劉俐君，歐云文，趙小波，王 勤，張 蕾，李清竹，黎丁箕，何麗霞，李 印

布魯氏菌病(Brucellosis，簡(jiǎn)稱布病)，又稱地中海弛張熱、馬耳他熱、波狀熱，是由布魯氏菌(brucella)引起的一種人獸共患傳染病。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為B類動(dòng)物疫病，我國(guó)也將其列為二類動(dòng)物疫病，是國(guó)家《中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃(2012—2020年)》優(yōu)先防治的動(dòng)物疫病之一[1]。我國(guó)主要流行的是羊、牛和豬3種布魯氏菌，其中以羊布魯氏菌病最為多見，其次是牛種布魯氏菌，母畜胎膜發(fā)炎、流產(chǎn)、公畜不育、睪丸炎、腱鞘炎和關(guān)節(jié)炎為主要臨床特征[1]。該病主要呈地方性流行，發(fā)病無季節(jié)性，但春夏季發(fā)病率較高[1-2]。人的感染與其職業(yè)、飲食和生活習(xí)慣密切相關(guān)，感染后則表現(xiàn)出發(fā)熱伴寒戰(zhàn)、多汗、乏力、不孕不育、頭痛、神經(jīng)痛、骨關(guān)節(jié)和肌肉疼痛等癥狀[3-4]。目前，全球多個(gè)國(guó)家(地區(qū))均有布病報(bào)告，我國(guó)部分地區(qū)也曾廣泛流行，給畜牧業(yè)持續(xù)健康發(fā)展和人類健康造成嚴(yán)重威脅[5-10]。

達(dá)州市地勢(shì)以山區(qū)和丘陵為主，十分適合發(fā)展草食牲畜養(yǎng)殖業(yè)，但該地區(qū)地域面積廣，人口基數(shù)大，牲畜跨省流通頻繁，布病防控形勢(shì)復(fù)雜嚴(yán)峻。因此，為了掌握達(dá)州地區(qū)羊布病流行現(xiàn)狀和趨勢(shì)，現(xiàn)對(duì)2015—2018年布病監(jiān)測(cè)結(jié)果進(jìn)行綜合分析，以期為該地區(qū)羊布病的防控提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材 料

1.1.1血清樣本 以達(dá)州市7個(gè)縣(市、區(qū))的奶山羊、引入羊、種公羊、種母羊和4月齡以上的商品羊?yàn)椴蓸訉?duì)象，按照血清制備方法離心制備血清，—20 ℃冷凍保存。

1.1.2診斷試劑 布病虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBT)、試管凝集試驗(yàn)(SAT)抗原、布病標(biāo)準(zhǔn)陽性血清、陰性血清由中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所提供，均在有效期內(nèi)。

1.2 方 法

1.2.1抽樣方案 每年6～8月在達(dá)州市7個(gè)縣(市、區(qū))進(jìn)行多階段抽樣，采用發(fā)現(xiàn)疫病或證明無疫的樣本量公式計(jì)算抽樣量。第一階段：以預(yù)估流行率計(jì)算樣本量，置信區(qū)間(CI)設(shè)為95%，可接受誤差設(shè)為5%，預(yù)期流行率設(shè)為50%，計(jì)算出各縣(市、區(qū))需抽選鄉(xiāng)(鎮(zhèn))數(shù)量，并用簡(jiǎn)單隨機(jī)法抽選鄉(xiāng)(鎮(zhèn))；第二階段：鄉(xiāng)(鎮(zhèn))級(jí)抽選轄區(qū)內(nèi)的所有羊場(chǎng)(戶)，進(jìn)入羊場(chǎng)(戶)后，按發(fā)現(xiàn)疫病或證明無疫計(jì)算樣本量，置信區(qū)間(CI)設(shè)為95%。根據(jù)文獻(xiàn)[11]報(bào)道虎紅平板凝集試驗(yàn)的樣品率標(biāo)準(zhǔn)差(Sp)為92%，因此，2015-2018年羊布病的預(yù)期個(gè)體陽性率分別設(shè)定為15%、6%、3%和1%，RBT初篩為布病陽性的羊場(chǎng)(戶)，需全群采樣。

1.2.2問卷調(diào)查 按照流行病學(xué)調(diào)查方法，對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)的基本信息、飼養(yǎng)方式、引種管理、生物安全措施以及業(yè)主對(duì)布病的認(rèn)知度等內(nèi)容進(jìn)行問卷調(diào)查，并歸類存檔。

1.2.3實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) 采用虎紅平板凝集試驗(yàn)對(duì)血清樣品進(jìn)行初篩，對(duì)疑似陽性樣品進(jìn)行試管凝集試驗(yàn)復(fù)核，具體操作方法參照《動(dòng)物布魯氏菌病診斷技術(shù)》(GB/T 18646-2002)。結(jié)果判定：采用虎紅平板凝集試驗(yàn)檢測(cè)，結(jié)果為陽性者判為疑似陽性樣品；疑似陽性樣品經(jīng)試管凝集試驗(yàn)檢測(cè)，結(jié)果為陽性者判為確診陽性樣品；群體內(nèi)至少檢出1個(gè)確診陽性樣品的群體為陽性群體。

1.2.4統(tǒng)計(jì)分析 采用Excel 2007進(jìn)行資料整理，運(yùn)用Epi info 7進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)因素分析；用ArcGIS 10.6 繪制區(qū)域分布圖；用SPSS 20.0軟件對(duì)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行卡方檢驗(yàn)和Fisher確切概率檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。

2 結(jié) 果

2.1抽樣結(jié)果 2015—2018年，在達(dá)州市7個(gè)縣(市、區(qū))抽取1 900個(gè)規(guī)模場(chǎng)(存欄量≥50只)和1 299個(gè)散養(yǎng)戶(存欄量<50只)，共采集羊血清樣品69 630份。

2.2問卷調(diào)查結(jié)果 對(duì)全市59個(gè)布病陽性養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)及相鄰的布病陰性養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)進(jìn)行問卷調(diào)查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：近1年內(nèi)引羊(OR=9.11，95%CI：1.08～77.29)、新購入羊只不隔離(OR=6.78，95%CI：1.33～34.45)、臨產(chǎn)母羊不與其他羊隔離飼養(yǎng)(OR=5.63，95%CI：1.61～19.72)是布病感染養(yǎng)殖場(chǎng)和在場(chǎng)內(nèi)擴(kuò)散的主要風(fēng)險(xiǎn)因素。通過對(duì)KAPs測(cè)試結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)：一是該地區(qū)養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)主動(dòng)防疫和個(gè)人防護(hù)意識(shí)薄弱，對(duì)布病認(rèn)識(shí)不到位；二是該地區(qū)多為山地和丘陵，羊養(yǎng)殖模式以放牧居多，且規(guī)模小、設(shè)施設(shè)備簡(jiǎn)陋、防疫條件差、養(yǎng)殖模式落后、家畜流動(dòng)性大。

2.3檢測(cè)結(jié)果概況 2015—2018年，對(duì)達(dá)州市3 199個(gè)場(chǎng)點(diǎn)抽檢的69 630份羊血清樣品進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，全市共監(jiān)測(cè)到59個(gè)陽性場(chǎng)(戶)，檢出陽性樣品835份，場(chǎng)(戶)平均陽性率為1.84%，樣品平均陽性率為1.20%。2015—2018年場(chǎng)(戶)陽性率分別為6.30%、2.30%、0.80%和0.18%，陽性率下降趨勢(shì)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=3 199, χ2=66.415，P<0.05)；2015—2018年陽性樣品率分別為4.55%、1.90%、0.61%和0.01%，陽性率逐年下降差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=69 630, χ2=1 121.088，P<0.01)(表1)。

表1 2015—2018年達(dá)州市羊布病監(jiān)測(cè)結(jié)果
Tab.1 Surveillance results of goat brucellosis in Dazhou, 2015-2018

年度場(chǎng)戶數(shù)/個(gè)陽性數(shù)/個(gè)場(chǎng)戶陽性率(%)樣品數(shù)/份陽性數(shù)/份樣品陽性率(%)2015444286.318 2683764.552016769182.3413 8102631.9020171 417120.8532 0011950.61201856910.1815 55110.01合計(jì)3 199591.8469 6308351.20

2.4區(qū)域分布情況 2015-2018年，從區(qū)域分布分析，全市除渠縣外，其余6個(gè)縣(市、區(qū))均檢測(cè)出布病陽性場(chǎng)點(diǎn)，場(chǎng)(戶)平均陽性率為0%～4.77%，其中達(dá)川區(qū)場(chǎng)(戶)平均陽性率最高，為4.77%，與其他縣(市、區(qū))比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=3 199, χ2=34.612,P<0.05)；其次為萬源市，其場(chǎng)(戶)平均陽性率為3.61%。2015年，達(dá)川區(qū)場(chǎng)(戶)陽性率、最高，為14.55%，與其他縣(市、區(qū))比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=444, Fisher 確切概率檢驗(yàn)，P=0.012)；2016年，萬源市場(chǎng)(戶)陽性率最高，為11.11%，與其他縣(市、區(qū))比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=769, Fisher 確切概率檢驗(yàn)，P=0.01)；2017年，萬源市場(chǎng)(戶)陽性率最高，為3.08%，與其他縣(市、區(qū))比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=1 417, Fisher 確切概率檢驗(yàn)，P=0.02)；2018年，全市除宣漢縣檢測(cè)出1份陽性樣品外，其余6個(gè)縣(市、區(qū))均未檢測(cè)出布病陽性樣品(圖1)。

圖1 2015—2018年達(dá)州市不同縣(市、區(qū))羊場(chǎng)布病陽性率情況Fig.1 Brucellosis positive rate of goat farm in different counties, 2015—2018

2.5不同規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)監(jiān)測(cè)情況 2015-2018年，該地區(qū)不同規(guī)模的養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)均監(jiān)測(cè)出布病陽性樣品，其中存欄量<50只的場(chǎng)(戶)出現(xiàn)陽性場(chǎng)(戶)數(shù)最多，場(chǎng)(戶)陽性率為2.00%，場(chǎng)(戶)陽性率與存欄規(guī)模呈負(fù)相關(guān)，但不同規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)之間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=3 199, χ2=0.497,P>0.05)。2015年，存欄量<50只的場(chǎng)(戶)的場(chǎng)(戶)陽性率最高，為9.21%，其中存欄量<100只與存欄量≥100只的場(chǎng)(戶)陽性率比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=444, χ2=3.958,P<0.05)；2016年，存欄量<50只的場(chǎng)(戶)的場(chǎng)(戶)陽性率亦最高，為4.71%；2017年，存欄量在50～100只的養(yǎng)殖場(chǎng)的場(chǎng)(戶)陽性率最高，為1.62%；2018年，僅在存欄量≥100只的養(yǎng)殖場(chǎng)中監(jiān)測(cè)出陽性樣品(表2)。

表2 2015—2018年達(dá)州市不同規(guī)模羊場(chǎng)(點(diǎn))布病監(jiān)測(cè)結(jié)果
Tab.2 Brucellosis surveillance results of different large-scale goat farm in Dazhou, 2015-2018

年份養(yǎng)殖規(guī)模(只)存欄量≥10050≤存欄量<100存欄量<50合計(jì)2015年場(chǎng)戶數(shù)191112141444陽性數(shù)781328陽性率(%)3.667.149.216.302016年場(chǎng)戶數(shù)289289191769陽性數(shù)45918陽性率(%)3.401.734.712.342017年場(chǎng)戶數(shù)2683707791417陽性數(shù)26412陽性率(%)0.741.620.510.842018年場(chǎng)戶數(shù)133248188569陽性數(shù)1001陽性率(%)0.750.000.000.18合計(jì)陽性率(%)1.73(14/881)1.86(19/1 019)2.00(26/1 299)1.84(59/3 199)

2.6陽性場(chǎng)點(diǎn)監(jiān)測(cè)情況 2015-2018年，監(jiān)測(cè)為布病陽性場(chǎng)(戶)的樣品平均陽性率為30.56%，2017年陽性場(chǎng)(戶)的樣品陽性率最高，2018年陽性場(chǎng)(戶)的樣品陽性率最低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=4 025, χ2=40.787,P<0.01)。陽性場(chǎng)(戶)的布病以隱性感染為主，無明顯臨床癥狀或放養(yǎng)過程流產(chǎn)不易被發(fā)現(xiàn)，因此，陽性場(chǎng)(戶)的樣品陽性率均普遍較高(表3)。

表3 2015—2018年達(dá)州市羊布病陽性場(chǎng)(點(diǎn))監(jiān)測(cè)結(jié)果
Tab.3 Surveillance results of goat brucellosis positive farm in Dazhou, 2015—2018

年度場(chǎng)戶數(shù)/個(gè)存欄量/只樣品數(shù)/份陽性樣品數(shù)/份樣品陽性率(%)2015282 3162 09458828.082016181 4971 26444735.3620171280151219437.892018117515510.65合計(jì)594 7894 0251 23030.56

3 討 論

布病作為重要的人獸共患病，在我國(guó)多個(gè)地區(qū)流行，按照布魯氏菌病診斷方法和疫區(qū)判定標(biāo)準(zhǔn)，四川省共有48個(gè)布病疫區(qū)縣，主要分布在阿壩、甘孜、涼山、成都、雅安、內(nèi)江和綿陽市(州)[12]。達(dá)州地處川渝陜3省(市)結(jié)合部, 是四川東出北上門戶，屬布病凈化區(qū)域。1985年，達(dá)州市從市外引入的山羊中首次監(jiān)測(cè)到布病。近年來，四川省大力發(fā)展草食牲畜，隨著活羊價(jià)格波動(dòng)，羊的交易調(diào)運(yùn)頻繁，布病的防控形勢(shì)變得復(fù)雜嚴(yán)峻。2014年，達(dá)州市疾病預(yù)防控制中心首次報(bào)告了達(dá)州地區(qū)人間布病病例，隨后達(dá)州市、縣兩級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心在轄區(qū)內(nèi)開展了羊場(chǎng)布病監(jiān)測(cè)凈化工作。為提高抽樣的精準(zhǔn)度，在計(jì)算第一階段抽樣量時(shí)，預(yù)估流行率設(shè)為50%，采取最大采樣量。達(dá)州地區(qū)羊場(chǎng)規(guī)?；潭容^低，生物安全等級(jí)差，不同批次、日齡的羊混養(yǎng)，養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)一旦引入布病陽性羊，極易在群體中傳播，隨著布病凈化工作的推進(jìn)，個(gè)體陽性率逐漸降低。因此，2015—2018年羊布病的預(yù)期個(gè)體陽性率分別設(shè)為15%、6%、3%和1%。

2015—2018年，達(dá)州市3 199個(gè)場(chǎng)(戶)、69 630份羊血清的布病監(jiān)測(cè)結(jié)果表明，該地區(qū)共監(jiān)測(cè)出59個(gè)陽性場(chǎng)(戶)，835份陽性樣品，場(chǎng)(戶)平均陽性率為1.84%，樣品平均陽性率為1.20%，場(chǎng)(戶)陽性率下降趨勢(shì)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=3 199, χ2=66.415,P<0.05)，樣品陽性率逐年下降差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=69 630, χ2=1121.088,P<0.01)。從區(qū)域分布分析，發(fā)現(xiàn)該地區(qū)除渠縣外，其余6個(gè)縣(市、區(qū))均檢測(cè)出布病陽性場(chǎng)(戶)，其中達(dá)川區(qū)場(chǎng)(戶)陽性率最高，為4.77%，與其他縣(市、區(qū))比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=3 199, χ2=34.612,P<0.05)，全市各縣(市、區(qū))場(chǎng)(戶)陽性率均呈總體下降趨勢(shì)，主要呈點(diǎn)狀散發(fā)性流行。這一系列數(shù)據(jù)的變化主要?dú)w因于該市采取檢疫、監(jiān)測(cè)、檢測(cè)、陽性場(chǎng)點(diǎn)全群撲殺、無害化處理等綜合防控措施，全面開展了畜間布病專項(xiàng)監(jiān)測(cè)、凈化工作，全市陽性場(chǎng)(戶)數(shù)逐年減少，樣品陽性率從4.55%下降至0.01%，顯著低于四川省樣品布病陽性率的平均水平(0.65%)[13]。從養(yǎng)殖場(chǎng)規(guī)模分析，發(fā)現(xiàn)該地區(qū)不同規(guī)模的養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)均監(jiān)測(cè)出布病陽性樣品，其中存欄量<50只的場(chǎng)(戶)出現(xiàn)陽性場(chǎng)點(diǎn)數(shù)最多，場(chǎng)(戶)陽性率為2.00%，場(chǎng)(戶)陽性率與存欄規(guī)模呈負(fù)相關(guān)，但不同規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)之間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=3 199, χ2=0.497,P>0.05)。經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查分析發(fā)現(xiàn)，養(yǎng)殖戶防疫意識(shí)薄弱，養(yǎng)殖模式落后，防疫條件差，未經(jīng)檢疫隨意引種、種羊交換和買賣現(xiàn)象頻繁是散養(yǎng)戶高機(jī)率發(fā)生和流行布病的主要因素。

總體而言，布病的監(jiān)測(cè)、凈化工作已取得初步成效，但要想鞏固防控成果還需進(jìn)一步做好以下工作。一是對(duì)養(yǎng)殖戶加強(qiáng)宣傳與培訓(xùn)工作，提高其主動(dòng)防疫和個(gè)人防護(hù)意識(shí)；二是制定行之有效的檢疫監(jiān)管政策和措施，切斷疫病傳入和擴(kuò)散的渠道，從源頭上預(yù)防疫病發(fā)生；三是爭(zhēng)取各級(jí)政府和主管部門的重視，保障監(jiān)測(cè)和撲殺經(jīng)費(fèi)，對(duì)經(jīng)濟(jì)價(jià)值不高的牲畜全群撲殺；四是加強(qiáng)與衛(wèi)生等相關(guān)部門的信息共享，形成合力，聯(lián)防聯(lián)控，才能保障畜牧業(yè)持續(xù)、健康發(fā)展和人類健康。

利益沖突：無