拉低藥品質(zhì)量[2]。值得注意的是，有關(guān)物質(zhì)的含量一般較少，因而以常規(guī)的方法進行檢測可能會出現(xiàn)誤差或因檢測靈敏度低而無法測得相應(yīng)含量，故推薦應(yīng)用高效液相色譜法。有學(xué)者以薄層色譜法與高效液相色譜法測定鹽酸特拉哇嗦的有關(guān)物質(zhì)含量，前后最小檢出量為0.025 mg/mL和0.05 μg/mL，足以印證高效液相色譜法的靈敏度更勝一籌。

3 小 結(jié)

高效液相色譜法具有分離效能高、分析速度快、靈敏度高、適用范圍廣等技術(shù)優(yōu)勢，而未來依托于智能軟件、檢測技術(shù)的開發(fā)和應(yīng)用，其在藥品檢驗領(lǐng)域勢必會迎來全新的發(fā)展面貌，而我國藥品質(zhì)量亦會趨于規(guī)范化、高質(zhì)化、安全化。