葉香蘭　黃志強　付長龍　邱志偉　謝新宇　鄭鈺錚

【摘 要】 H型血管作為一種高表達(dá)血小板-內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子-1（CD31）與內(nèi)皮黏蛋白（Emcn）的特殊血管類型，常分布于成骨活躍的部位，因其周圍聚集大量骨祖細(xì)胞，具有成血管與成骨偶聯(lián)作用，與骨質(zhì)疏松癥病程預(yù)后轉(zhuǎn)歸關(guān)系密切。探討H型血管與骨形成之間的偶聯(lián)作用對骨質(zhì)疏松癥病理進(jìn)程的影響機(jī)制，以期為骨質(zhì)疏松癥的防治提供新思路。

【關(guān)鍵詞】 骨質(zhì)疏松癥;H型血管;成骨成血管偶聯(lián);調(diào)節(jié)機(jī)制

骨質(zhì)疏松癥（osteoporosis，OP）是一種以骨密度減少、骨組織微結(jié)構(gòu)退變，骨強度降低而導(dǎo)致骨骼脆性升高，發(fā)生骨折的風(fēng)險也隨之變高為特點的全身性骨代謝性疾病[1]。隨著社會老齡化進(jìn)程的加快，OP成為一種以老年人群多發(fā)的疾患[2]。調(diào)查顯示，2010年至2016年中國60歲以上老年人OP總體患病率為36%，其中男性為23%，女性為49%[3]。OP主要分為原發(fā)性和繼發(fā)性兩類，原發(fā)性O(shè)P又分為絕經(jīng)后OP（Ⅰ型）、老年OP（Ⅱ型）以及特發(fā)性O(shè)P等[4]。

2014年，KUSUMBE等[5]在小鼠骨中鑒定出了兩種特殊的血管亞型，分別為高表達(dá)血小板-內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1（CD31）和內(nèi)皮黏蛋白（Emcn）的H型血管和低表達(dá)CD31和Emcn的L型血管。H型血管周圍有密集骨祖細(xì)胞排列，被證實具有誘導(dǎo)骨形成的能力，在成骨和成血管偶聯(lián)過程中至關(guān)重要，是近年來關(guān)于OP治療的新焦點。目前對于OP的治療往往集中于調(diào)節(jié)骨代謝方面，而涉及到骨骼血管作用的研究較少[6]。H型血管在成骨和成血管偶聯(lián)中重要作用的發(fā)現(xiàn)，為治療OP提供了新的突破點。

1 骨組織中H型血管的發(fā)現(xiàn)

KUSUMBE等[5]在發(fā)育中小鼠體內(nèi)鑒定出了兩種特殊的毛細(xì)血管亞型，根據(jù)兩者特定的形態(tài)、分子和功能特性分為H型血管和L型血管。H型血管直接與成骨成血管偶聯(lián)，在免疫組織化學(xué)染色中呈現(xiàn)CD31（別稱PECAM1）和Emcn強陽性，且靠近生長板的干骺端和股內(nèi)膜處，呈直柱狀，由遠(yuǎn)端血管環(huán)或拱形連接，周圍存在排列密集的骨祖細(xì)胞，能產(chǎn)生獨特的代謝和分子微環(huán)境，介導(dǎo)骨骼血管的生長，維持血管周圍骨祖細(xì)胞，并且結(jié)合血管生成和骨形成。骨代謝是新骨形成和舊骨吸收維持動態(tài)平衡的過程，這一平衡狀態(tài)決定著骨重建[7]。

隨著年齡的增長和雌激素、降鈣素等激素水平下降，骨平衡會朝破骨方向轉(zhuǎn)移發(fā)生骨代謝失衡，致使OP出現(xiàn)，因此維持骨平衡、促進(jìn)骨重建對預(yù)防和治療OP具有重要意義[8]。血管網(wǎng)絡(luò)為周圍骨組織提供必要的營養(yǎng)物質(zhì)、氧氣，也是代謝廢物的通道，近來研究表明其在促進(jìn)新骨生成和增強成骨成血管偶聯(lián)中也發(fā)揮重要作用[9-10]。骨生成和骨血管生成之間在時間與空間上的密切關(guān)系被稱為“成骨成血管偶聯(lián)”，是骨穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)的關(guān)鍵因素之一。此外，LANGEN等[11]采用遺傳譜系追蹤技術(shù)發(fā)現(xiàn)，胚胎和出生后早期長骨含有一種特殊的血管亞型，稱為E型血管，它強烈支持成骨細(xì)胞系細(xì)胞，后來向H型血管轉(zhuǎn)變，E型和H型血管均可分化為L型血管和小動脈，提示E型和H型內(nèi)皮細(xì)胞是骨中大多數(shù)內(nèi)皮細(xì)胞的上游細(xì)胞。

2 H型血管在骨形成中的作用

相關(guān)研究證實，人體骨骼內(nèi)存在H型血管，其數(shù)量隨年齡的增加而逐漸減少，骨密度與其數(shù)量呈正相關(guān)[12]。非OP性骨折患者H型血管較多且分布完整，呈柱狀、弓狀;OP性骨折患者H型血管稀疏、分布凌亂，呈竇狀，其骨體積分?jǐn)?shù)、骨小梁厚度和數(shù)目明顯減少，骨祖細(xì)胞數(shù)量顯著降低[13]。WANG等[14]研究發(fā)現(xiàn)，在正常大鼠骨損傷的修復(fù)過程中H型血管在修復(fù)區(qū)呈現(xiàn)大量增生并廣泛分布，而OP大鼠骨損傷修復(fù)過程中H血管分布減少，同時損傷后7 d、14 d，缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）、血管內(nèi)皮生長因子A、骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2和Osterix的轉(zhuǎn)錄水平下降，伴隨骨小梁的數(shù)量和厚度明顯減少、結(jié)構(gòu)紊亂、間隙增加;并且，H型血管在生長前沿的新生骨小梁表面遠(yuǎn)多于遠(yuǎn)離生長前沿的骨小梁表面，表明H型血管在骨缺損修復(fù)過程中支持邊緣生長區(qū)新骨的形成。另有研究發(fā)現(xiàn)，H型血管和周圍成骨祖細(xì)胞的數(shù)量隨小鼠年齡增加而顯著降低，但通過藥物治療可使這種情況逆轉(zhuǎn)，使骨骼質(zhì)量得以恢復(fù)[15]，提示通過H型血管形成誘導(dǎo)骨形成，有望成為一種治療OP的新手段。H型血管與骨形成之間偶聯(lián)關(guān)系的發(fā)現(xiàn)，為OP的治療提供了新的突破口。

3 影響H型血管形成與骨形成的相關(guān)因素

H型血管與成骨的緊密耦合，提示H型血管的生成與成骨存在某種分子信號通路，保證了骨生成與血管生成之間的“偶聯(lián)關(guān)系”。成骨成血管偶聯(lián)涉及破骨、成骨、成血管等多種生理過程，關(guān)于H型血管與成骨的偶聯(lián)關(guān)系的機(jī)制的探討，目前已經(jīng)確定了以下幾種因素可調(diào)節(jié)H型血管形成和骨形成。

3.1 破骨前體細(xì)胞和血小板衍生生長因子-BB（PDGF-BB） H型血管和成骨的“偶聯(lián)機(jī)制”可為破骨前體細(xì)胞分泌的PDGF-BB進(jìn)行強化。此觀點被認(rèn)為是對以往“骨量變化與成骨細(xì)胞-破骨細(xì)胞平衡、鈣丟失、維生素D減少相關(guān)”的重大補充[16]。XIE等[17]證實，由破骨前體細(xì)胞分泌的PDGF-BB可以在骨骼的塑造與重塑過程中促進(jìn)H型血管的形成和骨形成。破骨前體細(xì)胞分泌的PDGF-BB與血小板衍生生長因子受體β結(jié)合，誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）和骨髓來源的內(nèi)皮母細(xì)胞遷移，并分別分化為成骨細(xì)胞和H亞型內(nèi)皮細(xì)胞[17]。YANG等[18]證實，PDGF-BB通過增強內(nèi)皮祖細(xì)胞的血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）信號保護(hù)內(nèi)皮血管的形成，并通過對H型血管和成骨細(xì)胞的保護(hù)作用減弱糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的成年小鼠OP。目前研究大都通過直接或間接調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞以調(diào)控PDGF-BB的生成，如通過GIT1[19]、卵磷脂[20]、蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2（NSC-87877）[21]以及駱駝蓬堿（一種β-Caroline生物堿）[22]促進(jìn)成骨與成血管偶聯(lián)，用以治療OP。

有研究發(fā)現(xiàn)，巨噬細(xì)胞系骨膜抗酒石酸酸性磷酸酶陽性（TRAP+）細(xì)胞，通過分泌PDGF-BB誘導(dǎo)骨膜衍生細(xì)胞（PDCs）表達(dá)和募集到骨膜成骨微環(huán)境中，募集的PDCs參與了成骨細(xì)胞分化，促進(jìn)了骨形成和H型血管再生[23]。TRAP+破骨前細(xì)胞的破骨細(xì)胞成熟化減少了PDGF-BB的分泌，SONG等[20]研究發(fā)現(xiàn)，通過抑制絲裂原活化蛋白激酶和核轉(zhuǎn)錄因子-κB信號通路，天然的生物活性化合物-核苷（Nuciferine）可以通過保存TRAP+破骨細(xì)胞從而減少多核破骨細(xì)胞的形成，增加股骨中PDGF-BB的濃度和H型血管的數(shù)量，對去卵巢小鼠具有骨保護(hù)作用，可作為治療骨丟失疾病的一種藥物。

3.2 軸突導(dǎo)向分子SLIT3 軸突導(dǎo)向分子SLIT3是一種SHN3調(diào)節(jié)的促血管生成因子[24]。KIM等[25]發(fā)現(xiàn)，破骨細(xì)胞衍生的SLIT3是一種強效局部決定因子，在調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞性能中起著關(guān)鍵的作用。一方面，SLIT3通過激活β-連環(huán)蛋白，刺激成骨細(xì)胞遷移至骨重建部位并增殖;另一方面，SLIT3自分泌抑制破骨細(xì)胞的分化從而抑制骨吸收。研究發(fā)現(xiàn)，SLIT3或其受體Robo1缺乏的小鼠H型血管數(shù)量顯著減少，并由于破骨水平高于成骨水平表現(xiàn)出骨量的減少。KIM等[25]制作了一種截短型重組SLIT3-LRRD2，SLIT3-LRRD2能有效緩解去卵巢小鼠骨質(zhì)丟失，但并未明顯增加小鼠骨量且需要多次注射。這些結(jié)果證實了SLIT3在H型血管生成過程中的重要性，并顯示其可同時調(diào)控骨形成與骨丟失，這為開發(fā)出雙活性藥物提供了分子基礎(chǔ)[26]。

3.3 MSC亞群：Gli1+細(xì)胞 MSC是多能干細(xì)胞，為骨髓基質(zhì)細(xì)胞的主要細(xì)胞類型，可誘導(dǎo)分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞等多種類型細(xì)胞，參與血管內(nèi)皮生成和修復(fù)，具有一定的成骨潛能[27-28]。Gli1+細(xì)胞是MSC的一個亞群，廣泛分布于各種器官中，具有重要生物學(xué)功能。在骨組織中，Gli1+細(xì)胞可作為成骨細(xì)胞的祖細(xì)胞參與長骨發(fā)育和修復(fù)[29-30]。CHEN等[31]研究結(jié)果顯示，Gli1+細(xì)胞與H型血管形成耦合并調(diào)節(jié)H型血管生成。H型血管為骨中Gli1+細(xì)胞毗鄰分布的優(yōu)選血管亞型，且Gli1+細(xì)胞和H型血管內(nèi)皮細(xì)胞在總骨細(xì)胞中的頻率隨年齡協(xié)同變低，并伴隨骨祖細(xì)胞標(biāo)志物RUNX2下降。在骨缺損或骨折愈合早期，愈合區(qū)Gli1+細(xì)胞明顯上調(diào)并引導(dǎo)H型血管形成。注射他莫昔芬消融小鼠骨骼中的Gli1+細(xì)胞，觀察到干骺端和骨干端H型血管的急劇減少并伴隨著RUNX2+骨祖細(xì)胞的顯著喪失，骨體積/組織體積和骨小梁數(shù)量減少。Gli1+細(xì)胞消融導(dǎo)致HIF-1α信號顯著抑制，提示Gli1+細(xì)胞可能由HIF-1α信號調(diào)控H型血管形成[31]。

3.4 HIF-1α HIF-1α是HIF-1的活性亞基，受缺氧信號的調(diào)控，其基因定位于人的14號染色體（14q21～24），可調(diào)控促血管生長因子、血管內(nèi)皮生長因子、腫瘤壞死因子的表達(dá)，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增殖，促進(jìn)血管生成[32-34]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，HIF-1α表達(dá)水平降低的小鼠其骨骼中H型血管和骨祖細(xì)胞數(shù)量明顯減少，L型血管數(shù)量不受影響。相反，提高小鼠骨骼中HIF-1α的表達(dá)水平會導(dǎo)致H亞型內(nèi)皮細(xì)胞增加和干骺端血管柱的顯著擴(kuò)張，伴隨干骺端的擴(kuò)張和骨祖細(xì)胞的增多，由此可見，H型內(nèi)皮細(xì)胞和骨祖細(xì)胞的增殖與HIF-1α的水平呈正相關(guān);該研究亦發(fā)現(xiàn)，H亞型內(nèi)皮細(xì)胞在幼年小鼠體內(nèi)高表達(dá)，表達(dá)水平隨著小鼠年齡的增長而逐漸減低?？傊?，HIF-1α在調(diào)節(jié)H型血管生成與骨形成的過程中起著至關(guān)重要的作用[35]。PENG等[36]研究結(jié)果表明，缺氧模擬劑二甲基草酰甘氨酸激活了HIF-1α信號通路，進(jìn)一步激活了Wnt/β-catenin信號通路，并增強了MSC成骨分化，促進(jìn)血管生成和成骨作用。YANG等[37]發(fā)現(xiàn)，MIR-497～195簇通過維持內(nèi)皮HIF-1α和Notch活性調(diào)節(jié)成骨成血管偶聯(lián)過程中H型血管生成。

3.5 糖原合成激酶3β（GSK-3β） GSK-3β是一種絲氨酸/蘇氨酸激酶，普遍存在于哺乳動物真核細(xì)胞中，可調(diào)節(jié)細(xì)胞的分化、增殖、存活和凋亡，在腫瘤、神經(jīng)退行性疾病等疾病研究中越來越受到重視[38-39]。GSK-3β直接調(diào)控成血管的研究主要集中在其調(diào)控VEGF方面，GSK-3β具有降解HIF-1α的作用，而HIF-1α可以直接促進(jìn)VEGF的表達(dá)[40]。GSK-3β通過其激酶活性作用，參與Wnt信號通路，對成骨、成血管作用進(jìn)行調(diào)節(jié)[41]。胡祥翔[42]研究證實了GSK-3β在成骨和成血管偶聯(lián)中的作用，研究發(fā)現(xiàn)，去卵巢OP模型小鼠股骨骨密度明顯下降，同時伴有GSK-3β和H型血管明顯下降，而GSK-3β+/-小鼠對去卵巢后骨質(zhì)疏松有明顯的拮抗作用;并且，通過對分別來源于GSK-3β+/-小鼠（高GSK-3β活性）、野生型小鼠（正常GSK-3β活性）以及LiCl環(huán)境下野生型小鼠（低GSK-3β活性）的骨髓單體巨噬細(xì)胞進(jìn)行破骨誘導(dǎo)，發(fā)現(xiàn)高GSK-3β活性下可加快單核巨噬細(xì)胞分化為破骨前體細(xì)胞，低GSK-3β則會抑制這一過程;且GSK-3β+/-小鼠組條件培養(yǎng)液中的PDGF-BB含量高于野生型小鼠組，LiCl組條件培養(yǎng)液PDGF-BB含量低于野生型組。提示GSK-3β可以通過調(diào)節(jié)單核巨噬細(xì)胞分化為破骨前體細(xì)胞的速度從而調(diào)節(jié)PDGF-BB的分泌，進(jìn)而影響H型血管生成和成骨成血管偶聯(lián)，以維持骨穩(wěn)態(tài)。

3.6 Notch信號與Noggin蛋白 RAMASAMY等[43]證實了Notch信號在成骨和成血管偶聯(lián)中的重要作用。Notch信號作用于H亞型血管內(nèi)皮細(xì)胞，使其增殖并分泌形態(tài)蛋白拮抗劑（Noggin）。Noggin蛋白可促進(jìn)骨祖細(xì)胞增殖、分化和軟骨細(xì)胞的成熟、肥大，恢復(fù)Sox9蛋白局部表達(dá)水平，而骨祖細(xì)胞和軟骨細(xì)胞可高分泌VEGF引導(dǎo)血管出芽，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞成熟和血管形成[44]。內(nèi)皮細(xì)胞Notch信號通過Noggin和VEGF有序地調(diào)控骨祖細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞間的信號傳遞。研究通過對小鼠使用Notch受體失活劑，使Notch增加，發(fā)現(xiàn)H型血管和Runx+骨祖細(xì)胞的數(shù)量以及Noggin蛋白的分泌增加。相反，在Notch信號傳導(dǎo)遺傳破壞的小鼠中，出現(xiàn)H型血管和Runx+骨祖細(xì)胞的數(shù)量以及Noggin蛋白的分泌減少的現(xiàn)象。由此證實，Notch信號是連接H型血管內(nèi)皮細(xì)胞和成骨作用之間的關(guān)鍵成分[45]。

4 結(jié)語和展望

OP的發(fā)病率和致殘率逐年增高，嚴(yán)重影響患者的日常生活和心理健康。因此，對OP的病因、發(fā)病機(jī)制及預(yù)防治療等問題的進(jìn)一步探討，有著重要而深遠(yuǎn)的現(xiàn)實意義。H型血管形成與成骨偶聯(lián)關(guān)系的發(fā)現(xiàn)，使我們對成骨與成血管之間的相關(guān)分子作用機(jī)制有了新的認(rèn)識。目前關(guān)于H型血管的研究大多都僅限于動物實驗，驗證H型血管在人OP中的作用需進(jìn)一步研究。相關(guān)藥物在靶向H型血管治療OP上確有一定療效，但缺乏嚴(yán)格和標(biāo)準(zhǔn)化的大樣本臨床試驗，在循證醫(yī)學(xué)方面缺乏足夠的證據(jù)，應(yīng)開展多中心、大樣本、雙盲、隨機(jī)、對照試驗，以期進(jìn)行更加科學(xué)的評估。其次，鑒于當(dāng)前對于OP的治療集中于調(diào)節(jié)骨代謝等方面，可以考慮靶向H型血管用藥與傳統(tǒng)藥物或治療技術(shù)相結(jié)合的辦法，以期發(fā)揮更佳療效。此外，H型血管的形態(tài)、數(shù)量以及特異性分布特點可考慮作為診斷OP和評估藥物療效的指標(biāo)之一。將來，針對H型血管的治療方法有望成為OP臨床治療的新途徑之一。

參考文獻(xiàn)

[1] YANG TL，SHEN H，LIU AQ，et al.A road map for understanding molecular and genetic determinants of osteoporosis[J].Nat Rev Endocrinol，2020，16（2）：91-103.

[2] 王慶，陳麗虹，李瑋彤，等.有氧運動在老年性骨質(zhì)疏松癥患者中的研究進(jìn)展[J].風(fēng)濕病與關(guān)節(jié)炎，2019，8（10）：72-75.

[3] 賀麗英，孫蘊，要文娟，等.2010—2016年中國老年人骨質(zhì)疏松癥患病率Meta分析[J].中國骨質(zhì)疏松雜志，2016，22（12）：1590-1596.

[4] 夏維波，章振林，林華，等.原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥診療指南（2017）[J].中國骨質(zhì)疏松雜志，2019，25（3）：281-309.

[5] KUSUMBE AP，RAMASAMY SK，ADAMS RH.Coupling of angiogenesis and osteogenesis by a specific vessel subtype in bone[J].Nature，2014，507（7492）：323-328.

[6] 丁姍姍，徐建平.抗骨質(zhì)疏松藥對種植體骨結(jié)合影響的研究進(jìn)展[J].山東醫(yī)藥，2019，59（28）：107-110.

[7] 谷敬欣，趙振軍，左惠芬，等.雷公藤多苷片聯(lián)合甲氨蝶呤對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎合并骨質(zhì)疏松患者血清骨代謝標(biāo)志物水平及炎癥因子的影響[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2020，29（22）：2424-2428.

[8] 何丹云.補腎活血湯預(yù)防PKP術(shù)中骨水泥植入綜合征的臨床療效[D].南京：南京中醫(yī)藥大學(xué)，2020.

[9] 林佳瓊，吳文.血管內(nèi)皮生長因子與骨質(zhì)疏松的關(guān)系[J].中華骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志，2015，8（4）：374-378.

[10] 張慶宇.激素性股骨頭BMEC損傷、外泌體、microRNA表達(dá)及淫羊藿苷和震波干預(yù)作用[D].北京：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院，2019.

[11] LANGEN UH，PITULESCU ME，KIM JM，et al.Cell-matrix signals specify bone endothelial cells during developmental osteogenesis[J].Nature Cell Biol，2017，19（3）：189-201.

[12] 韓鈞，孫偉，高福強，等.H亞型血管與骨質(zhì)疏松癥[J].中國骨質(zhì)疏松雜志，2018，24（10）：1353-1356.

[13] 王亮，張鵬，姚喆，等.骨組織H亞型血管在骨質(zhì)疏松與非骨質(zhì)疏松骨折患者中的表現(xiàn)[J].中華骨科雜志，2016，36（20）：1237-1334.

[14] WANG JM，GAO Y，CHENG PZ，et al.CD31hiEmcnhi vessels support new trabecular bone formation at the frontier growth area in the bone defect repair proc-ess[J].Sci Rep，2017，7（1）：4990.

[15] 申前進(jìn)，呂珊，陽文新，等.糖皮質(zhì)激素通過抑制內(nèi)皮細(xì)胞形成骨血管導(dǎo)致骨質(zhì)疏松的實驗研究[J].頸腰痛雜志，2019，40（6）：727-731.

[16] CHEN ZX，WU QJ，YAN CJ，et al.COL6A1 knockdown suppresses cell proliferation and migration in human aortic vascular smooth muscle cells[J].Exp Ther Med，2019，18（3）：1977-1984.

[17] XIE H，CUI Z，WANG L，et al.PDGF-BB secreted by preosteoclasts induces angiogenesis during coupling with osteogenesis[J].Nature Medicine，2014，20（11）：1270-1278.

[18] YANG P，LV S，WANG Y，et al.Preservation of type H vessels and osteoblasts by enhanced preosteoclast platelet-derived growth factor type BB attenuates glucocorticoid-induced osteoporosis in growing mice[J].Bone，2018，114（1）：1-13.

[19] XU T，LUO YJ，KONG FQ，et al.GIT1 is critical for formation of the CD31hiEmcnhi vessel subtype in coupling osteogenesis with angiogenesis via modulating preosteoclasts secretion of PDGF-BB[J].Bone，2019，122（1）：218-230.

[20] SONG CC，CAO J，LEI YS，et al.Nuciferine prevents bone loss by disrupting multinucleated osteoclast formation and promoting type H vessel formation[J].FASEB J，2020，34（3）：4798-4811.

[21] YIN H，HUANG J，CAO X，et al.Inhibition of src homology 2 domain-containing protein tyrosine phosphatase-2 facilitates CD31hiEndomucinhi blood vessel and bone formation in ovariectomized mice[J].Cellular Physiol Biochem，2018，50（3）：1068-1083.

[22] HUANG J，YIN H，RAO SS，et al.Harmine enhances type H vessel formation and prevents bone loss in ovariectomized mice[J].Theranostics，2018，8（9）：2435-2446.

[23] GAO B，DENG RX，CHAI Y，et al.Macrophage-lineage TRAP+ cells recruit periosteum-derived cells for periosteal osteogenesis and regeneration[J].J Clin Invest，2019，129（6）：2578-2594.

[24] 成文翔.葫蘆素在骨組織工程血管化中的作用及機(jī)制研究[D].深圳：中國科學(xué)院大學(xué)（中國科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院），2020.

[25] KIM BJ，LEE YS，LEE SY，et al.Osteoclast-secreted SLIT3 coordinates bone resorption and formation[J].J Clin Invest，2018，128（4）：1429-1441.

[26] GENNARI L，MERLOTTI D，F(xiàn)ALCHETTI A，et al.Emerging therapeutic targets for osteoporosis[J].Expert Opin Ther Targets，2020，24（2）：115-130.

[27] 朱朝軍，馬靜，劉現(xiàn)周，等.基于中醫(yī)屬性談自體骨髓干細(xì)胞注射治療下肢缺血性疾病[J].四川中醫(yī)，2016，34（12）：29-31.

[28] 陳俊毅，王寧，陳西淼，等.脫鈣骨基質(zhì)體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨分化[J].中國組織工程研究，2021，25（1）：26-31.

[29] 劉安琪，張立書，陳驥，等.牙周膜中Gli1陽性細(xì)胞的成骨及成牙骨質(zhì)能力研究[J].口腔頜面外科雜志，2019，29（6）：320-325.

[30] SHI Y，HE GX，LEE WC，et al.Gli1 identifies osteogenic progenitors for bone formation and fracture repair[J].Nature Communications，2017，8（1）：2043.

[31] CHEN J，LI M，LIU AQ，et al.Gli1+ cells couple with type H vessels and are required for type H vessel formation[J].Stem Cell Reports，2020，15（1）：110-124.

[32] 楊晉，賀凱，張孟瑜，等.miR-377-5p通過下調(diào)HIF-1α及其相關(guān)VEGF信號通路抑制肝細(xì)胞癌HepG2細(xì)胞的增殖和侵襲[J].中國腫瘤生物治療雜志，2020，27（3）：248-254.

[33] 顧霞，趙敏，王平義，等.低氧誘導(dǎo)因子1α與低氧相關(guān)疾病信號通路的關(guān)系[J].中國組織工程研究，2021，25（8）：1284-1289.

[34] 羅敏.乏氧條件下HIF-1α調(diào)節(jié)CXCL6表達(dá)促進(jìn)胃癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究[D].南昌：南昌大學(xué)，2020.

[35] MAES C，CLEMENS TL.Angiogenic-osteogenic coupling：the endothelial perspective[J].Bonekey reports，2014，15（3）：578.

[36] PENG J，LAI ZG，F(xiàn)ANG ZL，et al.Dimethyloxalylglycine prevents bone loss in ovariectomized C57BL/6J mice through enhanced angiogenesis and osteogenesis[J].PLoS One，2014，9（11）：e112744.

[37] YANG M，LI CJ，SUN X，et al.MiR-497～195 cluster regulates angiogenesis during coupling with osteogenesis by maintaining endothelial Notch and HIF-1α activity[J].Nature Communications，2017，8（1）：16003.

[38] ELGENDY M，CIR? M，HOSSEINI A，et al.Combination of hypoglycemia and metformin impairs tumor?metabolic plasticity and growth by modulating the PP2A-GSK3β-MCL-1 axis[J].Cancer Cell，2019，35（5）：798-815.

[39] 劉謙，唐圓圓，張國海，等.糖原合成激酶-3β及其天然藥物抑制劑研究進(jìn)展[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2010，16（9）：223-229.

[40] CHENG DD，ZHAO HG，YANG YS，et al.GSK3β negatively regulates HIF-1α mRNA stability via nucleolin in the MG63 osteosarcoma cell line[J].Biochem Biophys Res Commun，2014，443（2）：598-603.

[41] LEE HC，LIN YZ，LAI YT，et al.Glycogen synthase kinase 3 beta in somites plays a role during the angiogenesis of zebrafish embryos[J].FEBS J，2014，281（19）：4367-4383.

[42] 胡祥翔.GSK-3β在骨穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)中的作用研究[D].西安：第四軍醫(yī)大學(xué)，2017.

[43] RAMASAMY SK，KUSUMBE AP，WANG L，et al.Endothelial Notch activity promotes angiogenesis and osteogenesis in bone[J].Nature，2014，507（7492）：376-380.

[44] 王繼猛.骨損傷修復(fù)中H型血管的分布和作用及血管束神經(jīng)束聯(lián)合植入組織工程骨修復(fù)羊大段脛骨缺損的研究[D].西安：第四軍醫(yī)大學(xué)，2017.

[45] LUO ZL，SHANG XF，ZHANG H，et al.Notch signaling in osteogenesis，osteoclastogenesis，and angiogenesis[J].Am J Pathol，2019，189（8）：1495-1500.

收稿日期：2020-04-20;修回日期：2020-05-19