林愛(ài)芬，張小燕，劉妍 編譯，胡迅 審校

·新型冠狀病毒專(zhuān)欄·

COVID-19 相關(guān)樣本處理加工的實(shí)驗(yàn)室生物安全——來(lái)自CDC的臨時(shí)指導(dǎo)文件

林愛(ài)芬，張小燕，劉妍 編譯，胡迅 審校

317000 臺(tái)州，浙江省臺(tái)州醫(yī)院生物資源中心（林愛(ài)芬）；201210 上海，生物芯片上海國(guó)家工程研究中心（張小燕）；100039 北京，解放軍總醫(yī)院第五醫(yī)學(xué)中心臨床研究管理中心（劉妍）；610041 成都，四川大學(xué)華西醫(yī)院生物樣本庫(kù)（胡迅）

本指導(dǎo)文件更新于2020年2月10日，修訂內(nèi)容摘要如下：

1．增加“認(rèn)證”一詞，以說(shuō)明任何有可能產(chǎn)生氣溶膠或飛沫的實(shí)驗(yàn)均應(yīng)在經(jīng)認(rèn)證的二級(jí)生物安全柜（BSC）中進(jìn)行。

2．增加了在 BSC 外完成任何實(shí)驗(yàn)程序的相關(guān)細(xì)節(jié)。

3．提供了更多有關(guān)使用美國(guó)環(huán)保局（EPA）注冊(cè)的醫(yī)用消毒劑的細(xì)節(jié)。

4．增加了 COVID-19 實(shí)驗(yàn)廢棄物處置的相關(guān)內(nèi)容。

5．補(bǔ)充現(xiàn)場(chǎng)和項(xiàng)目特定的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，以確定是否需要增加實(shí)驗(yàn)室生物安全控制措施。

在更多信息尚未獲得前，收集和處理可能含有 SARS-CoV-2 的樣本時(shí)應(yīng)采取預(yù)防措施。臨床和實(shí)驗(yàn)室工作人員之間的及時(shí)溝通對(duì)減少 SARS-CoV-2 潛在感染患者的樣本處理風(fēng)險(xiǎn)至關(guān)重要。因此，此類(lèi)標(biāo)本應(yīng)該貼上相應(yīng)的標(biāo)簽，并提醒實(shí)驗(yàn)室工作人員正確處理樣本。

本文介紹 SARS-CoV-2 樣本處理的生物安全指導(dǎo)文件。其他有關(guān)細(xì)節(jié)，請(qǐng)參閱《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的生物安全》（BMBL）（第五版）以及《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》（第三版）

一、一般準(zhǔn)則（用于處理潛在感染材料）

實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)穿戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備（PPE），包括一次性手套、處理潛在感染樣本時(shí)的實(shí)驗(yàn)室外套/工作服，并做好眼睛保護(hù)。

任何可能產(chǎn)生氣溶膠或飛沫（如振蕩混勻）的操作應(yīng)在經(jīng)認(rèn)證的二級(jí) BSC 中進(jìn)行。離心時(shí)應(yīng)該用合適的物理容器（如離心機(jī)安全吊桶，密封轉(zhuǎn)子）。理想情況下，轉(zhuǎn)子和安全吊桶應(yīng)在 BSC 中裝卸。任何在 BSC 外的操作均應(yīng)做好眼睛和面部保護(hù)（如佩戴護(hù)目鏡、口罩、面罩等）或用其他物理屏障（如防濺擋板）做好保護(hù)，以使實(shí)驗(yàn)室工作人員的暴露風(fēng)險(xiǎn)降至最低。

樣本處理后，使用合適的消毒劑對(duì)工作表面和設(shè)備進(jìn)行消毒處理。應(yīng)使用 EPA 注冊(cè)且有說(shuō)明對(duì)其他呼吸道病原體（如季節(jié)性流感和其他人類(lèi)冠狀病毒）有效的醫(yī)用消毒劑。消毒劑的稀釋度（即濃度）、作用時(shí)間及操作注意事項(xiàng)均應(yīng)遵循廠家的說(shuō)明書(shū)。

對(duì)于 SARS-CoV-2 實(shí)驗(yàn)室廢棄物的處理，參照其他呼吸道病原體（如季節(jié)性流感和其他人類(lèi)冠狀病毒）相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)程序。

二、具體準(zhǔn)則

目前不建議在細(xì)胞培養(yǎng)物中進(jìn)行病毒分離及 SARS-CoV-2 樣本培養(yǎng)物中病毒性病原體的初步鑒定。上述工作應(yīng)在生物安全等級(jí) 3（BSL3）實(shí)驗(yàn)室并采用 BSL3 操作流程進(jìn)行。

以下工作可在 BSL-2 實(shí)驗(yàn)室采用 BSL-2 標(biāo)準(zhǔn)流程進(jìn)行：

·經(jīng)福爾馬林固定或其他方式滅活的組織的病理檢查和處理

·所提取的核酸制劑的分子分析

·戊二醛固定的（細(xì)胞或組織）的電鏡研究

·細(xì)菌和真菌培養(yǎng)的常規(guī)檢查

·固定涂片的常規(guī)染色及顯微分析

·將樣本運(yùn)輸至診斷實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行進(jìn)一步檢測(cè)時(shí)需要最終包裝。包裝前樣本應(yīng)放在密封且消毒的主容器里

·滅活的樣本（如核酸提取緩沖液中的樣本）

以下涉及潛在感染樣本的操作至少應(yīng)按照上述要求，在滿足經(jīng)認(rèn)證的 BSL-2 設(shè)施的二級(jí) BSC 中進(jìn)行。同時(shí)對(duì)現(xiàn)場(chǎng)和項(xiàng)目所特定的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)估，以確定是否有必要根據(jù)具體情況加強(qiáng)生物安全預(yù)防措施（如測(cè)試樣本容量高）。

·樣本分裝和（或）稀釋

·接種細(xì)菌或真菌培養(yǎng)基

·進(jìn)行不涉及病毒性病原體在體內(nèi)/體外傳播的診斷試驗(yàn)

·用于顯微分析的樣本涂片制備、化學(xué)或加熱固定

三、臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

用于常規(guī)血液學(xué)、尿液分析、臨床化學(xué)研究的臨床實(shí)驗(yàn)室和利用血清、血液或尿液樣本進(jìn)行診斷的微生物實(shí)驗(yàn)室，在處理 COVID-19 潛在感染患者樣本時(shí)應(yīng)遵循標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室操作流程，包括標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防措施。其他有關(guān)信息，請(qǐng)參閱《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全》（BMBL）-第五版（第225 頁(yè)）。

四、包裝和運(yùn)輸

COVID-19 疑似病例或受檢對(duì)象的樣本包裝、航運(yùn)和陸上轉(zhuǎn)運(yùn)必須按照最新版的國(guó)際航空運(yùn)輸協(xié)會(huì)（IATA）危險(xiǎn)物品條例進(jìn)行。

郵寄潛在 COVID-19 感染患者樣本時(shí)，應(yīng)遵循 UN 3373 B 類(lèi)感染性疾病生物樣本的運(yùn)輸規(guī)定。

五、資源

·包裝清單，見(jiàn) B 類(lèi)感染性疾病安全運(yùn)輸包裝（附件 1）

·B 類(lèi)生物安全運(yùn)輸箱（UN3373）的包裝說(shuō)明 650（https://www.iata.org/en/programs/cargo/dgr/download）

·在“感染性物質(zhì)”（https://www.iata.org/en/programs/ cargo/dgr/download）可以下載相關(guān)包裝說(shuō)明。

·UN 3373 標(biāo)簽

·使用冰袋時(shí)（附件 2），請(qǐng)?zhí)峁┤粘９ぷ鲿r(shí)間、聯(lián)系人的姓名和電話號(hào)碼。該聯(lián)系人（可以是 CDC 工作人員）應(yīng)知曉運(yùn)輸貨物的內(nèi)容。把標(biāo)簽放在運(yùn)輸包裝盒子的一側(cè)，并用透明膠帶完全蓋住標(biāo)簽（請(qǐng)勿僅粘貼標(biāo)簽的邊緣）。

·使用干冰時(shí)（附件 3），請(qǐng)?zhí)峁┤粘９ぷ鲿r(shí)間、聯(lián)系人的姓名和電話號(hào)碼。該聯(lián)系人（可以是 CDC 工作人員）應(yīng)知曉運(yùn)輸貨物的內(nèi)容。把標(biāo)簽放在運(yùn)輸包裝盒子的一側(cè)，并用透明膠帶完全蓋住標(biāo)簽（請(qǐng)勿僅粘貼標(biāo)簽的邊緣）。

·包裝示意圖，UN 3373 B 類(lèi)（附件 4）

附件 1

附件 2

附件 3

附件 4

胡迅，Email：hxxhu99@163.com

2020-03-11

10.3969/j.issn.1673-713X.2020.02.008