傅 敏 劉旦丹 梁樺才

（羅定市疾病預防控制中心 廣東羅定 527200）

1 前言

禽流感病毒屬甲型流感病毒，主要發(fā)生于禽類，但人接觸感染了禽流感病毒的禽類及其排泄物也會感染和傳播禽流感。據(jù)統(tǒng)計，確診為禽流感的人中超過80%曾經接觸過禽類[1]。廣東位于候鳥遷徙路線上，而且人口密集、活禽市場多、禽類種類及數(shù)量多，發(fā)生禽流感疫情風險較大[2]。根據(jù)原廣東省衛(wèi)生計生委《廣東省禽類市場環(huán)境禽流感病毒污染季節(jié)性監(jiān)測方案（2015 年版）》（粵衛(wèi)辦函〔2015〕559 號）和云浮市疾病預防控制中心《禽類市場環(huán)境禽流感病毒污染應急監(jiān)測工作安排》（云疾控〔2015〕48號）要求，羅定市疾病預防控制中心于2016年11月—2019年4月對活禽市場外環(huán)境禽流感病毒污染狀況進行了監(jiān)測，現(xiàn)將結果報告如下。

2 材料與方法

2.1 標本采集

選擇羅定市7家市場的活禽檔口作為監(jiān)測點，于2016年11月—2019年4月采集200份樣本。采集樣本類型包括宰殺或擺放禽肉案板表面的擦拭樣本、籠具表面擦拭樣本、禽類糞便、禽類飲水、清洗禽類的污水等。

2.2 檢測方法

采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應（Real-time PCR）技術檢測禽流感病毒。提取流感病毒核糖核酸（RNA）后，首先對流感病毒A型通用引物核酸進行檢測，若為陽性，再對流感病毒H5、H7、H9亞型進行檢測，檢測結果及時登記。

2.3 統(tǒng)計學分析

從“傳染病監(jiān)測技術平臺信息管理系統(tǒng)”下載數(shù)據(jù)，再在Excel軟件中進行整理，然后通過SPSS 24.0軟件進行統(tǒng)計分析。A型陽性檢出率比較一般采用皮爾遜卡方檢驗；若有單元格期望計數(shù)小于5，采用費希爾精確檢驗。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

3 結果

3.1 不同年份活禽市場外環(huán)境禽流感病毒監(jiān)測結果

2016—2019年共檢出A型陽性樣本57例，陽性率為28.50%，其中2016年、2017年陽性率較高，分別為57.14%和33.87%，而2018年陽性率最低，只有15.71%，不同年份陽性檢出率差異有統(tǒng)計學意義（χ2=18.473，P=0.000<0.05）。在所有 A 型陽性樣本中檢出H9亞型陽性比例最高（18.5%），其次為H5亞型（10.00%），H7 亞型最低（2.5%），詳見表 1。

表1 羅定市2016—2019年活禽市場外環(huán)境禽流感病毒

3.2 不同采樣點活禽市場外環(huán)境禽流感病毒監(jiān)測結果

羅定市平南市場、羅定大新市場和羅定羅城鎮(zhèn)城東市場A型流感病毒陽性率位居前3，陽性率分別為45.65%、40.91%和34.38%；騰筆生力涼亭禽業(yè)有限公司和羅定市孖塘市場陽性率較低，分別只有0.00%和6.67%，不同采樣點陽性率差異有統(tǒng)計學意義（檢驗值=21.794，P=0.001<0.05），詳見表 2。

表2 羅定市2016—2019年活禽市場外環(huán)境禽流感病毒

3.3 不同樣本活禽市場外環(huán)境禽流感病毒監(jiān)測結果

宰殺或擺放禽肉案板表面的擦拭樣本、清洗禽類的污水、籠具表面擦拭樣本A型陽性檢出率位居前三，陽性率分別為46.07%、33.33%和23.21%，而禽類飲水和糞便樣本陽性率只有0.00%和3.92%，不同樣本陽性率差異有統(tǒng)計學意義（檢驗值=33.339，P=0.000<0.05），詳見表 3。

表3 羅定市2016—2019年活禽市場外環(huán)境禽流感病毒

4 討論

禽流感病毒基因組由可編碼不同蛋白質的8節(jié)段單股負鏈RNA構成，基因重組能力非常強。由于活禽市場集中了來自不同區(qū)域的禽類，加上混合圈養(yǎng)，衛(wèi)生與通風條件不佳，使禽流感病毒基因重組產生新的亞型風險大大增加，例如，H5N6病毒基因就是由H5N1、H6N6 2種病毒基因重組產生的[3]?？梢姡磺萘鞲胁《緡乐匚廴镜幕钋菔袌龅挠绊懯侨饲萘鞲斜l(fā)的高危因素。

本研究結果顯示，2016—2019年羅定市活禽市場外環(huán)境禽流感病毒A型陽性檢出率為28.50%，略高于廣東省各地市2012—2015年外環(huán)境禽流感病毒A型陽性率的24.23%；H9、H5陽性率分別為18.50%和10.00%，也明顯高于廣東省各地市2012—2015年外環(huán)境禽流感病毒對應亞型的13.53%和3.70%；只有H7陽性率為2.50%，低于廣東省各地市2012—2015年外環(huán)境禽流感病毒對應亞型的3.89%。H9為陽性率最高亞型，H5居次，H7最低，這個順序與河源市情況[4]類似。

羅定市不同年份、不同市場、不同樣本禽流感病毒陽性檢出率存在明顯差別。2016年和2017年A型陽性率明顯高于2018年和2019年，表明羅定市禽流感病毒污染狀況近2年有明顯改善。不同市場禽流感病毒污染狀況差異反映了各市場衛(wèi)生條件與管理的差別，禽流感病毒污染嚴重的市場應加強消毒、休市、準入檢疫措施。不同樣本檢出陽性率差異反映了禽類處理方面的一些差別：案板重復使用、清洗不徹底等，而籠具和清洗禽類的污水容易被污染，其他地區(qū)也有類似情況。

綜上所述，羅定市活禽市場外環(huán)境存在禽流感病毒污染，雖然近2年情況有明顯改善，仍需加強禽流感病毒監(jiān)測，活禽市場應加強消毒、清掃、定期休市及市場內活禽不過夜措施。