武永春

（太原市疾病預(yù)防控制中心 山西太原 030012）

1 前言

本文對某地區(qū)城市消費者的飲用桶裝水和飲水機(jī)各個部位的微生物污染情況進(jìn)行了抽樣調(diào)查，通過調(diào)查得到了一些具有指導(dǎo)意義的數(shù)據(jù)，以供參考。

2 材料與方法

2.1 材料

研究對象為某地區(qū)飲用桶裝水生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的18.9 L 的桶裝飲用水。對這些飲用水出廠的狀態(tài)進(jìn)行抽樣檢測可知，其微生物指標(biāo)等各個方面都符合GB 8538—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)飲用天然礦泉水檢驗方法》[1]。為了有效分析二次污染問題，對本次研究的飲用水進(jìn)行了跟蹤調(diào)查，隨機(jī)抽取并分析了當(dāng)?shù)啬承┫M者的桶裝飲用水的二次微生物污染問題。

2.2 方法

2.2.1 流經(jīng)飲水機(jī)桶裝飲用水的調(diào)查方法

使用無菌法采集飲水機(jī)內(nèi)部的冷水樣本，然后通過GB 8538—2016 規(guī)定的食品微生物檢測方法對飲用水內(nèi)部的微生物進(jìn)行統(tǒng)計。

2.2.2 飲水機(jī)內(nèi)膽微生物污染調(diào)查

為了更為精準(zhǔn)地調(diào)查桶裝飲用水的飲水機(jī)內(nèi)部的微生物污染情況，在結(jié)束冷水采集后，需要采用相應(yīng)的方法（棉拭子法）對飲水機(jī)內(nèi)膽及跟其接觸部分的水樣進(jìn)行采集。然后使用同樣的方法采集多種水樣，使用GB 8538—2016 規(guī)定的方法對其中的微生物進(jìn)行檢測和評價。

2.2.3 桶口、桶頸處微生物污染調(diào)查

在飲水機(jī)使用過程中，所有的水流都會與桶裝水的桶口進(jìn)行接觸，因此，在對飲水機(jī)微生物二次污染情況進(jìn)行研究的過程中，檢測桶裝水桶口部位的微生物污染情況很有必要，可進(jìn)一步明確微生物污染范圍。棉拭子法同樣適用于對水桶的桶口和桶頸的部位進(jìn)行采樣。

3 結(jié)果

通過本次調(diào)查可知，從桶裝水內(nèi)部流出的水中，主要不合格的各類霉菌為大腸桿菌和酵母菌等。具體結(jié)果詳見表1、表2。

表1 調(diào)查結(jié)果

表2 微生物檢驗結(jié)果

4 討論

4.1 冷水端飲用水污染情況分析

對調(diào)查的所有用戶中飲用水的污染情況進(jìn)行分析可知，家庭用戶、機(jī)關(guān)單位用戶、旅館及飯店用戶冷水端的大腸桿菌陽性率達(dá)到了43%、48%、57%，均嚴(yán)重超標(biāo)。甚至在飲水機(jī)接觸底部、內(nèi)膽壁等部位還存在一些肉眼可見霉斑。冷水端是大部分飲水機(jī)用戶的常用水端，直接引用冷水端的出水，導(dǎo)致胃腸道疾病，例如，腹痛、腹瀉等。一些用戶在出現(xiàn)胃腸道不適后，往往首先懷疑是出廠的飲用水不潔，甚至存在污染，但在進(jìn)行研究之前，對所有內(nèi)部水源的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，出廠時桶裝水的質(zhì)量都合乎國家的相關(guān)生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)[2]。

4.2 熱水端飲用水污染情況分析

與冷水端相比，熱水端的平均菌落總數(shù)較少，但相比之下，家庭用戶熱水端的菌落數(shù)量超遠(yuǎn)機(jī)關(guān)單位用戶和旅館及飯店用戶。這可能與家庭用戶對熱水端的使用頻率有關(guān)，長期不使用也會造成菌落的聚集[3]。且家庭用戶、機(jī)關(guān)單位用戶和旅館及飯店用戶飲水機(jī)熱水端的腸桿菌陽性率分別為38%、27%、35%，均未達(dá)到國家標(biāo)準(zhǔn)。

4.3 飲水機(jī)內(nèi)膽長時間不清洗導(dǎo)致的污染嚴(yán)重

本文研究的桶裝飲用水在出廠時都是經(jīng)過嚴(yán)格檢測的，都符合國家衛(wèi)生的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。飲用水存在微生物超標(biāo)的情況，并不是由于飲用水生產(chǎn)廠家在飲用水生產(chǎn)過程中引入的，其最根本原因是因為二次污染。基于此，本文隨機(jī)抽取了90 桶桶裝飲用水進(jìn)行調(diào)查研究，結(jié)果顯示，這些用戶當(dāng)中，56%的用戶飲水機(jī)的使用年限長達(dá)3 年，使用時間最短的也超過了3 個月（3%）。另外，城市居民對于飲水機(jī)方面的知識了解不多，會定期對飲水機(jī)進(jìn)行清潔的用戶不到3%，而偶爾會對飲水機(jī)進(jìn)行清理的用戶也不到5%。大多數(shù)用戶只有首次使用飲水機(jī)前對其進(jìn)行清洗，之后未曾清洗。之所以會出現(xiàn)這種情況，主要由以下3 個因素造成：（1）由于日常的工作生活過于繁忙，用戶在飲水機(jī)的使用過程當(dāng)中，沒有時間對飲水機(jī)進(jìn)行清洗；（2）部分用戶并不太清楚飲水機(jī)的正常使用要求；（3）部分用戶沒有關(guān)注過飲水機(jī)的使用情況。

4.4 桶裝飲用水搬運過程存在著一定的污染

城市居民用戶的桶裝飲用水通常都是由相關(guān)的廠商派遣送水人員送至用戶處所[3-5]，運輸過程中可能會有一部分桶裝水被污染，還需進(jìn)一步進(jìn)行分析調(diào)查。

5 控制措施

5.1 制定合理的控制措施

為了有效降低城市居民在桶裝水使用過程中的二次污染，應(yīng)該采取一定的控制措施：

（1）桶裝水的生產(chǎn)廠家要嚴(yán)格控制出廠檢驗，嚴(yán)格把控桶裝水的生產(chǎn)環(huán)節(jié)，保障桶裝水的出廠質(zhì)量達(dá)到國家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，從源頭上避免污染。

（2）絕大部分飲水機(jī)飲用水污染都是由于飲水機(jī)使用不當(dāng)造成的，而在調(diào)查中也發(fā)現(xiàn)，很多用戶并不清楚飲水機(jī)的正常使用要求，也沒有足夠關(guān)注飲水機(jī)的清洗問題。這就要求飲水機(jī)生產(chǎn)廠家做好相應(yīng)的提醒工作，在飲水機(jī)的顯眼部位張貼相關(guān)的標(biāo)簽和標(biāo)語，保證用戶意識到對飲水機(jī)進(jìn)行清理的重要性，以及不定期清理飲水機(jī)可能造成的危害，提高用戶的飲水機(jī)清理意識。與此同時，飲水機(jī)廠家及售賣方也應(yīng)加強(qiáng)對該方面常識的宣傳和普及，可以通過飲水機(jī)使用手冊、播放小視頻等方式，將飲水機(jī)清理知識插入售賣廣告中，提高飲水機(jī)清理知識的普及度。另外，飲水機(jī)生產(chǎn)廠家也可以將飲水機(jī)清理作為一項售后服務(wù)，為用戶提供更為專業(yè)和便捷的清理。消費者購買飲水機(jī)時，銷售人員應(yīng)當(dāng)明確告知其長期不清理飲水機(jī)的危害，可以定期通過微信、短信等方式提醒用戶清理飲水機(jī)。

（3）由于飲用水搬運過程中可能存在一定的污染，因此，桶裝水廠商應(yīng)該加強(qiáng)對搬運人員的培訓(xùn)與管理，要求其掌握基本的衛(wèi)生知識，在搬運和安裝的過程中保持手部衛(wèi)生，必要時佩戴一次性手套，避免用手直接接觸桶口、桶機(jī)接口和內(nèi)膽等部位。

5.2 采用正確的檢測方法

5.2.1 LAMP 檢測

環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增技術(shù)（LAMP）是利用鏈置換脫氧核糖核酸（DNA）聚合酶在等溫條件下進(jìn)行反應(yīng)的[6]，40 min 內(nèi)可完成核酸擴(kuò)增，檢測過程不需昂貴的儀器設(shè)備，使用簡單的水浴鍋即可，且擴(kuò)增產(chǎn)物無需煩瑣的電泳過程，快速靈敏、特異性強(qiáng)、成本低，尤其適用于大量、即時的病原微生物的初篩，易于在基層推廣應(yīng)用[7，8]。

5.2.2 PCR 法

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)是在體外合適條件下，以DNA 為模板，以一對人工合成的寡核苷酸為引物，在耐熱DNA 聚合酶作用下特異性擴(kuò)增目的DNA片段的技術(shù)[9]。應(yīng)用PCR 技術(shù)檢測食源性致病菌分為常規(guī)PCR、實時熒光定量PCR、多重PCR 等，為了提高檢測靈敏度，可采用一定的增菌方式提高目標(biāo)DNA片段的濃度。曾曉琮等[10]建立了常規(guī)PCR技術(shù)檢測桶裝水銅綠假單胞菌的方法，該方法包括過濾、增菌、過濾、提取DNA、電泳等步驟，整個操作過程僅約需22 h，然而無法區(qū)分活細(xì)菌和死細(xì)菌，容易造成假陽性[11]。為了克服這個缺點，可添加10 μg/mL 疊氮溴乙錠（EMA），這樣既能有效抑制死菌PCR 又不影響活菌PCR，可進(jìn)一步實現(xiàn)對水中活菌的檢測。相比常規(guī)PCR 法，熒光定量PCR 技術(shù)在反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)或染料，通過熒光信號的強(qiáng)弱反映擴(kuò)增過程中模板濃度的變化，具有更強(qiáng)的檢測靈敏度和特異性。

6 結(jié)語

綜上所述，飲水機(jī)配套桶裝飲用水微生物污染檢測不容忽視，這就需要用戶從自身做起，加強(qiáng)對飲用水污染檢測的認(rèn)識，并采用合適的檢測方法，減少飲用水中微生物的污染。