徐良，聞海波，孫光興，馬學(xué)艷，金武 ，

華丹2，顧若波1、2、3*，徐跑1、2、3*(1.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 無錫漁業(yè)學(xué)院，江蘇 無錫 214081；2.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部淡水魚類遺傳育種與養(yǎng)殖生物學(xué)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室，江蘇 無錫 214081；3.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心 中美淡水貝類種質(zhì)資源保護(hù)及利用國(guó)際聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室，江蘇 無錫 214081)

眼斑擬石首魚Sciaenopsocellatus，又名美國(guó)紅魚、紅鼓魚、黑斑紅鱸、斑點(diǎn)尾鱸等，屬鱸形目Perciformes石首魚科Sciaenidae擬石首魚屬Sciaenops，原主要分布于美國(guó)東南海岸和墨西哥沿岸，為廣溫廣鹽性魚類。經(jīng)人工馴養(yǎng)，可以完全適應(yīng)淡水[1]。自1991年中國(guó)首次引進(jìn)，至1995年成功培育出第一代仔魚，眼斑擬石首魚已成為中國(guó)重要的養(yǎng)殖魚類之一[2]。眼斑擬石首魚為肉食性魚類，人工養(yǎng)殖條件下可攝食配合飼料。關(guān)于眼斑擬石首魚對(duì)蛋白質(zhì)和脂肪的需求國(guó)內(nèi)外已有相關(guān)研究，但對(duì)于脂肪需求量，不同研究者存在較大差異：Brinkmeyer等[3]以鯡魚油為脂肪源進(jìn)行投喂試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，脂肪含量為18%的飼料能使眼斑擬石首魚幼魚達(dá)到最佳生長(zhǎng)速度；Webb等[4]研究表明，飼料中10%的脂肪就能滿足眼斑擬石首魚的生長(zhǎng)需要；李雪菲等[5]報(bào)道了以同比例豆油和魚油混合為脂肪源時(shí)，眼斑擬石首魚的需求量為7.19%～9.17%。

聞海波等[6]研究表明，眼斑擬石首魚具有作為中國(guó)引進(jìn)用于培育紫黑珍珠的新品種——紫黑翼蚌替代寄主魚的潛力，但在寄生和淡水低滲雙重脅迫下，眼斑擬石首魚在寄生后出現(xiàn)極高的死亡率。另一方面，基于自主創(chuàng)建新型體外培養(yǎng)技術(shù)，添加眼斑擬石首魚血漿可實(shí)現(xiàn)紫黑翼蚌鉤介幼蟲的變態(tài)發(fā)育，但變態(tài)率較低，比較分析結(jié)果表明，血漿中多不飽和脂肪酸二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid，DHA)和二十二碳五烯酸(docosapentaenoic acid，DPA)的含量可能是影響幼蟲變態(tài)率的關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)限制因子[7]。因此，擬通過提高眼斑擬石首魚血液中多不飽和脂肪酸含量從而提高幼蟲的變態(tài)率。由于大部分海水魚缺乏脂肪酸去飽和酶和(或)延長(zhǎng)酶，無法合成HUFAs或合成的HUFAs量有限，只能通過飼料攝入HUFAs[8-9]。 魏廣蓮等[10]研究表明，通過添加高含量的不飽和脂肪酸，可以顯著增加刀鱭CoilianasusTemminck et schlegel魚體和血液中不飽和脂肪酸的含量。

為確認(rèn)魚油添加量對(duì)眼斑擬石首魚脂肪代謝和血漿營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)的影響，本研究中設(shè)計(jì)了3種魚油添加量對(duì)眼斑擬石首魚的營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化試驗(yàn)，比較了不同組的魚體生長(zhǎng)指標(biāo)和血漿營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)的差異，尤其是血漿中多不飽和脂肪酸的含量差異，系統(tǒng)地測(cè)定了胃、消化盲囊、腸道及肝臟的脂肪酶活性及脂質(zhì)過氧化物含量，探討不同魚油添加量對(duì)魚體脂肪代謝的影響。本研究旨在確定眼斑擬石首魚的適宜魚油添加量，以提高魚體血漿DHA和DPA含量，提高影響紫黑翼蚌鉤介幼蟲變態(tài)所需的關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)因子，為眼斑擬石首魚寄生前強(qiáng)化培育提供科學(xué)依據(jù)，從而提高紫黑翼蚌鉤介幼蟲體外培養(yǎng)和寄生的變態(tài)率及紫黑翼蚌產(chǎn)量，促進(jìn)中國(guó)紫黑珍珠養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)化發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)用眼斑擬石首魚購(gòu)自福建漳州，體質(zhì)量為34～56 g，養(yǎng)殖試驗(yàn)在江陰市申港三鮮養(yǎng)殖有限公司進(jìn)行，投喂試驗(yàn)前暫養(yǎng)于水泥池中，養(yǎng)殖水體鹽度為4，用普通海水魚類配合飼料(常熟泉興營(yíng)養(yǎng)添加劑有限公司)進(jìn)行投喂馴化。精制魚油購(gòu)自安徽省新洲海洋生物制品有限公司，EPA相對(duì)含量為36%，DHA為24%。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)飼料的制備 3組試驗(yàn)飼料中包括魚油(4%、7%、9%)，淀粉(10%、7%、5%)，魚粉45%，豆粕15%，菜粕10%，磷脂粉2%，維生素添加劑1%，磷酸二氫鈣2%，分別設(shè)計(jì)等氮等能的3種飼料，試驗(yàn)飼料營(yíng)養(yǎng)水平如表1所示。用飼料1(魚油添加量為4%)、飼料2(魚油添加量為7%)、飼料3(魚油添加量為9%)投喂眼斑擬石首魚，8周后采樣分析。其中，3種飼料的水分、粗蛋白質(zhì)和粗灰分均無顯著性差異(P>0.05)，但粗脂肪含量有顯著性差異(P<0.05)。

表1 試驗(yàn)飼料營(yíng)養(yǎng)水平

Tab1 Nutrient levels of experimental dietsw/%

魚油添加量fish oil level水分moisture粗蛋白質(zhì)crude protein粗脂肪crude Fat粗灰分crude ash46.96±0.1145.23±0.158.21±0.12a14.12±0.0475.62±0.1144.49±0.9312.05±0.03b13.74±0.0495.52±0.0644.61±0.0713.51±0.12c13.87±0.08

注: 同列中標(biāo)有不同字母者表示組間有顯著性差異(P<0.05)，標(biāo)有相同字母者表示組間無顯著性差異(P>0.05)，下同

Note: Means followed by different letters in the same column are significant differences at the 0.05 probability，and the means followed by the same letters in the same column are not insignificant differences at the 0.05 probability，et sequentia

1.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及養(yǎng)殖管理 馴養(yǎng)1周后，選取健康無傷的個(gè)體270尾，體質(zhì)量為(43.40±6.40)g，體長(zhǎng)為(13.69±0.83)cm。在室內(nèi)同一水泥池中設(shè)置9只網(wǎng)箱(1 m×1 m×1 m)。試驗(yàn)共分3組，分別投喂飼料1、飼料2和飼料3，每個(gè)網(wǎng)箱放養(yǎng)30尾，每組3個(gè)重復(fù)。養(yǎng)殖試驗(yàn)共進(jìn)行8周。采用定量投喂方式，于8:00和16:00各投喂一次，初始投喂量為體質(zhì)量的3.5%，之后根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整；定期進(jìn)行水質(zhì)測(cè)量和換水，保證水體氨氮小于0.2 mg/L，亞硝酸鹽小于0.01 mg/L，24 h氣泡式增氧。

1.2.3 飼料一般營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定 采用105 ℃烘干法(GB5009.3—2003)測(cè)定飼料水分含量；采用馬福爐 560 ℃ 灼燒法(GB 5009.4—2003)測(cè)定粗灰分含量；采用微量凱氏定氮法(GB 5009.5—2003)測(cè)定粗蛋白質(zhì)含量；采用全脂肪法(GB 5009.6—2003)測(cè)定粗脂肪含量。

1.2.4 生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)定與計(jì)算 飼養(yǎng)8周后，禁食24 h開始采樣。先測(cè)量所有魚的體質(zhì)量和體長(zhǎng)，然后從每個(gè)重復(fù)隨機(jī)撈取4尾，測(cè)量體長(zhǎng)、體質(zhì)量。在低溫下進(jìn)行解剖，取肌肉、內(nèi)臟、肝臟等，用濾紙吸干后分別稱量?jī)?nèi)臟、肝臟質(zhì)量，用于計(jì)算增重率(WGR)、肝體指數(shù)(HSI) 、臟體指數(shù)(VSI) 和肥滿度(CF)。稱重后于-20 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩Ｓ?jì)算公式如下：

HSI=Wh/Wb×100%，

VSI=Wv/Wb×100%，

CF=Wb/L3×100%。

其中：Wb為試驗(yàn)?zāi)~體質(zhì)量(g) ；Wh為試驗(yàn)?zāi)~體肝臟質(zhì)量(g)；Wv為試驗(yàn)?zāi)~體內(nèi)臟質(zhì)量(g)；L為試驗(yàn)?zāi)~體長(zhǎng)(cm)。

1.2.5 脂肪代謝相關(guān)酶活性及脂質(zhì)過氧化物含量測(cè)定 從每個(gè)網(wǎng)箱隨機(jī)取4尾魚，每個(gè)處理共12尾。冰上解剖，分離肝臟。同一處理中將每3尾魚的肝臟分別剪碎等量均勻混合，保存于-20 ℃冰箱中，用于脂肪代謝相關(guān)酶活性及脂質(zhì)過氧化物(LPO)含量測(cè)定。將組織樣品與PBS按1∶9(mg∶mL)比例加入玻璃勻漿器中，冰上充分研磨后將勻漿液以5000g離心5～10 min，取上清檢測(cè)。樣品處理和測(cè)定方法參照魏廣蓮等[10]的方法。測(cè)定指標(biāo)包括脂肪酶(LPS)、總酯酶(TLP)、肉堿軟脂?；D(zhuǎn)移酶-Ⅰ(CPT-Ⅰ)、肉堿軟脂酰基轉(zhuǎn)移酶-Ⅱ(CPT-Ⅱ)、乙酰CoA羧化酶(ACC)活性及脂質(zhì)過氧化物(LPO)含量。測(cè)定試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.2.6 肝臟組織切片觀察 從每組隨機(jī)取2尾魚，解剖分離其肝臟，樣品處理和測(cè)定參照魏廣蓮等[11]的方法，用Bouin’s液固定、清洗及脫水，用二甲苯透明浸蠟及石蠟包埋，再用LeicaRM2235切片機(jī)連續(xù)切片，切片厚度6 μm，H.E染色，中性樹膠封片，在光學(xué)顯微鏡下觀察并拍照。

1.2.7 血漿生化指標(biāo)測(cè)定 從每個(gè)網(wǎng)箱隨機(jī)取4尾魚，用濕毛巾完全覆蓋魚體，從尾靜脈采血。將采集的血液以3000 r/min離心5 min，吸取上清液，于-80 ℃冰箱中保存待測(cè)。生化指標(biāo)采用日立 7600-110 型全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定，主要測(cè)定血漿總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、膽固醇(TCH)、血糖(GLU)、低密度脂蛋白 (LDL)、高密度脂蛋白 (HDL)、 谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST) 和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)。

1.2.8 血漿脂肪酸組成測(cè)定 選取4%和7%魚油組眼斑擬石首魚，從尾靜脈采血，以3000 r/min離心5 min，吸取上清液，將同組每5尾魚血漿等量混合作為1個(gè)試樣，每個(gè)試樣取5 mL用于血漿脂肪酸組成測(cè)定，每組3個(gè)重復(fù)。先將血漿樣品冷凍干燥后，加入十一碳酸(C11：0)標(biāo)準(zhǔn)品作為內(nèi)標(biāo)，振蕩、提取3次，過濾后揮干，采用GC/FID方法在日本島津(Shimadzu)GC-2010氣相色譜儀上進(jìn)行定量分析。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(mean ± S.E.)表示。采用 SPSS 20.0軟件對(duì)組間數(shù)據(jù)進(jìn)行單因子方差分析(One-way ANOVA)，采用Duncan法進(jìn)行組間多重比較，顯著性水平設(shè)為 0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 眼斑擬石首魚生長(zhǎng)指標(biāo)的變化

從表2可見：各處理組眼斑擬石首魚成活率均在70%以上，最高為7%魚油添加組；4%和7%魚油添加組存活率、體長(zhǎng)、末體質(zhì)量、增重率均顯著高于9%魚油添加組(P<0.05)；4%魚油添加組肝體指數(shù)、臟體指數(shù)顯著低于9%魚油添加組(P<0.05)；3組肥滿度無顯著性差異(P>0.05)。

表2 魚油添加量對(duì)眼斑擬石首魚生長(zhǎng)指標(biāo)的影響Tab.2 Effect of dietary fish oil levels on the growth performance of red drum

2.2 眼斑擬石首魚脂肪代謝的變化

從圖1可見：不同魚油處理組間每種組織的脂肪酶活性無顯著性差異(P>0.05)；組織間差異上，3個(gè)魚油處理組腸脂肪酶活性均顯著低于盲囊、肝、胃(P<0.05)。

從圖2可見：不同魚油處理組間每種組織的總脂酶活性無顯著性差異(P>0.05)；組織間差異上，4%魚油添加組腸總脂酶活性顯著低于肝、胃、盲囊(P<0.05)且盲囊總脂酶活性顯著低于胃(P<0.05)，7%和9%魚油添加組腸和盲囊總脂酶活性均顯著低于肝、胃(P<0.05)。

從圖3可見：4%、7%魚油添加組腸脂質(zhì)過氧化物含量顯著低于9%組(P<0.05)；組織間差異上，4%、7%、9%魚油添加組腸脂質(zhì)過氧化物含量均顯著低于盲囊、肝、胃(P<0.05)。

從圖4可見：不同魚油處理組間每種組織的CPT-Ⅰ活性無顯著性差異(P>0.05)；組織間差異上，4%魚油添加組腸、盲囊CPT-Ⅰ活性顯著高于肝、胃(P<0.05)，7%魚油添加組腸CPT-Ⅰ活性顯著高于肝、胃(P<0.05)且盲囊CPT-Ⅰ活性顯著高于胃(P<0.05)，9%魚油添加組腸CPT-Ⅰ活性顯著高于盲囊、肝、胃(P<0.05)且盲囊CPT-Ⅰ活性顯著高于肝、胃(P<0.05)。

從圖5可見：不同魚油處理組間每種組織的CPT-Ⅱ活性無顯著性差異(P>0.05)；組織間差異上，4%、7%、9%魚油添加組的腸CPT-Ⅱ活性顯著高于盲囊、肝、胃(P<0.05)且盲囊、肝CPT-Ⅱ活性顯著高于胃(P<0.05)。

從圖6可見：4%、9%魚油添加組肝乙酰CoA羧化酶活性顯著低于7%魚油添加組(P<0.05)；組織差異上，4%和7%魚油添加組腸乙酰CoA羧化酶活性顯著低于肝、胃(P<0.05)，9%魚油添加組腸、盲囊、肝顯著低于胃(P<0.05)。

2.3 眼斑擬石首魚肝臟組織的變化

魚油添加對(duì)各處理組魚肝臟組織脂肪和肝變產(chǎn)生顯著影響(表3)。從圖7可見：4%魚油添加組魚體肝細(xì)胞大小基本相似，呈多邊形、邊界清楚，細(xì)胞核位于細(xì)胞的中央，呈圓形，胞間脂滴30%～40%，肝臟比較正常(圖-A、B)；7%魚油添加組肝細(xì)胞大部分呈多邊形，細(xì)胞核位于細(xì)胞中央，部分出現(xiàn)偏移，胞間脂滴60%～70%，肝臟結(jié)構(gòu)發(fā)生變化(圖-C、D)；9%魚油添加組肝細(xì)胞透明，空泡化嚴(yán)重，排列不整齊，細(xì)胞大部分空間被脂滴占據(jù)，細(xì)胞核濃縮，出現(xiàn)細(xì)胞核偏移，肝竇狹窄，胞間脂滴大小不一，數(shù)量為70%以上，肝臟結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯變化(圖-E)。

表3 魚油添加量對(duì)眼斑擬石首魚肝臟組織的影響

Tab.3 Effect of dietary fish oil levels on the liver structure in the red drum

魚油添加量/% fish oil level脂滴數(shù)量/% amount of lipid肝變程度degree of liver change430～40+760～70++9>70+++

注：+表示肝臟脂肪聚集程度一般；++表示肝臟脂肪聚集程度較高；+++表示肝臟脂肪聚集程度高

Note:+ indicates the general accumulation of liver fat; + + indicates the higher aggregation degree of liver fat; +++ indicates the highest aggregation degree of liver fat

2.4 眼斑擬石首魚血液生化指標(biāo)的變化

從表4可見：4%和7%魚油添加組血糖含量顯著高于9%魚油添加組(P<0.05)；4%魚油添加組谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性和高密度脂蛋白含量顯著低于9%魚油添加組(P<0.05)；4%魚油添加組甘油三酯含量顯著高于9%魚油添加組(P<0.05)；4%魚油添加組谷草轉(zhuǎn)氨酶活性顯著低于9%魚油添加組(P<0.05)；3組總蛋白、總膽固醇和低密度脂蛋白含量均無顯著性差異(P>0.05)。

2.5 眼斑擬石首魚血漿脂肪酸組成的變化

由表5可知，4%和7%魚油添加組血漿脂肪酸組成無顯著性差異(P>0.05)。

表4 魚油添加量對(duì)眼斑擬石首魚血漿生理生化指標(biāo)的影響Tab.4 Effect of dietary fish oil levels on blood plasma physiological and biochemical indices of red drum

表5 魚油添加量對(duì)眼斑擬石首魚血漿脂肪酸組成的影響

Tab.5 Effect of dietary fish oil levels on blood plasma fatty acid composition in the red drum

mg/L

3 討論

3.1 飼料魚油添加量對(duì)眼斑擬石首魚生長(zhǎng)的影響

脂肪是魚類重要的營(yíng)養(yǎng)源，對(duì)于如眼斑擬石首魚這樣的溫水性魚類來說，脂肪一般以氧化供能的形式發(fā)揮作用[12]。假如飼料的蛋白質(zhì)過高，即可降低對(duì)脂肪的依賴。飼料中適宜的脂肪量是魚類健康生長(zhǎng)的保證。魚類長(zhǎng)期攝食高脂肪飼料時(shí)，極易引起代謝紊亂，肝臟脂肪聚集過度，從而影響蛋白質(zhì)的吸收，降低免疫力，引發(fā)疾病，嚴(yán)重時(shí)甚至導(dǎo)致死亡。本試驗(yàn)中，4%和7%魚油添加組的終末體長(zhǎng)、體質(zhì)量及增重率均顯著高于9%魚油添加組。這表明，9%魚油添加組飼料脂肪過量，使得眼斑擬石首魚的生長(zhǎng)可能受到抑制。脂肪過量抑制生長(zhǎng)也出現(xiàn)在對(duì)大菱鲆Scophthalmusmaximus、軍曹魚Rachycentroncanadum、歐鰨Soleasenegalensis和紅鰭東方鲀Fuguobscurus的研究上[13-16]。然而也有不受飼料脂肪水平影響及飼料脂肪水平增加能促進(jìn)生長(zhǎng)的報(bào)道[17-19]。目前，關(guān)于眼斑擬石首魚脂肪的需求量已有報(bào)道。Tucker等[12]試驗(yàn)證明，眼斑擬石首魚幼魚能有效利用12.7%的鯡魚油和5%豆油的飼料。馮健等[20]報(bào)道了以不同比例玉米油和魚油混合為脂肪源，脂肪量分別為7.98%和11.92%的兩組眼斑擬石首魚在第5周時(shí)死亡率快速上升。本試驗(yàn)中魚油添加量為4%和7%的兩組生長(zhǎng)良好，但仍出現(xiàn)一定的死亡率，9%魚油組眼斑擬石首魚在第50天時(shí)死亡率明顯上升。本試驗(yàn)結(jié)果與Tucker等[12]、馮健等[20]的試驗(yàn)結(jié)果有所差異，其原因可能是本試驗(yàn)中養(yǎng)殖密度過大，眼斑擬石首魚在擁擠脅迫下免疫能力出現(xiàn)一定程度的降低。魚油添加過量，高脂肪飼料長(zhǎng)期攝食會(huì)使眼斑擬石首魚幼魚產(chǎn)生脂肪肝，影響其生長(zhǎng)率。

3.2 飼料中魚油添加量對(duì)眼斑擬石首魚肝臟脂肪代謝的影響

脂肪酶廣泛存在于動(dòng)植物中，動(dòng)物體內(nèi)脂肪酶大都存在于胰臟和脂肪組織中?？傊赴ǖ鞍踪|(zhì)酶和肝酯酶，作用主要為催化甘油三酯水解[21]。UFA易氧化分解，產(chǎn)生的脂質(zhì)過氧化物對(duì)細(xì)胞有毒性，脂質(zhì)過氧化物可作為脂質(zhì)過氧化損傷程度的指標(biāo)之一[22]。肉堿轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)是脂肪分解的重要一環(huán)，肉堿軟脂?；D(zhuǎn)移酶-Ⅰ和肉堿軟脂?；D(zhuǎn)移酶-Ⅱ是其重要組成酶，也是脂肪分解的限速酶[10]。本研究中表明，眼斑擬石首魚在腸道的脂肪分解速度低于盲囊、肝、胃。乙酰CoA羧化酶可以催化乙酰輔酶A，生成丙二酸單酰輔酶A，參加脂肪酸合成中二碳單位的供體提供過程并具有酯解作用，制約著脂肪酸合成第一階段的速度。乙酰CoA羧化酶的活性受到飼料組成的影響，Rollin等[23]報(bào)道了高脂飼料顯著抑制虹鱒Oncorhynchusmykiss肝臟乙酰CoA羧化酶的活性。這與本試驗(yàn)中對(duì)肝臟乙酰CoA羧化酶的研究結(jié)果一致。

魚體消化吸收的脂類主要以甘油三酯的形式存儲(chǔ)于肝臟、腸道、腹腔和肌肉等組織中，也分布于頭蓋腔、皮下及腹側(cè)等其他器官中。肝臟是魚類脂肪代謝的重要器官，肝臟中沉積大量脂肪會(huì)改變肝細(xì)胞正常的組織形態(tài)，影響其生物學(xué)功能。大部分肉食性魚類肝臟與脂肪代謝有著不可分割的關(guān)系，體內(nèi)肝臟脂肪的儲(chǔ)存量對(duì)魚類越冬和性腺發(fā)育具有十分重要的作用[24]。在對(duì)大西洋鱈Gadusmorhua、真鯛Pagrosomusmajor、眼斑擬石首魚的研究中，飼料脂肪含量的增加會(huì)導(dǎo)致肝臟脂肪的增加，細(xì)胞核的偏移程度也一定程度上代表肝臟損傷程度[5,25-26]。谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶的升高往往伴隨著肝臟細(xì)胞的受損程度加大[18-21]，這在本試驗(yàn)中也得到了驗(yàn)證。結(jié)合本研究中脂肪酶的顯著性差異認(rèn)為，4%魚油組肝臟比較健康，其余兩組肝臟均出現(xiàn)一定程度地?fù)p傷。

3.3 飼料中魚油添加量對(duì)眼斑擬石首魚血漿脂肪酸組成的影響

本試驗(yàn)中采用高含量不飽和脂肪酸魚油作為脂肪源，與其他動(dòng)植物油相比，∑n-3PUFA的含量比較豐富。有關(guān)血漿脂肪酸的研究大多集中在哺乳動(dòng)物和人類，研究表明，飼料中添加魚油可以導(dǎo)致大鼠Rattusnorvegicus、母豬Yorkshire血漿中∑n3PUFA增加[27-28]。對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物脂肪酸的研究中，一般選取肝臟和肌肉，對(duì)于血漿脂肪酸的報(bào)道大多與寄生蟲有關(guān)。聞海波[7]文獻(xiàn)中所報(bào)道的眼斑擬石首魚血漿DPA和DHA含量分別為(104.60±3.58)、(1272.10±51.22)mg/L，而本試驗(yàn)中眼斑擬石首魚血漿DHA和DPA含量顯著提高，且均達(dá)到其2倍水平。

4 結(jié)語

本研究中眼斑擬石首魚營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化所需脂肪在8%～12%，其中最佳魚油添加量為4%。在飼料總脂肪8.21%條件下，即添加4%魚油(DHA含量24%)有利于眼斑擬石首魚的生長(zhǎng)及血漿營(yíng)養(yǎng)、DHA與DPA含量增加，為進(jìn)一步提高紫黑翼蚌體外培養(yǎng)和寄生繁育效率奠定了基礎(chǔ)。而飼料13.51%總脂肪(添加9%魚油)會(huì)造成眼斑擬石首魚肝臟損傷，不利于生長(zhǎng)，降低了脂肪代謝水平。