孫 蘭，李家春，劉莉娜，呂耀中，魏天楊，王振中＊＊

（1. 江蘇食品藥品職業(yè)技術(shù)學(xué)院 淮安 223003；2. 江蘇財(cái)經(jīng)職業(yè)技術(shù)學(xué)院 淮安 223003；

3. 江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司 連云港 222001；4. 中藥制藥過程新技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 連云港 222001）

原發(fā)性痛經(jīng)（Primary dysmenorrhea，PD）是最常見的婦科疾病之一，流行病學(xué)研究顯示患病率為20%-90%，較為嚴(yán)重約為15%，給患者正常生活和工作帶來嚴(yán)重影響[1]。雖原發(fā)性痛經(jīng)多見，但病因不明。有研究認(rèn)為，原發(fā)性痛經(jīng)的病理生理學(xué)與子宮異常收縮有關(guān)，子宮收縮時(shí)，由于子宮肌層的血流量減少而引起缺血，厭氧代謝物積貯，刺激疼痛神經(jīng)元引起疼痛反應(yīng)[2]。研究認(rèn)為，活性氧（Reactive oxygen species，ROS）的過量產(chǎn)生與痛經(jīng)的發(fā)病機(jī)制有關(guān)，ROS誘導(dǎo)的蛋白質(zhì)和DNA 的變化可能導(dǎo)致細(xì)胞功能的改變或蛋白水解反應(yīng)的激活，最終導(dǎo)致子宮內(nèi)膜損傷和炎癥[3]。子宮是女性主要生殖器官，由子宮內(nèi)膜、肌層和外漿膜層組成。在月經(jīng)期間，子宮收縮活動(dòng)增加，子宮在幅度和頻率方面的收縮異常被認(rèn)為是導(dǎo)致不孕、流產(chǎn)、痛經(jīng)等各種臨床問題的原因之一[4]。子宮組織的收縮生理功能受類固醇激素、二十烷酸和肽的不同調(diào)節(jié)。黃體酮（Progesterone，P4）促進(jìn)子宮肌層松弛，雌激素（Estrogen，E2）增加子宮收縮力。P4 和E2 調(diào)控子宮平滑肌的收縮的主要通過調(diào)節(jié)編碼收縮相關(guān)蛋白（Contraction-associated proteins，CAPs）基因的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。一些重要的CAPs 包括縮宮素受體（Oxytocin receptor，OTR）和前列腺素F2a受體（Prostaglandin F2areceptor，F(xiàn)P）[5]。痛經(jīng)發(fā)生時(shí)，子宮內(nèi)膜血流量減少，產(chǎn)生和釋放PGF2α增多，高濃度的PGF2α作用于螺旋小動(dòng)脈壁上的FP受體，引起子宮平滑肌痙攣性收縮[6]。

原發(fā)性痛經(jīng)尚無特效治療方法，臨床上常采用對(duì)癥和經(jīng)驗(yàn)性治療方法，常用非甾體類抗炎藥、鈣離子通道抑制劑、口服避孕藥等藥物治療[7]。非甾體抗炎藥在原發(fā)性痛經(jīng)患者中的作用機(jī)制尚不完全清楚，但由于其鎮(zhèn)痛和抗炎的特性，常被用于治療原發(fā)性痛經(jīng)，如雙氯芬酸治療原發(fā)性痛經(jīng)因已被證明有效而被廣泛應(yīng)用[8]。Ca2+是一種重要的離子，其控制細(xì)胞內(nèi)的幾個(gè)過程，如胞吐、分泌和凋亡。痛經(jīng)時(shí)，子宮因缺血而發(fā)生再灌注損傷，使Ca2+大量進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，從而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)Ca2+過量增多引起細(xì)胞的能量損耗、細(xì)胞膜受損，致使子宮肌攣縮，出現(xiàn)痛經(jīng)。硝苯地平等鈣離子通道阻滯劑具有較好的治療原發(fā)性痛經(jīng)的作用[9]。PD屬于與內(nèi)分泌相關(guān)的婦科疾病，口服避孕藥抑制排卵不僅減少了PGF2a的產(chǎn)生，而且減少了能產(chǎn)生PGF2a的月經(jīng)量，從而減少了痛經(jīng)的發(fā)生。但上述藥物均產(chǎn)生一定的副作用，嚴(yán)重者甚至引起胃潰瘍，如非甾體類抗炎藥[10]，口服避孕藥常引起患者內(nèi)分泌功能失調(diào)等[11]。

在我國(guó)醫(yī)學(xué)中，PD 歸屬于“行經(jīng)腹痛”范疇，關(guān)于痛經(jīng)的最早記載見于漢代張仲景《金匱要略》，其關(guān)于痛經(jīng)的描述為：“少腹?jié)M痛，經(jīng)水一月再見”。痛經(jīng)病位在子宮，“不通則痛”和“不榮則痛”是其主要兩個(gè)主要病機(jī)，有實(shí)有虛或者虛實(shí)夾雜，實(shí)者可由寒凝血瘀、氣滯血瘀、濕熱瘀阻導(dǎo)致子宮的氣血運(yùn)行不通暢，“不通則痛”；虛者主要由于腎氣虧損及氣血虛弱，從而導(dǎo)致子宮失于濡養(yǎng)，“不榮則痛”[12]。中醫(yī)藥通過多途徑治療PD 獲得比較滿意的療效，且副作用小。然而，一些臨床上療效顯著的中藥方劑，因藥理作用機(jī)制研究不夠深入，很難被西醫(yī)所接受，限制中醫(yī)藥走向世界[13]。

散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊（Sanjie Zhentong Capsule，SJZTC）由古方血竭散和消瘰丸化載而來，由龍血竭、三七粉、薏苡仁和浙貝母4味藥材組成，具有活血化瘀、軟堅(jiān)散結(jié)的功效。方中龍血竭、三七專入血分以攻其瘀，浙貝母、薏苡仁清熱化痰、軟堅(jiān)散結(jié)，去除濕熱，以利氣血暢行，無瘀滯。在臨床上，散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊用于痰瘀互結(jié)兼氣滯所致的繼發(fā)性痛經(jīng)、月經(jīng)不調(diào)、盆腔炎包塊、不孕等。研究表明，SJZTC 具有一定的解痙、鎮(zhèn)痛作用，且能夠降低血清雌二醇和血漿PGF2α，TXB2濃度，增加血清孕酮含量[14]。但SJZTC 對(duì)子宮收縮的影響還未見報(bào)道，本研究通過觀察SJZTC 對(duì)小鼠子宮平滑肌收縮的影響，并探討其機(jī)制，為臨床治療原發(fā)性痛經(jīng)提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物

ICR 小鼠，雌性，體重：18-22 g，購(gòu)自揚(yáng)州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心，許可證號(hào)：SCXK（蘇）2017-0007，分籠飼養(yǎng)，自由飲水。

1.2 藥物與試劑

散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊（江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司）；苯甲酸雌二醇注射液（寧波第二激素廠）；縮宮素（Oxytocin，上海禾豐制藥有限公司）；生理鹽水（山東齊都藥業(yè)股份有限公司）；PGF2α（Sigma 公司）；乙酰膽堿（Acetyl choline，Ach，Sigma 公司）；Bay K8644（Sigma公司）；樂氏液（NaCL 9.2 g，KCL 0.42 g，CaCL20.24 g，NaHCO30.15 g，Glucose 1.0 g 溶解于1000 ml 重蒸水中即得，PH = 7.4）；DMEM/F12 培養(yǎng)基（GIBCO）；膠原酶Ⅱ（GIBCO）；胎牛血清（Hyclone）；胰蛋白酶（Thermo）；EDTA（Amresco）；青霉素/鏈霉素混合液（Biotopped）；Calcium 6-QF Assay Kit（MD）。

1.3 儀器

電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司）；PowerLab16/35 生物信號(hào)采集系統(tǒng)（AD Instruments 公司）；PHSJ-4FPH 指示計(jì)（上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司）；FlexStation 3 多功能酶標(biāo)儀（美國(guó)Molecular Devices 公司）；SW-CJ-2F 型超凈工作臺(tái)（蘇凈安泰）；二氧化碳培養(yǎng)箱（Thermo scientific）；CKX41SF 倒置顯微鏡（OLYPUS）；細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)儀（Invitrogen）。

1.4 離體子宮肌條的制備

取未孕小鼠，于實(shí)驗(yàn)前24 h 皮下注射雌二醇5 mg·kg-1，脫頸椎處死小鼠取子宮置于Locke's 溶液中漂洗干凈，剪取子宮2 cm，兩端分別固定于浴槽底部和張力換能器，置于裝有20 mL樂氏液恒溫浴槽中，溫度為37±0.1℃，通入95%O2+5%CO2，給予1.0 g的負(fù)荷，待肌條的自發(fā)收縮穩(wěn)定后即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.5 離體子宮平滑肌收縮測(cè)定

按照1.4 制備離體子宮，記錄10 min 正常收縮曲線，加入SJZTC，采用加倍累加給藥法（濃度分別為0.0625 mg·mL-1、0.1250 mg·mL-1、0.2500 mg·mL-1、0.5000 mg·mL-1、1.0000 mg·mL-1），每 次 給 藥 間 隔5 min，觀察SJZTC 對(duì)子宮自發(fā)收縮的影響。加入PGF2α（終濃度 1 mg·L-1）、Ach（1 μM）、Oxytocin（終濃度5 IU·L-1）及Bay K8644（1 μM），作用15 min 后再加入SJZTC（濃度分別為0.0625 mg·mL-1、0.1250 mg·mL-1、0.2500 mg·mL-1、0.5000 mg·mL-1、1.0000 mg·ml-1），每次給藥間隔5 min，觀察SJZTC 對(duì)PGF2α、Ach、Oxytocin及BayK8644 致子宮收縮的影響。溶媒組（Vehicle group）加入對(duì)應(yīng)的溶劑，記錄給藥前及給藥后子宮收縮曲線，統(tǒng)計(jì)給藥前5 min 及給予不同濃度SJZTC 后5 min 內(nèi)子宮的收縮幅值，計(jì)算抑制率%（IR%），統(tǒng)計(jì)平均值并與溶媒對(duì)照組進(jìn)行比較。計(jì)算方法如下：

1.6 子宮平滑肌細(xì)胞的原代培養(yǎng)

在實(shí)驗(yàn)前48 h 皮下注射雌二醇0.1 mg/每只，脫頸椎處死小鼠，消毒后剖出子宮放入含有雙抗的PBS 溶液中，將肌條剪成1-2 mm3碎糜，加入2 mL 0.025 g·L-1的膠原酶Ⅱ，轉(zhuǎn)移到錐形瓶中，于37℃水浴鍋消化1 h，隔30 min 巴氏吸管吹打5 min。加入等體積含15%血清的完全培養(yǎng)基停止消化，200 目細(xì)胞篩過濾，1000 r×10 min 離心，棄上清，完全培養(yǎng)基混懸細(xì)胞，接種入25 cm2細(xì)胞瓶培養(yǎng)，于37℃、5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

1.7 子宮平滑肌細(xì)胞鈣離子檢測(cè)

細(xì)胞傳代，以1×105/mL密度種板于黑色96孔板，于37℃、5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。棄上清，加入100 μL Calcium 6-QF 溶液，37℃孵育2 h。按需要分為溶媒組（Vehicle）、模型組（Oxytocin）和Oxytocin +SJZTC 組。Vehicle 和Oxytocin 組加入50 μL 的PBS，Oxytocin+SJZTC 組加入PBS 配制的加入SJZTC（終濃度50、25μg·mL-1），作用15 min。Flexstation?3鈣流工作站檢測(cè)動(dòng)態(tài)鈣離子變化：儀器設(shè)置成運(yùn)行20 s 后Vehicle 組加入50 μL PBS，其余各組加入縮宮素（Oxytocin）（終濃度為7 μM）50 μL，測(cè)定100 s 內(nèi)鈣離子的變化曲線，計(jì)算曲線下面積（Area under curve，AUC）。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.8 結(jié)果統(tǒng)計(jì)

圖1 SJZTC對(duì)小鼠離體子宮自發(fā)收縮幅值的影響和抑制作用

采用Graphpad Prism 5.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)用±S 表示，對(duì)多個(gè)樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用t 檢驗(yàn)，P < 0.05 具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 SJZTC對(duì)小鼠離體子宮自發(fā)收縮的影響

SJZTC（0.0625 mg·mL-1、0.1250 mg·mL-1、0.2500 mg·mL-1、0.5000 mg·mL-1、1.0000 mg·mL-1）均能減小子宮收縮幅值，隨著濃度的增加，對(duì)子宮收縮幅值抑制作用越明顯，結(jié)果見圖1A；SJZTC（0.0625 mg·mL-1、0.125 mg·mL-1、0.25 mg·mL-1、0.5 mg·mL-1、1.0 mg·mL-1）對(duì)子宮收縮幅值的抑制率%（IR%）分別為29.02± 9.71、38.40 ± 8.98、41.03 ± 8.13、51.86 ± 9.10、57.16±3.77，溶媒組（Vehicle group）對(duì)子宮收縮幅值的抑制率%（IR %）分別為6.24 ± 5.65、7.65 ± 1.84、6.52 ±2.40、9.69 ± 4.88、11.22 ± 6.48，與Vehicle group 比較，SJZTC 不同濃度組（0.0625 mg·mL-1、0.1250 mg·mL-1、0.2500 mg·mL-1、0.5000 mg·mL-1、1.0000 mg·mL-1）對(duì)子宮收縮幅值的抑制率均有顯著差異（P<0.01）。結(jié)果見圖1B。

2.2 SJZTC對(duì)PGF2α致小鼠離體子宮收縮的影響

圖2 SJZTC對(duì)PGF2α致小鼠離體子宮收縮幅值的影響和抑制作用

SJZTC（0.0625 mg·mL-1、0.1250 mg·mL-1、0.2500 mg·mL-1、0.5000 mg·mL-1、1.0000 mg·mL-1）均 能減小PGF2α誘導(dǎo)的子宮收縮幅值，隨著濃度的增加，對(duì)子宮收縮幅值抑制作用越明顯，結(jié)果見圖2A；SJZTC（0.0625 mg·mL-1、0.1250 mg·mL-1、0.2500 mg·mL-1、0.5000 mg·mL-1、1.0 mg·mL-1）對(duì)子宮收縮幅值的抑制率%（IR%）分別為13.56±4.58、27.18±4.81、38.83±6.80、49.88 ± 7.70、72.00 ± 8.16，Vehicle group 對(duì)子宮收縮幅值的抑制率%（IR%）分別為3.82±1.64、5.63±2.93、5.16 ± 3.17、5.52 ± 3.76、6.18 ± 3.91，與Vehicle group 比較，SJZTC（0.0625 mg·mL-1、0.1250 mg·mL-1、0.2500 mg·mL-1、0.5000 mg·mL-1、1.0000 mg·mL-1）對(duì)PGF2α誘導(dǎo)的子宮收縮幅值的抑制率均有顯著差異（P<0.01）。結(jié)果見圖2B。

2.3 SJZTC對(duì)Ach致小鼠離體子宮收縮的影響

SJZTC（0.0625 mg·mL-1、0.1250 mg·mL-1、0.2500 mg·mL-1、0.5000 mg·mL-1、1.0 mg·mL-1）均能減小Ach誘導(dǎo)的子宮收縮幅值，隨著濃度的增加，對(duì)子宮收縮幅值抑制作用越明顯，結(jié)果見圖3A；SJZTC（0.0625 mg·mL-1、0.1250 mg·mL-1、0.2500 mg·mL-1、0.5000 mg·mL-1、1.0000 mg·mL-1）對(duì) 子 宮 收 縮 幅 值 的 抑 制 率%（IR %）分別為10.85 ± 3.41、35.69 ± 8.57、47.50 ±8.74、61.61 ± 8.23、77.56 ± 11.98,Vehicle group 對(duì)子宮收縮幅值的抑制率%（IR %）分別為9.28±2.53、10.26±1.67、12.23±2.38、12.46±4.39、14.14±4.57，與溶媒組 比 較，SJZTC（0.1250 mg·mL-1、0.2500 mg·mL-1、0.5000 mg·mL-1、1.0000 mg·mL-1）對(duì)Ach誘導(dǎo)的子宮收縮幅值的抑制率均有顯著差異（P < 0.01）。結(jié)果見圖3B。

圖3 SJZTC對(duì)Ach致小鼠離體子宮收縮幅值的影響和抑制作用

2.4 SJZTC對(duì)Oxytocin致小鼠離體子宮收縮的影響

SJZTC（0.0625 mg·mL-1、0.1250 mg·mL-1、0.2500 mg·mL-1、0.5000 mg·mL-1、1.0000 mg·mL-1）均能減小Oxytocin 誘導(dǎo)的子宮收縮幅值，隨著濃度的增加，對(duì)子宮收縮幅值抑制作用越明顯，結(jié)果見圖4A；SJZTC（0.0625 mg·mL-1、0.1250 mg·mL-1、0.2500 mg·mL-1、0.5000 mg·mL-1、1.0 mg·mL-1）對(duì)子宮收縮幅值的抑制率%（IR%）分別為27.57±9.83、44.99±17.66、62.93±18.86、80.61 ± 12.48、87.02 ± 10.08，Vehicle group 對(duì)子宮收縮幅值的抑制率%（IR %）分別為8.13 ± 5.28、11.98 ± 5.24、15.61 ± 3.66、17.74 ± 3.96、17.43 ± 2.88，與Vehicle group 比較，SJZTC 不同濃度組（0.0625 mg·mL-1、0.1250 mg·mL-1、0.2500 mg·mL-1、0.5000 mg·mL-1、1.0000 mg·mL-1）對(duì)Oxytocin 誘導(dǎo)的子宮收縮幅值的抑制率均有顯著差異（P<0.01）。結(jié)果見圖4B。

圖4 SJZTC對(duì)Oxytocin致小鼠離體子宮收縮幅值的影響和抑制作用

圖5 SJZTC對(duì)Bay K8644致小鼠離體子宮收縮幅值的影響和抑制作用

圖6 SJZTC對(duì)Oxytocin所致原代小鼠子宮平滑肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+影響和熒光值曲線下面積

2.5 SJZTC對(duì)Bay K8644致小鼠離體子宮收縮的影響

SJZTC（0.0625 mg·mL-1、0.1250 mg·mL-1、0.2500 mg·mL-1、0.5000 mg·mL-1、1.0000 mg·mL-1）均 能減小BayK8644 誘導(dǎo)的子宮收縮幅值，隨著濃度的增加，對(duì)子宮收縮幅值抑制作用越明顯，結(jié)果見圖5A；SJZTC（0.0625 mg·mL-1、0.1250 mg·mL-1、0.2500 mg·mL-1、0.5000 mg·mL-1、 1.0 mg·mL-1）對(duì)子宮收縮幅值的抑制率%（IR %）分別為10.26 ± 5.72、21.04± 6.67、45.23±9.47、59.60±7.42、66.96±6.56，Vehicle group 對(duì)子宮收縮幅值的抑制率%（IR%）分別為2.47±1.56、4.21±2.79、7.36 ± 4.36、6.77 ± 4.63、8.15 ± 4.91，與Vehicle group 比 較，SJZTC 不 同 濃 度 組（0.0625 mg·mL-1、0.1250 mg·mL-1、0.2500 mg·mL-1、0.5000 mg·mL-1、1.0000 mg·mL-1）對(duì)BayK8644 誘導(dǎo)的子宮收縮幅值的抑制率均有顯著差異（P<0.01）。結(jié)果見圖5B。

2.6 SJZTC對(duì)子宮平滑肌細(xì)胞鈣離子含量影響

縮宮素（Oxytocin）（終濃度為7μM）能夠誘導(dǎo)小鼠子宮平滑肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+釋放，結(jié)果見圖6A；與Vehicle group 比較，模型組（Oxytocin）Ca2+的熒光值A(chǔ)UC 顯著增加（P < 0.001）；與模型組比較，SJZTC（終濃度50、25 μg·mL-1）顯著抑制縮宮素誘導(dǎo)小鼠子宮平滑肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+熒光值的AUC（P < 0.05 或P < 0.01）含量。結(jié)果見圖6B。

3 討論

原發(fā)性痛經(jīng)病理機(jī)制相關(guān)的通路主要體現(xiàn)在疼痛、炎癥及抗氧化應(yīng)激三個(gè)方面，不規(guī)則下腹疼痛是原發(fā)性痛經(jīng)患者主要的臨床癥狀，子宮痙攣性收縮是引起疼痛的主要原因，其病因與子宮組織PGF2α含量升高密切相關(guān)，PGF2α能導(dǎo)致子宮肌層血管收縮使子宮內(nèi)膜血流量不足而引起疼痛[15-16]。鈣離子（Ca2+）是調(diào)節(jié)子宮平滑肌細(xì)胞收縮的關(guān)鍵因子，當(dāng)子宮平滑肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度超過10-6M 時(shí)就會(huì)誘導(dǎo)子宮收縮[17]。細(xì)胞內(nèi)Ca2+來源主要有外Ca2+內(nèi)流和內(nèi)Ca2+釋放兩種途徑，細(xì)胞外Ca2+內(nèi)流由細(xì)胞膜上Ca2+通道的開放所介導(dǎo)，在外界因素刺激下，細(xì)胞膜去極化誘導(dǎo)通道開放，Ca2+進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，引起子宮平滑肌收縮[18]。

縮宮素與子宮平滑肌細(xì)胞膜受體結(jié)合，激活磷脂酶C（Phospholipase C，PLC）-三磷酸肌醇（Inositol triphosphate，IP3）-蛋白激酶C（Protein kinase C，PKC）系統(tǒng)[19]。PKC 能引起細(xì)胞膜上Ca2+通道的開放，細(xì)胞外Ca2+內(nèi)流；IP3 與其受體結(jié)合，引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Ca2+釋放，兩種途徑同時(shí)引起細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高，導(dǎo)致子宮平滑肌收縮[20]。本研究顯示，散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊顯著抑制縮宮素引起的子宮平滑肌條收縮的幅度，并顯著抑制縮宮素誘導(dǎo)的子宮平滑肌細(xì)胞Ca2+釋放。表明散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊對(duì)離體子宮平滑肌的舒張作用，可能與阻斷細(xì)胞膜Ca2+通道開放進(jìn)而抑制細(xì)胞外Ca2+內(nèi)流及細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Ca2+釋放有關(guān)。

原發(fā)性痛經(jīng)與PGF2α導(dǎo)致子宮收縮有關(guān)，PGF2α作用于子宮平滑肌細(xì)胞上前列受體引起細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的升高[21]，Ach 也作用于平滑肌細(xì)胞上相應(yīng)受體引起細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的升高[22]。研究顯示，散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊能夠劑量依賴性抑制PGF2α和Ach 誘導(dǎo)的子宮平滑肌條收縮的幅度，提示散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊可能是由于抑制細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的增加從而抑制離體子宮平滑肌的收縮。BayK8644 是Ca2+通道激動(dòng)劑，通過使細(xì)胞內(nèi)Ca2+增加及激活磷脂酰肌醇信號(hào)通路從而誘導(dǎo)離體子宮的節(jié)律收縮[23]。結(jié)果表明，散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊對(duì)Bay K8644引起的離體子宮平滑肌收縮具有顯著抑制作用，結(jié)果提示，散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊通過抑制Ca2+通道，進(jìn)而減少子宮平滑肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+水平。

綜上所述，散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊對(duì)子宮平滑肌收縮具有抑制作用，其機(jī)制可能與抑制細(xì)胞外Ca2+通過離子通道涌入細(xì)胞內(nèi)以及細(xì)胞內(nèi)Ca2+釋放有關(guān)。散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊對(duì)子宮平滑肌的松弛作用能夠顯著緩解因子宮收縮而導(dǎo)致的痛經(jīng)。本課題組后續(xù)將進(jìn)一步研究散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊成分對(duì)子宮平滑肌收縮影響，探討其影響子宮收縮的物質(zhì)基礎(chǔ)。