藍(lán)仙娥 文尚梅

(1.廣東省清遠(yuǎn)市婦幼保健院檢驗(yàn)科 清遠(yuǎn) 511500；2.廣東省清遠(yuǎn)市婦幼保健院兒科 清遠(yuǎn) 511500)

肺炎支原體(M.Pneumonia)是人類支原體肺炎的病原體，主要病理改變以間質(zhì)性肺炎為主，或并發(fā)支氣管肺炎[1]?？贵wIgM是急性感染的指標(biāo)，實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步檢查，對(duì)確定病因，對(duì)癥治療具有重要的臨床價(jià)值。本研究為比較分析肺炎支原體抗體IgM檢測(cè)的常用方法檢測(cè)結(jié)果，特選定我院1832例疑似肺炎支原體感染的患兒末梢血及血清，進(jìn)行肺炎支原體抗體IgM檢測(cè)，并對(duì)其檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析，具體報(bào)告如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料

應(yīng)用醫(yī)學(xué)樣本對(duì)比勘驗(yàn)法，選取入住我院1832例疑似肺炎支原體感染的患兒，收取其末梢血及血清樣本進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)其檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。所有患兒均符合《實(shí)用兒科學(xué)》的診斷標(biāo)準(zhǔn)，起病緩慢，患者伴有乏力、咽痛、頭痛、咳嗽、發(fā)熱、食欲不振、腹瀉、肌痛、耳痛等癥狀[2]。其中，男1034例，女798例，年齡0～14歲，中位數(shù)年齡5歲。3組患者臨床資料差異不明顯，不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 儀器與試劑

膠體金法采用珠海麗珠試劑股份有限公司提供的肺炎支原體IgM抗體檢測(cè)試劑盒對(duì)病人末梢血進(jìn)行檢測(cè)；間接免疫熒光法采用比爾賽有限公司提供的九項(xiàng)呼吸道感染病原體IgM抗體檢測(cè)試劑盒；酶聯(lián)免疫吸附法用歐蒙試劑公司提供的抗肺炎支原體IgM抗體檢測(cè)試劑盒。

1.3 檢驗(yàn)方法

用微量吸管取病人末梢血10μl進(jìn)行膠體金檢測(cè)；干燥管抽取患兒靜脈血2～3ml，分離血清備檢測(cè)，采用間接免疫熒光法和酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)。

1.4 觀察指標(biāo)

與臨床檢出陽(yáng)性率研究結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析，檢出率一致性好，與臨床符合率高，視為檢出效果好。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

本次調(diào)查均采用DAS(統(tǒng)計(jì)設(shè)計(jì)和分析系統(tǒng))對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，陽(yáng)性率以%表示，計(jì)量資料組間比較用χ2檢驗(yàn)。當(dāng)P<0.05時(shí)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3種方法陽(yáng)性檢出率

1832例中采用膠體金法檢測(cè)陽(yáng)性770例，陰性1062例，陽(yáng)性率42.07%；間接免疫熒光法檢測(cè)陽(yáng)性375例，陰性1457例，陽(yáng)性率20.52%；酶聯(lián)免疫吸附法陽(yáng)性384例，陰性1448例陽(yáng)性率21.0%。膠體金法在肺炎支原體抗體IgM檢測(cè)中的陽(yáng)性檢出率明顯高于間接熒光法和酶聯(lián)免疫吸附法，膠體金法與間接熒光法兩組對(duì)比(χ2=42.31，P<0.05)；膠體金法與酶聯(lián)免疫吸附法兩組對(duì)比(χ2=39.26，P<0.05)；間接熒光法與酶聯(lián)免疫吸附法兩組對(duì)比(χ2=0.134，P>0.05)，見(jiàn)表1。

表1 3種方法陽(yáng)性檢出率

總例數(shù)(n)陽(yáng)性例數(shù)(n)陽(yáng)性率(%)膠體金法183277042.07間接免疫熒光法183237520.52酶聯(lián)免疫吸附法183238421.0

2.2 3種方法陽(yáng)性率與臨床診斷陽(yáng)性率符合率對(duì)比

3種方法陽(yáng)性檢出例數(shù)與臨床診斷實(shí)際陽(yáng)性例數(shù)符合率差異不顯著，P>0.05。但是膠體金法一致性較好，間接免疫熒光法和酶聯(lián)免疫吸附法高度一致，見(jiàn)表2。

表2 3種方法陽(yáng)性檢出率

陽(yáng)性例數(shù)(n)臨床診斷陽(yáng)性例數(shù)(n)陽(yáng)性符合率(%)Kappa值膠體金法77053970.00%0.557間接免疫熒光法37528375.46%0.632酶聯(lián)免疫吸附法38428975.26%0.621

3 討論

3.1 支原體肺炎概況

支原體肺炎是嬰幼兒期常見(jiàn)和高發(fā)呼吸道疾病，具有極高的危害性，可導(dǎo)致患兒皮膚、神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)等損傷。從支原體肺炎發(fā)病機(jī)制來(lái)看，支原體感染引起嬰幼兒感染、肺部感染支原體導(dǎo)致的肺炎，通過(guò)咳嗽、咳痰等傳染，代謝較慢[3]。早期診斷中，通過(guò)應(yīng)用肺炎支原體抗體IgM檢測(cè)來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)患者疾病的科學(xué)治療，并成為指導(dǎo)預(yù)后的指標(biāo)。具體方法為膠體金法、間接熒光法 、酶聯(lián)免疫吸附法。

3.2 3組患者不同檢測(cè)方法的臨床療效比較

膠體金法在肺炎支原體抗體IgM檢測(cè)中的陽(yáng)性檢出率明顯高于間接熒光法和酶聯(lián)免疫吸附法，膠體金法與間接熒光法兩組組差異顯著(P<0.05)；膠體金法與酶聯(lián)免疫吸附法兩組差異顯著(P<0.05)；間接熒光法與酶聯(lián)免疫吸附法兩組差異不顯著(P>0.05)。

文獻(xiàn)資料數(shù)據(jù)進(jìn)一步佐證，疑似肺炎支原體(MP)感染中,血清MP-IgM抗體聯(lián)合檢測(cè)，具有極高的特異度、靈敏度、陰性預(yù)測(cè)值、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值(P<0.05)[4]。MP-IgM陽(yáng)性率為30.1%；不同年齡段間總體的MP-IgM陽(yáng)性檢出率為26.0%，男女性患兒對(duì)比為41.2%和35.1%(χ2=31.161,P<0.001)[5]。MP-IgM和MP-IgG的敏感度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值及準(zhǔn)確度中(膠體金法)快速檢測(cè)MP-IgM和MP-IgG，對(duì)提高疾病診斷率、縮短病程、避免交叉感染、減輕患者及社會(huì)負(fù)擔(dān)，起效顯著[6]。磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法與被動(dòng)凝集法的陽(yáng)性符合率為95.8%,陰性符合率為96.9%,Kappa值為0.893；ELISA法的陽(yáng)性符合率為97.4%，陰性符合率為98.9%,Kappa值為0.956[7]。

綜合來(lái)講，膠體金作為一種常用標(biāo)記技術(shù)，以膠體金作為示蹤標(biāo)志物應(yīng)用于抗原抗體之免疫標(biāo)記技術(shù)，以氯金酸(HAuCl4)在白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等還原劑的作用下，聚合成相應(yīng)大小的金顆粒，并由于靜電作用而使金顆粒成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，形成攜帶著負(fù)電的疏水膠溶液。其主要方法原理為：雙抗體夾心法原理，用于較大分子量的蛋白(抗原)的檢測(cè)中檢測(cè)效果確切，比之間接熒光法(將抗原或抗體吸附在固相載體表面)和酶聯(lián)免疫吸附法(將免疫技術(shù)發(fā)展為檢測(cè)體液中微量物質(zhì)的固相免疫測(cè)定方法)在肺炎支原體抗體IgM陽(yáng)性率檢測(cè)中對(duì)比效果更明顯。

綜上所述，3種方法與臨床總符合率比較好，且各有優(yōu)缺點(diǎn)，膠體金法在肺炎支原體抗體IgM檢測(cè)中的陽(yáng)性檢出率明顯高于間接熒光法和酶聯(lián)免疫吸附法，且操作簡(jiǎn)便，結(jié)果報(bào)告快速，可作為臨床肺炎支原體抗體檢測(cè)篩查指標(biāo)；間接熒光法與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)一致性好，與臨床陽(yáng)性符合率高，可作為臨床肺炎支原體感染首選項(xiàng)目。