張宇星 馮祥 危威 劉小衛(wèi) 李武 李江山

摘要：目的? 觀察比較指按法、針刺及痛溫覺誘發(fā)電位（CHEPs）刺激器作用于正常人手三里產(chǎn)生的CHEPs，探析經(jīng)絡(luò)理論的小纖維神經(jīng)感傳方式。方法? 納入16名健康成年志愿者，檢測(cè)指按法、針刺、CHEPs刺激器作用于手三里產(chǎn)生的CHEPs，進(jìn)行自身前后對(duì)照。結(jié)果? 3種刺激手段作用于受試者手三里均可記錄到CHEPs，指按法誘發(fā)的N波潛伏期比CHEPs刺激器高120.69 ms（P<0.05），針刺誘發(fā)的N波潛伏期比CHEPs刺激器高183.69 ms（P<0.001）。指按法誘發(fā)的P波潛伏期比CHEPs刺激器高149.13 ms（P<0.05），針刺誘發(fā)的P波潛伏期比CHEPs刺激器高215.69 ms（P<0.001），指按法和針刺N(yùn)、P波潛伏期比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。未見不同刺激手段對(duì)N、P波幅存在顯著主效應(yīng)（F=0.424，P=0.658;F=1.289，P=0.290）。結(jié)論? 指按法、針刺均可誘發(fā)由小纖維介導(dǎo)的N、P波，且通過(guò)與CHEPs刺激器誘發(fā)電位比較，指按法及針刺傳導(dǎo)的小纖維速度更慢，為無(wú)髓鞘的C纖維;指按法、針刺誘發(fā)的N、P波波幅改變無(wú)明顯差異。

關(guān)鍵詞：按法;針刺;經(jīng)絡(luò);痛溫覺誘發(fā)電位;神經(jīng)傳導(dǎo);小纖維

中圖分類號(hào)：R224.1? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A? ? 文章編號(hào)：1005-5304（2020）04-0023-05

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.201908132

Discussion on Patterns of Small Fiber Neurosensory Transmission along Meridians Based on Pain-Temperature Evoked Potentials of Finger-pressing and Acupuncture on Shousanli

ZHANG Yuxing， FENG Xiang， WEI Wei， LIU Xiaowei， LI Wu， LI Jiangshan

First-class Discipline of Chinese Medicine in Hunan University of Chinese Medicine，

Changsha 410208， China

Abstract： Objective To observe and compare the Contact Heat Evoked Potentials （CHEPs） produced by finger pressing， acupuncture and CHEPs stimulator acting on Shousanli acupoint; To explore the small fiber neurosensory transmission method of meridian theory. Methods In this study， 16 healthy adults were enrolled. CHEPs were collected when received finger-pressing， acupuncture， and CHEPs stimulator acted on Shousanli acupoint to conduct self-contrast. Results CHEPs were recorded in all 16 volunteers treated with three stimulation methods in Shousanli acupoint. The latency time of N-wave evoked by finger-pressing was 120.69 ms higher than that of the CHEPs stimulator （P<0.05）. The N-wave latency induced by acupuncture was 183.69 ms higher than that of CHEPs stimulator （P<0.001）. The P-wave latency induced by finger-pressing was 149.13 ms significantly higher than that induced by CHEPs stimulator （P<0.05）. The P-wave latency caused by acupuncture was 215.69 ms higher than that induced by CHEPs stimulator （P<0.001）. There was no statistical significance in N-wave and P-wave latency of finger-pressing and acupuncture （P>0.05）. There were no significant main effects of different interventions on N-wave and P-wave amplitudes （F=0.424， P=0.658， F=1.289， P=0.290）. Conclusion Finger-pressing and acupuncture both can induce N and P waves mediated by small fibers， and compared with CHEPs stimulator， the velocity of small fibers transmitted is slower， and they are unmyelinated C fibers. There is no significant difference in the amplitude of N and P waves induced by finger pressing and acupuncture.

Keywords： finger pressing; acupuncture; meridians; CHEPs; neurosensory transmission; small fibers

經(jīng)絡(luò)系統(tǒng)在體表具有一定的循行線路，溝通機(jī)體上下、內(nèi)外。經(jīng)絡(luò)實(shí)質(zhì)的研究一直以來(lái)是醫(yī)學(xué)界的研究熱點(diǎn)，不同領(lǐng)域的學(xué)者曾嘗試各種方法，研究闡釋其內(nèi)在機(jī)理，使經(jīng)絡(luò)-神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)性一度成為研究循經(jīng)感傳機(jī)制的熱點(diǎn)。經(jīng)絡(luò)的神經(jīng)傳導(dǎo)理論中，主要從神經(jīng)生物學(xué)、神經(jīng)電生理學(xué)及神經(jīng)解剖學(xué)方向探索經(jīng)絡(luò)實(shí)質(zhì)，不同脊髓節(jié)段的刺激對(duì)內(nèi)臟產(chǎn)生不同程度的調(diào)節(jié)作用[1]。研究表明，Aδ及C神經(jīng)纖維參與內(nèi)臟調(diào)節(jié)，在經(jīng)絡(luò)感傳中起主導(dǎo)作用[2-3]。

依據(jù)直徑、傳導(dǎo)速度及有無(wú)髓鞘的不同，可將神經(jīng)劃分為多種類型。在神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)中，直徑≤7 μm的小纖維神經(jīng)占周圍神經(jīng)總數(shù)的90%[4]。對(duì)于小纖維神經(jīng)的檢測(cè)主要有傳統(tǒng)的大頭針、激光刺激、光刺激等手段，但存在不同程度缺陷，無(wú)法選擇性地興奮小纖維。痛溫覺誘發(fā)電位（contact heat evoked potentials，CHEPs）刺激器可在一定范圍內(nèi)迅速升高溫度，刺激皮膚的感覺神經(jīng)末梢，優(yōu)點(diǎn)在于它提供峰值溫度可調(diào)、在線監(jiān)測(cè)和快速反饋控制的熱脈沖，可選擇性識(shí)別、刺激薄髓鞘Aδ纖維和無(wú)髓的C纖維的傷害性感覺傳遞功能[5]，該檢測(cè)方法在臨床及科研中得到廣泛應(yīng)用[6-9]。

基于此，筆者提出指按法及針刺法所產(chǎn)生的經(jīng)絡(luò)感傳效應(yīng)主要通過(guò)Aδ及C類小纖維神經(jīng)傳導(dǎo)。使用CHEPs刺激器提供快速升溫的接觸性熱刺激，能夠可靠地誘發(fā)遲發(fā)和超晚腦電位。有學(xué)者已開發(fā)并使用CHEPs刺激器證明該方法在人類神經(jīng)電生理研究中的可行性[7-9]。本研究采用自身前后對(duì)照，分別測(cè)量志愿者手三里指按法、針刺與CHEPs刺激器所誘發(fā)的CHEPs，比較三者潛伏期及波幅關(guān)系。現(xiàn)報(bào)道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

選擇2019年5-7月浙江大學(xué)附屬邵逸夫醫(yī)院健康成年志愿者19名，其中男性11名，女性8名，年齡23～39歲。1名男性和1名女性因持續(xù)疼痛無(wú)法耐受，1名女性因干擾過(guò)大致波形不穩(wěn)，均予以排除，最終納入16名志愿者。每名志愿者在收到關(guān)于研究目的和設(shè)計(jì)的完整解釋后，簽署知情同意書。

1.2? 刺激手段

CHEPs刺激器：使用CHEPs刺激器（Medoc Ltd，Ramat Yishai，Israel），溫度計(jì)接觸面積572.5 mm2，加熱速度為70 ℃/s。刺激方式：自基線開始（適應(yīng)溫度為32 ℃），快速加熱至51 ℃時(shí)發(fā)放可調(diào)節(jié)脈沖熱刺激，單個(gè)脈沖刺激，刺激間隔10 s，連續(xù)刺激10～20次。刺激部位為手三里，為避免對(duì)熱刺激的習(xí)慣，熱模式在每次刺激后輕微移動(dòng)，保留在預(yù)定義區(qū)域[6]。

指按法：予中度手法刺激，垂直快速向下用力按壓，志愿者出現(xiàn)得氣感后停留，肌電圖儀記錄一次誘發(fā)電位信號(hào)后拇指松開，等待下一次按壓，按壓10～20次。操作均由同一位針灸推拿專業(yè)臨床醫(yī)生完成，且要求按壓時(shí)用力適中，可達(dá)到志愿者的肌肉中層組織，志愿者訴產(chǎn)生中度酸脹感為度。

針刺：常規(guī)酒精消毒手三里，予0.25 mm×50 mm一次性安迪牌針灸針（貴州安迪藥械有限公司）直刺，行提插捻轉(zhuǎn)手法，以志愿者得氣感為準(zhǔn)，肌電圖儀記錄到一次誘發(fā)電位信號(hào)后停止，等待下一次記錄，提插捻轉(zhuǎn)10～20次。針刺操作均由同一位針灸推拿專業(yè)臨床醫(yī)生完成，得氣感以志愿者在受試部位產(chǎn)生明顯的酸、麻、脹、痛為度，并記錄得氣即時(shí)產(chǎn)生的CHEPs。

1.3? 操作步驟

志愿者安靜平臥于檢查床，環(huán)境溫度26～29 ℃，為避免眼電干擾，囑其閉目，以減少眼球轉(zhuǎn)動(dòng)。在志愿者右側(cè)手三里進(jìn)行3種不同刺激，為避免致敏及脫敏，每個(gè)志愿者接受低強(qiáng)度刺激優(yōu)先級(jí)高于高強(qiáng)度刺激，先選擇低強(qiáng)度刺激的CHEPs刺激器及指按法，隨機(jī)順序刺激手三里，后予針刺提插捻轉(zhuǎn)手法。在每個(gè)刺激過(guò)程中，為避免同時(shí)刺激Aδ及C纖維，由于遞質(zhì)釋放增加，興奮性升高，動(dòng)作電位增多，導(dǎo)致外周、中樞敏化，導(dǎo)致短時(shí)間抑制C纖維所產(chǎn)生的超晚電位、Aδ纖維相關(guān)的皮質(zhì)激活產(chǎn)生皮質(zhì)發(fā)生器不應(yīng)期，此后的C纖維相關(guān)傳入信號(hào)不敏感[10]，故將3種干預(yù)手段間隔2 h。

1.4? 痛覺誘發(fā)電位檢測(cè)

參照國(guó)際腦電圖10-20系統(tǒng)記錄誘發(fā)電位，將記錄電極置于Cz（中央中線），參考電極置于Fz（額中線），右臂接地線。將阻抗控制在≤5 kΩ，通常為1～2 kΩ。檢測(cè)儀器為Keypoint型肌電圖儀（Medoc Ltd）記錄，帶通0.1～100.0 Hz，掃描速度100 ms/格，平均1～5次。

1.5? 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。采用重復(fù)測(cè)量方差分析，并進(jìn)行組間比較。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2? 結(jié)果

2.1? 3種刺激手段的誘發(fā)電位波形比較

16名志愿者中，在CHEPs刺激器、指按法、針刺刺激下，均誘發(fā)出明確電位。圖1顯示3位志愿者的CHEPs波形，在0 ms刺激后，500～900 ms內(nèi)可明顯辨別出廣泛負(fù)向到正向的波形成分，接著回落至基線位置。圖2顯示同一志愿者在CHEPs刺激器、指按法、針刺刺激下產(chǎn)生的CHEPs，在0 ms針刺刺激后，800～1000 ms內(nèi)可明顯辨別出廣泛的負(fù)向到正向的波形，與CHEPs刺激器誘發(fā)的電位相比，潛伏期明顯延長(zhǎng)。

2.2? 3種刺激手段的誘發(fā)電位潛伏期及波幅比較

CHEPs刺激器、指按法、針刺作用于手三里產(chǎn)生的CHEPs平均潛伏期及波幅見表1。重復(fù)測(cè)量潛伏期及波幅的方差分析顯示如下：經(jīng)箱線圖判斷，數(shù)據(jù)無(wú)異常值，N波潛伏期服從正態(tài)分布，且滿足Mauchlys球形假設(shè)檢驗(yàn)，因變量的方差協(xié)方差矩陣相等[x2（2）=1.87，P=0.393]。CHEPs刺激器N波潛伏期與指按法、針刺比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[F（2，30）=17.580，P<0.001]。指按法誘發(fā)的N波潛伏期比CHEPs刺激器顯著高120.69 ms（95%置信區(qū)間52.251～189.12，P<0.05），針刺比CHEPs刺激器顯著高183.69 ms（95%置信區(qū)間93.78～273.60，P<0.001）。指按法與針刺的N波潛伏期比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。經(jīng)箱線圖判斷，數(shù)據(jù)無(wú)異常值，P波潛伏期服從正態(tài)分布，且滿足Mauchlys球形假設(shè)檢驗(yàn)，因變量的方差協(xié)方差矩陣相等[x2（2）=1.244，P=0.537]。CHEPs刺激器P波潛伏與指按法、針刺比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[F（2，30）=21.246，P<0.001]。指按法誘發(fā)的P波潛伏期比CHEPs刺激器顯著高149.13 ms（95%置信區(qū)間64.13～234.12，P<0.05），針刺比CHEPs刺激器顯著高215.69 ms（95%置信區(qū)間111.96～319.41，P<0.001）。指按法和針刺P波潛伏期比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

未見不同干預(yù)手段對(duì)N、P波幅存在顯著主效應(yīng)[F（2，30）=0.424，P=0.658;F（2，30）=1.289，P=0.29]。16名志愿者潛伏期、波幅差異見圖3、圖4。結(jié)果表明，指按法及針刺所誘發(fā)的痛覺誘發(fā)電位N、P波潛伏期與CHEPs刺激器相比延長(zhǎng)，對(duì)于波幅的改變無(wú)明顯差異，指按法及針刺作用的神經(jīng)纖維與CHEPs刺激器相比更慢。

3? 討論

1959年，上海第一醫(yī)學(xué)院通過(guò)解剖探析經(jīng)絡(luò)實(shí)質(zhì)發(fā)現(xiàn)，所解剖的8條經(jīng)脈57穴上均有神經(jīng)分布，且經(jīng)絡(luò)路線與神經(jīng)分布基本符合，經(jīng)絡(luò)非穴位區(qū)的神經(jīng)多于非經(jīng)絡(luò)區(qū)[11]。李愛輝[3]通過(guò)運(yùn)用神經(jīng)電刺激并伊文氏藍(lán)滲出發(fā)現(xiàn)，Aδ及C神經(jīng)纖維的分布與經(jīng)絡(luò)的走行吻合。許多學(xué)者從不同角度證明經(jīng)絡(luò)與神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)小纖維間的關(guān)聯(lián)性。CHEPs刺激器與皮膚接觸的面積大、加熱速度快，可激活大量的傷害性感受器，選擇性興奮小的有髓鞘的Aδ纖維和無(wú)髓鞘C纖維，因其結(jié)果可客觀反映外周痛溫覺而不受受試者認(rèn)知功能影響，且不易造成皮膚灼傷，近年來(lái)有關(guān)痛覺傳導(dǎo)通路的研究中應(yīng)用越來(lái)越多。CHEPs刺激器選擇性興奮Aδ及C纖維的模式相對(duì)明確，已通過(guò)記錄腦誘發(fā)電位證實(shí)[9，12]。這為探討指按法及針刺的經(jīng)絡(luò)小纖維神經(jīng)感傳方式提供了物質(zhì)及生理基礎(chǔ)。

3.1? 針刺及指按法的痛覺傳導(dǎo)通路

疼痛傳導(dǎo)為雙通路傳導(dǎo)，在皮膚施加熱痛刺激時(shí)，產(chǎn)生快痛及慢痛。由Aδ纖維傳導(dǎo)的牽拉、機(jī)械性快痛立即產(chǎn)生，迅速消失，感覺及定位明確，目的是使機(jī)體迅速遠(yuǎn)離傷害源，保護(hù)自身;由C纖維傳導(dǎo)的慢痛約在刺激后1 s產(chǎn)生，其產(chǎn)生慢，感覺定位模糊，有極強(qiáng)的情感成分[13-14]。Aδ、C纖維既是感受器又是效應(yīng)器，既接受神經(jīng)傳導(dǎo)沖動(dòng)，同時(shí)釋放神經(jīng)肽等遞質(zhì)。針刺及指按法的臨床療效主要是興奮2種神經(jīng)，興奮慢痛神經(jīng)，從而產(chǎn)生“酸麻脹痛”之感。本研究表明，針刺及指按法所誘發(fā)的痛覺誘發(fā)電位潛伏期明顯延長(zhǎng)，指按法誘發(fā)的N波潛伏期比CHEPs刺激器高120.69 ms（P<0.05），針刺誘發(fā)的N波潛伏期比CHEPs刺激器高183.69 ms（P<0.001），指按法誘發(fā)的P波潛伏期比CHEPs刺激器高149.13 ms（P<0.05），針刺誘發(fā)的P波潛伏期比CHEPs刺激器高215.69 ms（P<0.001）。在針刺、指按法的經(jīng)絡(luò)感傳效應(yīng)中，起主要傳導(dǎo)作用的為無(wú)髓鞘的、更細(xì)的、傳導(dǎo)速度更慢的C纖維神經(jīng)。

3.2? 經(jīng)絡(luò)的小纖維神經(jīng)感傳效應(yīng)

手三里（前臂背側(cè)）位于多毛區(qū)，該區(qū)域的溫度覺主要是Aδ纖維感受器，其可被51 ℃溫度所刺激，產(chǎn)生誘發(fā)電位，而分布較少的C纖維感受器則閾值較低，41 ℃即可誘發(fā)產(chǎn)生電位[13，15]。相關(guān)研究表明，32～40 ℃的刺激可快速誘發(fā)由C纖維傳導(dǎo)的超晚電位，這些刺激大多被感知為溫暖或熱，僅有少部分表現(xiàn)為灼燒或刺痛感覺。當(dāng)刺激為40～48 ℃，甚至更高溫度時(shí)，則快速誘發(fā)晚電位，由傳導(dǎo)速度為Aδ神經(jīng)纖維介導(dǎo)，這些刺激絕大多數(shù)被感知為刺痛或燒灼感，腦電圖記錄到的為Aδ電位[12]。

指按法作用于體表的溫度在33.65～36.73 ℃[16]，盡管作用于前臂背側(cè)的多毛區(qū)，但由于溫度限制，指按法所刺激誘發(fā)的神經(jīng)纖維僅以C纖維為主。指按法作用于體表肌肉，針刺在穴位中的提插捻轉(zhuǎn)均可產(chǎn)生酸麻脹痛感，而這一感覺體現(xiàn)在溫度覺及第二慢痛層面，C纖維傳導(dǎo)的慢痛與針刺引起的酸麻脹痛感契合，針刺的燒山火、透天涼等手法產(chǎn)生的感覺與C纖維感傳的慢痛契合。本研究中，指按法及針刺的痛溫覺誘發(fā)電位為明顯的超晚電位，在經(jīng)絡(luò)感傳效應(yīng)中，正是由于介導(dǎo)超晚電位的C神經(jīng)纖維將此信息上傳至大腦皮質(zhì)，從而在腦電波中檢測(cè)出該電位。

針刺及指按法的臨床療效主要是興奮慢痛神經(jīng)，興奮慢痛神經(jīng)，從而產(chǎn)生酸麻脹痛感，指按法及針刺屬于機(jī)械外力刺激，通過(guò)感受器識(shí)別，使機(jī)械力轉(zhuǎn)換成電信號(hào)，主要通過(guò)C神經(jīng)傳入纖維上行傳導(dǎo)，經(jīng)過(guò)脊髓背角的神經(jīng)元、脊髓丘腦束、丘腦的神經(jīng)元和核團(tuán)，最后投射到皮層體感區(qū)及相關(guān)聯(lián)的皮層與核團(tuán)，形成痛溫覺誘發(fā)電位。結(jié)果顯示，指按法、針刺的痛溫覺誘發(fā)電位潛伏期較CHEPs刺激器延長(zhǎng)，結(jié)合指按法及針刺產(chǎn)生“得氣”感，為一種定位模糊、緩慢產(chǎn)生的疼痛相吻合。

3.3? 問(wèn)題與展望

首先，神經(jīng)傳導(dǎo)速度計(jì)算需要檢測(cè)出兩點(diǎn)距離和兩點(diǎn)誘發(fā)電位的潛伏期差值，而本研究?jī)H在手三里一個(gè)位置進(jìn)行刺激，故無(wú)法精確計(jì)算神經(jīng)傳導(dǎo)速度，通過(guò)神經(jīng)傳導(dǎo)速度匹配相應(yīng)的神經(jīng)纖維。其次，本研究?jī)H在前臂背側(cè)進(jìn)行刺激，該區(qū)域多毛，主要分布Aδ感受器，若能在光滑的皮膚區(qū)域進(jìn)行痛覺誘發(fā)電位試驗(yàn)，對(duì)3種刺激手段做出合理設(shè)計(jì)及客觀評(píng)價(jià)，便能更進(jìn)一步完善經(jīng)絡(luò)-小纖維感傳系統(tǒng)的效應(yīng)理論。

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（收稿日期：2019-08-09）

（修回日期：2019-10-12;編輯：季巍?。?/p>

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金（81804216）;湖南省中醫(yī)藥管理局重點(diǎn)項(xiàng)目（201721）;湖南省自然科學(xué)基金（2018JJ3396）

通訊作者：李江山，E-mail：292463008@qq.com