近日,中國農業(yè)科學院作物科學研究所大豆育種技術創(chuàng)新與新品種選育創(chuàng)新團隊,利用改造后的CRISPR基因組編輯系統(tǒng),率先實現(xiàn)了大豆基因的單堿基替換,并獲得了表型穩(wěn)定的純合突變系。該研究是大豆單堿基替換研究工作的首例報道,為精準修飾和利用單核苷酸多態(tài)性(SNP)改良大豆農藝性狀提供了新技術、新方法。相關研究成果在線發(fā)表在《植物生物技術雜志(Plant Biotechnology Journal)》上。
據(jù)侯文勝研究員介紹,作為一種簡單有效的基因組編輯工具,CRISPR已在多種重要作物中實現(xiàn)了基因定點敲除、等位基因單堿基替換和外源DNA片段定點整合,但在大豆中的成功實踐還很少見。
該研究通過組合Cas9n切口酶、大鼠胞苷脫氨酶和尿嘧啶糖基化酶抑制劑,建立了大豆單堿基編輯技術體系,并成功實現(xiàn)了大豆開花調控關鍵基因GmFT2a和GmFT4的單堿基定向替換,效率分別為18.2%和6.0%。在GmFT2a靶位點實現(xiàn)了C→T和C→G兩種類型的單堿基替換、在GmFT4靶位點實現(xiàn)了C→G單堿基替換。單堿基替換突變可穩(wěn)定遺傳,篩選獲得的GmFT2a單堿基替換純合突變系,在16小時光照/8小時黑暗和12小時光照/12小時黑暗的2種日照條件下均表現(xiàn)出晚花表型。這是該團隊利用CRISPR基因組編輯系統(tǒng)率先實現(xiàn)大豆基因定點敲除、DNA區(qū)段刪除、多基因突變后,在大豆基因組編輯技術應用中取得的新進展,進一步拓展了大豆基因組編輯工具應用范圍和農藝性狀改良手段。
該研究得到國家重點研發(fā)計劃、國家自然科學基金和中國農科院科技創(chuàng)新工程等項目資助。