黃建華,余成蛟,辛鵬程
(甘肅省天水市麥積區(qū)畜牧獸醫(yī)事務(wù)服務(wù)中心,甘肅 天水 741020)
多殺性巴氏桿菌是一種革蘭氏陰性短桿菌,瑞氏染色常能見(jiàn)兩極濃染。多殺性巴氏桿菌病是可引起多種動(dòng)物和人發(fā)病的重要共患傳染病,易感染雞、豬、牛等家養(yǎng)畜禽,常導(dǎo)致動(dòng)物因發(fā)生出血性敗血癥和傳染性肺炎死亡[1]。本菌常存在于多種健康動(dòng)物的口腔和咽部黏膜,可引起多種畜禽巴氏桿菌病,在臨床上表現(xiàn)為出血性敗血癥、傳染性肺炎或局部慢性感染等。多殺性巴氏桿菌在鮮血培養(yǎng)基和血清平板上生長(zhǎng)良好,無(wú)溶血活性,普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)不良[2],對(duì)小鼠和家兔有高度致病性。
豬巴氏桿菌病又稱(chēng)“豬肺疫”、“鎖喉風(fēng)”或“腫脖子病”等,是由多殺性巴氏桿菌(Pasteurella multocida)引起豬的一種急性、熱性傳染病。急性病例為出血性敗血病、咽喉炎和肺炎的病狀,慢性病例主要為慢性肺炎癥狀,散發(fā)性發(fā)生[3]。
2019年10月,甘肅天水市甘谷縣某養(yǎng)豬場(chǎng)發(fā)生了以腹瀉、咳嗽、呼吸困難為主要癥狀的疾病,并有一定數(shù)量的肥育豬死亡。經(jīng)臨床觀察、剖檢變化及實(shí)驗(yàn)室微生物學(xué)檢測(cè)確診為多殺性巴氏桿菌感染所致。通過(guò)藥敏試驗(yàn),選擇敏感藥物對(duì)發(fā)病豬進(jìn)行治療,同時(shí)采取綜合性防制措施,在最短的時(shí)間內(nèi)有效控制了病情?,F(xiàn)將該病的診治情況介紹如下。
2019年10月,甘肅天水市甘谷縣某養(yǎng)豬場(chǎng)發(fā)生一定數(shù)量的肥育豬死亡,主要表現(xiàn)為精神萎靡不振、腹瀉,食欲減退或廢絕,呼吸困難、咳嗽,寒戰(zhàn),可視黏膜發(fā)紺,耳根、頸、腹等部皮膚出現(xiàn)紫紅色斑,淋巴結(jié)腫大。
該豬場(chǎng)有肥育豬1 000頭,其中45~60 kg肥育豬表現(xiàn)臨床癥狀的有近180頭,發(fā)病率為18%;死亡54頭,病死率為30%。
發(fā)病豬主要表現(xiàn)呈犬坐、犬臥姿勢(shì),弓背,被毛粗亂無(wú)光,精神萎靡不振,眼窩下陷,腹瀉,食欲減退或廢絕,呼吸困難、咳嗽,鼻流少量黏膿性分泌物,可視黏膜發(fā)紺,耳根、頸、腹等部皮膚出現(xiàn)紫紅色斑;體溫40~42℃,頜下淋巴結(jié)腫大;聽(tīng)診胸部有摩擦音,觸診胸部敏感。病程3~5 d,病死率較高。
依據(jù)發(fā)病豬臨床癥狀[3],初步懷疑多殺傷性巴氏桿菌所引起的“豬肺疫”?,F(xiàn)場(chǎng)對(duì)病死豬和瀕死豬進(jìn)行剖檢診斷;采集被剖檢的病死豬和瀕死豬的心、肺、肝、脾、腎臟和瀕死豬耳靜脈血液5 mL送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)、分離鑒定和藥敏試驗(yàn)。
剖檢的病死豬和瀕死豬各5頭,均有不同程度的脫水,胸腔及心包積液明顯,心外膜有出血斑點(diǎn),胸腔及心包積液,纖維素滲出;肺臟充血、水腫,肺門(mén)淋巴結(jié)出血,肺內(nèi)有白色膿性分泌物;肝臟明顯腫大;脾臟出血點(diǎn);腸臌氣明顯,胃腸黏膜有卡他性或出血性炎癥,胃底部出血;腎臟腫大,皮質(zhì)、髓質(zhì)腎乳頭出血;咽喉部及周?chē)M織腫脹明顯,切開(kāi)皮下有大量淡黃色漿液,咽喉部黏膜因炎性充血、出血、水腫而增厚,喉頭有出血點(diǎn),黏膜高度腫脹,咽喉部淋巴結(jié)呈漿液性出血炎癥。
3.2.1 涂片鏡檢 將采集被剖檢的病死豬和瀕死豬的心、肺、肝、脾、腎臟樣品進(jìn)行革蘭氏染色,肝臟和肺臟涂片呈陰性小桿菌、瑞氏染色可見(jiàn)卵圓形、兩極濃染的短桿菌,即可初步診斷為巴氏桿菌[2]。
3.2.2 細(xì)菌分離培養(yǎng) 無(wú)菌操作將病料心、肺、肝、脾、腎臟樣品接種至伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱及鮮血瓊脂培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)18~24 h后觀察。結(jié)果在鮮血瓊脂平板上,肝臟和肺臟中可長(zhǎng)出圓形、光滑、濕潤(rùn)的露珠樣小菌落,但不溶血。在伊紅美藍(lán)瓊脂上產(chǎn)生黑色帶金屬閃光的菌落;麥康凱培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)。
3.2.3 生化試驗(yàn) 從鮮血瓊脂培養(yǎng)基上挑取單個(gè)可疑菌落重新用革蘭氏和瑞氏染色,顯微鏡檢查。可見(jiàn)卵圓形、兩極濃染的短桿菌,革蘭氏染色陰性小桿菌。
從鮮血瓊脂培養(yǎng)基上挑取單個(gè)可疑菌落轉(zhuǎn)培養(yǎng)進(jìn)一步分離純化后,接種于各種生化發(fā)酵管中,37℃,培養(yǎng)18~24 h觀察。結(jié)果見(jiàn)表1。
表1 生化試驗(yàn)結(jié)果
離心分離出的血清經(jīng)多殺性巴氏桿菌(PMT)ELISA檢測(cè)試劑盒(上海仁捷生物科技有限公司)檢測(cè)呈陽(yáng)性。
結(jié)合發(fā)病豬和病死豬臨床癥狀、現(xiàn)場(chǎng)剖檢[4-5]和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),確診為多殺性巴氏桿菌[3-6]感染所致。
藥敏紙片購(gòu)自杭州微生物試劑有限公司。采用常規(guī)紙片法[7],用青霉素G鉀、硫酸鏈霉素、硫酸卡那霉素、硫酸丁胺卡那霉素、磺胺甲基異惡唑紙片將分離純化菌株作為目標(biāo)菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),結(jié)果見(jiàn)表2。篩選到2種比較敏感的抗生素,即丁胺卡那霉素和磺胺甲基異惡唑。
表2 藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果
通過(guò)發(fā)病豬和病死豬臨床癥狀、剖檢病變和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),確診為多殺性巴氏桿菌[3-6]感染所致。
發(fā)病豬,肌肉注射復(fù)方硫酸丁胺卡那霉素注射液0.5 g/次,2次/d,連用3 d。所有豬,獸用硫酸丁胺卡那霉素可溶性粉拌料,100 g/t;磺胺甲基異惡唑拌料,2 kg/t;連用 5 d。
為了預(yù)防和快速控制疫情的蔓延與流行,對(duì)豬群進(jìn)行緊急接種豬巴氏桿菌病滅活疫苗5 mL/頭,1周后疫情得到控制。
1)發(fā)病豬及時(shí)隔離,用具沖洗后用2%燒堿水溶液徹底消毒,場(chǎng)地、欄舍、地面、墻壁用3%燒堿水噴灑徹底消毒,避免交叉感染[3,8-9];30%草木灰水噴灑消毒,豬糞堆積發(fā)酵[3];2)對(duì)病死豬高溫處理,對(duì)病豬和假定健康豬隔離飼養(yǎng),豬舍內(nèi)外用3%燒堿水溶液噴灑徹底消毒徹底消毒;3)患慢性豬肺疫的小僵豬淘汰處理為好。
豬多殺性巴氏桿菌病的確診要在臨床診斷基礎(chǔ)上,開(kāi)展實(shí)驗(yàn)室診斷和生化診斷,有條件的實(shí)驗(yàn)室可對(duì)病原菌進(jìn)行PCR進(jìn)行確診。鑒別診斷時(shí),要注意與豬瘟、豬丹毒相區(qū)別,可借助豬瘟快速檢測(cè)卡[10]確診或排除豬瘟,借助豬丹毒桿菌抗原快速檢測(cè)試紙條[11]確診或排除豬丹毒。豬多殺性巴氏桿菌病急性病例,咽喉部有腫脹和炎癥,剖檢時(shí)的膠凍樣浸潤(rùn)都與敗血型的炭疽相似。但從流行病學(xué)方面分析,豬急性炭疽[12]很少發(fā)生,且不形成流行;剖檢時(shí)炭疽脾臟的腫大程度與豬肺疫明顯不同,若取局部病料細(xì)菌學(xué)檢查,如涂片鏡檢,兩者病原形態(tài)等有明顯的不同,呈竹節(jié)狀[12]的炭疽桿菌與卵圓形、兩極濃染的短桿菌區(qū)別明顯。
飼養(yǎng)豬群密度大、擁擠,圈舍潮濕、通風(fēng)不良,地面、墻壁、料槽等衛(wèi)生條件差,天氣驟變等不良因素,均可降低豬體的抵抗力,或發(fā)生某一種或幾種傳染病時(shí),病菌乘機(jī)侵入機(jī)體內(nèi)繁殖,引起發(fā)病。流行性豬多殺性巴氏桿菌病以外源性感染為主,病豬為主要傳染來(lái)源,細(xì)菌隨病豬的分泌物、排泄物以及尸體的內(nèi)臟和血液等污染周?chē)h(huán)境,通過(guò)被污染的飼料、飲水和其他器物經(jīng)消化道感染發(fā)病。
根據(jù)豬多殺性巴氏桿菌病的傳播特點(diǎn),以增強(qiáng)豬體的免疫力防治為主。通過(guò)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,保持合適的飼養(yǎng)密度,豬舍通風(fēng)、溫差小,豬舍干燥、干凈,消除可能降低抗病力因素和致病誘因,豬舍內(nèi)及其周邊定期消毒。
新引進(jìn)的豬要隔離觀察45 d以上。前30 d,要認(rèn)真觀察新引進(jìn)的豬的休息狀態(tài)、采食狀態(tài),30 d以后進(jìn)行豬瘟疫苗和原有豬群免疫接種的其他疫苗接種。免疫接種15 d后進(jìn)方可合群飼養(yǎng)。