阿苯達(dá)唑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中主要用于防治淡水魚類體表寄生的指環(huán)蟲、三代蟲、黏孢子蟲及海水魚類寄生的雙鱗盤吸蟲、貝尼登蟲等。甲苯咪唑主要用于治療魚類指環(huán)蟲、三代蟲等單殖類吸蟲。從防治對(duì)象不難看出它們均屬于抗蠕蟲藥物,但甲苯咪唑在說(shuō)明書中明確規(guī)定了斑點(diǎn)叉尾、大口鲇禁用,而阿苯達(dá)唑卻未標(biāo)注對(duì)斑點(diǎn)叉尾、大口鲇禁用的相關(guān)內(nèi)容。本文就阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c(diǎn)叉尾是否敏感進(jìn)行深入的研究與試驗(yàn),試驗(yàn)過(guò)程分為實(shí)驗(yàn)室小試與池塘網(wǎng)箱試驗(yàn)。
1.試驗(yàn)材料
(1)試驗(yàn)器材:玻璃水族缸共3個(gè),大小相同,規(guī)格1.2米×0.6米×0.5米,編號(hào)分別為BHL-001、BHL-002、BHL-003,分別用于阿苯達(dá)唑溶液的藥敏試驗(yàn);溫度計(jì)、電子天平、增氧機(jī)、pH試紙、測(cè)氧瓶、滴定管、移液管、錐形瓶、吸耳球、燒杯、玻璃棒等。
(2)試驗(yàn)魚種:由山西黃河魚病研究所生態(tài)養(yǎng)殖場(chǎng)提供,經(jīng)本所技術(shù)員鑒定無(wú)病無(wú)傷、規(guī)格整齊的健康斑點(diǎn)叉尾魚種,體長(zhǎng)20~23厘米,平均體長(zhǎng)21.5厘米,平均體重220克/尾,共30尾。
(3)藥品來(lái)源:阿苯達(dá)唑(98%原粉)由山西乾泰動(dòng)物藥業(yè)有限公司提供,冰醋酸購(gòu)置于運(yùn)城市新興化工試劑商店。
(4)阿苯達(dá)唑溶液配制:用電子天平稱取10.2克阿苯達(dá)唑,溶解于89.8克的冰醋酸中,并用玻璃棒不斷攪拌,待粉末狀藥劑完全溶解后制成規(guī)格100∶10的阿苯達(dá)唑溶液。
2.藥敏試驗(yàn)前準(zhǔn)備工作
(1)水族缸注水:分別在BHL-001、BHL-002、BHL-003水族缸內(nèi)注入經(jīng)曝氣后的自來(lái)水240升,打開增氧泵。
(2)投放魚種前的水質(zhì)監(jiān)測(cè):水溫28~32℃、溶氧5.0毫克/升、pH≥7.5,3個(gè)水族缸內(nèi)水的理化指標(biāo)基本相同,符合養(yǎng)魚標(biāo)準(zhǔn)。
(3)投放魚種:5小時(shí)后分別在水族缸中放入備好的斑點(diǎn)叉尾魚種各10尾,暫養(yǎng)3日,暫養(yǎng)期間進(jìn)行日常管理但不投喂,并以充分曝氣的自來(lái)水為水源。
3.藥敏預(yù)備試驗(yàn)
(1)試驗(yàn)場(chǎng)所:于2019年7月在山西黃河魚病研究所實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行,目檢3個(gè)水族缸內(nèi)魚種基本正常,未見異?,F(xiàn)象。
(2)試驗(yàn)藥物濃度:阿苯達(dá)唑溶液按0.05、0.1、0.15毫克/升進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。藥物稀釋前按240升水計(jì)算出每個(gè)水族缸內(nèi)的準(zhǔn)確劑量。
(3)藥物稀釋與備用:用吸管吸取阿苯達(dá)唑溶液12、24、36毫克分別放入3個(gè)大小同等的燒杯內(nèi),加入200倍的水充分將藥物稀釋,準(zhǔn)備使用。
4.藥敏正式試驗(yàn)
(1)藥物施用:用備好的藥液均勻?yàn)⑷?個(gè)水族缸內(nèi),其中阿苯達(dá)唑溶液施入BHL-001、BHL-002、BHL-003,藥液劑量分別為12、24、36毫克。
(2)藥敏試期管理:試驗(yàn)開始后,前12小時(shí)每2小時(shí)觀察1次,記錄試驗(yàn)魚的表現(xiàn)和中毒癥狀及水溫、溶氧、pH等指標(biāo),并于12、24、48、72、96小時(shí)分別記錄試驗(yàn)魚的死亡數(shù),試驗(yàn)期間不投餌,及時(shí)清除排泄物和死亡個(gè)體。在藥敏試驗(yàn)期間嚴(yán)格保證試驗(yàn)水的溶解氧,防止試驗(yàn)魚缺氧死亡。每隔6小時(shí)測(cè)定溶氧1次,需保證水族缸內(nèi)溶氧≥5毫克/升,避免缺氧死亡。
(3)試驗(yàn)魚死亡的判斷:試驗(yàn)魚在中毒后鰓蓋停止活動(dòng),用玻璃棒或小鑷子輕輕刺激試驗(yàn)魚尾柄部位,5分鐘內(nèi)仍無(wú)反應(yīng)即可確定為個(gè)體死亡。
5.毒性試驗(yàn)結(jié)果分析
表1 阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c(diǎn)叉尾的毒性試驗(yàn)
表1 阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c(diǎn)叉尾的毒性試驗(yàn)
注:試驗(yàn)魚數(shù)均為10尾。
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6.實(shí)驗(yàn)室小試小結(jié)
1.試驗(yàn)前準(zhǔn)備
(1)試驗(yàn)場(chǎng)所:陜西省合陽(yáng)縣黃河灘涂?jī)蓚€(gè)粗養(yǎng)四大家魚池塘,塘內(nèi)有鰱魚、鯉魚、草魚及鳙魚,池塘分別為5畝水面,水深1米,池塘代號(hào)為HG-001、HG-002。
(2)池塘水源:水源為地下井水,池水pH≥7.5、溶氧≥5.0毫克/升、水溫32℃,鏡檢以綠藻為主,少量隱藻,未檢到有害物質(zhì),兩個(gè)池塘的水質(zhì)指標(biāo)基本相同。
(3)網(wǎng)箱設(shè)置:分別在兩個(gè)池塘中央各放置1個(gè)5米×5米×1米的網(wǎng)箱。
2.正式試驗(yàn)
(1)藥物濃度與試驗(yàn)劑量:試用藥物為10%阿苯達(dá)唑溶液,兩個(gè)池塘的用藥劑量分別為0.1、0.15毫克/升,即HG-001用333.5克,HG-002用500.25克。
(2)藥物施用:將備好的藥液加入適量的池水充分溶解,均勻全池潑灑,打開增氧機(jī)兩小時(shí),以確保藥物的均勻度。
(3)死亡鑒定:魚兒停止活動(dòng)、身體僵硬、漂浮水面為死亡依據(jù),并將死魚及時(shí)撈出。
3.池塘網(wǎng)箱試驗(yàn)結(jié)果
試驗(yàn)塘HG-001、HG-002分別從12時(shí)開始施入不同劑量的阿苯達(dá)唑溶液,18時(shí)觀察兩個(gè)試驗(yàn)塘吃食均正常,未發(fā)現(xiàn)異常現(xiàn)象。第2天6時(shí)兩個(gè)試驗(yàn)塘吃食良好,也未發(fā)現(xiàn)其他不良癥狀,12時(shí)觀察HG-001吃食正常,HG-002吃食緩慢,吃食數(shù)量減少,未有不正?,F(xiàn)象;18時(shí)HG-001吃食良好,HG-002完全停食,有個(gè)別魚出現(xiàn)上下竄動(dòng)和側(cè)游不良癥狀。第3天6時(shí)HG-001吃食良好,HG-002死亡18尾,飄出水面,還有部分魚上下竄動(dòng)和側(cè)游等不良癥狀;12時(shí)HG-001吃食緩慢,吃食數(shù)量減少,無(wú)其他異常行為,HG-002死亡7尾;18時(shí),HG-001完全停食,有部分魚狂游,但未見死亡,HG-002撈出死魚15尾。第4天6時(shí)HG-001撈出死魚13尾,HG-002撈出死魚17尾;12時(shí)HG-001撈出死魚9尾,HG-002撈出死魚9尾;18時(shí),HG-001撈出死魚8尾,HG-002撈出死魚14尾。第5天6時(shí)HG-001撈出死魚11尾,HG-002撈出死魚20尾,全部死亡,死亡率100%;12時(shí)HG-001撈出死魚6尾;18時(shí),HG-001撈出死魚8尾。第6天6時(shí)HG-001撈出死魚24尾,12時(shí)HG-001撈出死魚9尾,18時(shí)HG-001撈出死魚12尾,全部死亡,死亡率100%。不同劑量阿苯達(dá)唑溶液對(duì)斑點(diǎn)叉尾的致死率詳見表2。
表2 阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c(diǎn)叉尾池塘網(wǎng)箱試驗(yàn)記錄
表2 阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c(diǎn)叉尾池塘網(wǎng)箱試驗(yàn)記錄
注:吃食正常用“++”表示,吃食減少用“+”表示,停食用“-”表示,活動(dòng)正常用“√”表示,活動(dòng)異常用“×”表示。
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4.池塘試驗(yàn)小結(jié)
無(wú)論實(shí)驗(yàn)室小試還是池塘網(wǎng)箱試驗(yàn),都證實(shí)了阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c(diǎn)叉尾有毒。我們根據(jù)藥物作用的四大過(guò)程(吸收、分布、代謝、排泄),可判斷阿苯達(dá)唑利用內(nèi)服或外潑的方法會(huì)對(duì)斑點(diǎn)叉尾產(chǎn)生相同的毒性。但國(guó)標(biāo)水產(chǎn)藥典產(chǎn)品中6%的阿苯達(dá)唑粉在使用說(shuō)明書中未注明對(duì)斑點(diǎn)叉尾禁用或慎用的相關(guān)信息,因此提醒大家阿苯噠唑在斑點(diǎn)叉尾養(yǎng)殖中應(yīng)慎用或禁用。