文│郭明佳 王智波（山東省龍口市畜牧獸醫(yī)站）

我國是養(yǎng)兔大國，兔養(yǎng)殖量居全球首位。但由于養(yǎng)殖技術(shù)水平較低，且大多數(shù)為農(nóng)戶散養(yǎng)，養(yǎng)殖密度高，衛(wèi)生環(huán)境差，各種疫病時常暴發(fā)，對養(yǎng)殖場戶造成較大的經(jīng)濟損失。兔出血性敗血癥作為一種常見的兔病毒性傳染病，雖然已經(jīng)有了成熟的商品化疫苗，但該病在我國的主要兔養(yǎng)殖地區(qū)仍然呈現(xiàn)出地方流行性。

一、兔出血性敗血癥

1.流行病學。兔出血性敗血癥是由兔巴氏桿菌所引起的一種多型性、散發(fā)性的地方性傳染病，該病可以引起9周齡到6月齡的不同年齡段的兔死亡，感染對象沒有年齡特異性。其病原巴氏桿菌是一種條件性致病菌，可以長期潛伏于健康動物體內(nèi)，當動物免疫力下降時可引起動物發(fā)病并死亡。巴氏桿菌可以感染包括牛、雞、兔和豬在內(nèi)的多種畜禽，并且呈散發(fā)性的分布在全球100多個國家和地區(qū)。該病可以通過發(fā)病兔的消化系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)傳播到健康動物，發(fā)病兔及其排泄物是其最主要的傳染源，吸血節(jié)肢動物也可充當有效的傳播媒介，且該病無季節(jié)特異性，全年皆可發(fā)病，但氣候驟然變化是該病主要誘因，因此該病主要發(fā)生于冷熱變化交替劇烈的潮濕多雨季節(jié)。

2.臨床癥狀。由于不同個體、衛(wèi)生環(huán)境及病原致病性的不同，該病潛伏期長短不定，較為常見的是數(shù)小時到5天不等。根據(jù)發(fā)病部位的不同，該病可以分為鼻炎型、流行性肺炎型、敗血癥型、子宮積膿型、睪丸炎型、中耳炎型及結(jié)膜炎型等多種不同類型，其中鼻炎型最為常見，主要表現(xiàn)為病兔外鼻孔被毛潮濕并纏結(jié)、打噴嚏、咳嗽，流出漿液性分泌物，呼吸困難?；急茄仔屯貌“Y延長可以轉(zhuǎn)換為肺炎性，肺炎性兔常表現(xiàn)為食欲廢絕、精神不振、體溫增高，偶爾會表現(xiàn)出腹瀉和關(guān)節(jié)腫大。出血性敗血癥型兔病程較短，死亡較早因此無明顯臨床癥狀。中耳炎型病兔常表現(xiàn)出斜頸現(xiàn)象。結(jié)膜炎型病兔常見流淚，結(jié)膜充血、紅腫，眼內(nèi)有分泌物。生殖系統(tǒng)型病兔一般表現(xiàn)為子宮肌炎、子宮積膿、陰道炎和睪丸炎等。

3.病理學特征。病程較短的患病兔剖檢僅能觀察到輕微的病理學特征，但病程較長的患病兔病理變化以敗血性為主。鼻炎型病毒的鼻腔和副鼻竇內(nèi)分泌有大量的膿性、黏性分泌物，鼻黏膜紅腫糜爛，發(fā)病嚴重病兔會出現(xiàn)鼻漏現(xiàn)象。肺炎型病兔肺臟水腫、出血充血、硬化甚至萎縮并形成結(jié)節(jié)，胸腔中含有大量黃色膿性分泌物。敗血癥型病兔表現(xiàn)全身性的病理變化，包括黏膜腫脹出血，心臟內(nèi)外膜有大量的出血點，肝臟腫大變脆并有許多白色壞死灶，脾臟和淋巴結(jié)等免疫器官腫大出血。中耳炎型病兔鼓膜和鼓室內(nèi)壁變紅，有時鼓室破裂，膿性滲出物流入外耳道，嚴重時出現(xiàn)化膿性腦膜炎病變。對膿腫型病兔的剖解結(jié)果發(fā)現(xiàn)膿腫現(xiàn)象可能發(fā)生在全身各處。有子宮炎的母兔陰道有膿性分泌物，公兔的睪丸炎表現(xiàn)為一側(cè)或兩側(cè)睪丸出現(xiàn)腫大現(xiàn)象。

二、兔出血性敗血癥的診斷

1.病原分離培養(yǎng)。對未發(fā)病的但有潛在患病風險的兔群可以采集鼻腔及分泌物，而發(fā)病兔可以采集心、肝、脾等實質(zhì)臟器，將采集的樣品處理后接種于麥康凱和腦心浸出液（BHI）培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)24小時，麥康凱培養(yǎng)基可抑制其他細菌生長，BHI培養(yǎng)基上可觀察灰白色的露珠樣單個菌落，對單個菌落進行純化后進行染色鏡檢和生化鑒定。

2.血清學檢測。臨床上可以采用瓊脂擴散試驗、間接血凝實驗和酶聯(lián)免疫吸附試驗等多種血清學方法對該病進行檢測。瓊脂擴散試驗雖操作簡單且特異性好，但存在靈敏度較差且反應(yīng)時間較長等問題。間接血凝試驗與瓊脂擴散試驗相似都具有操作簡單、靈敏度高等優(yōu)點，但由于血凝抗原的穩(wěn)定性較差，因此需要頻繁制備。使用純化的多殺性巴氏桿菌抗原蛋白作為抗原建立的間接ELISA檢測方法同樣可以對該病進行檢測，且有報道認為間接ELISA檢測的靈敏度顯著高于其他兩種方法。

3.分子生物學檢測。隨著分子生物學的快速發(fā)展，DNA雜交及PCR等分子生物學方法也被廣泛地用于病原生物的檢測，分子生物學方法與傳統(tǒng)方法相比具有所需時間較短、靈敏度較高的優(yōu)點，但對技術(shù)和平臺要求較高。細菌基因組的16S rRNA由于其種內(nèi)保守中間特異，是分子生物學檢測的重要靶標分子，同時不同種細菌又具有其特異性的鑒定基因，如多殺性巴氏桿菌的KMT1基因，由于該基因的種特異性可以作為鑒定多殺性巴氏桿菌的特異性靶標。

三、兔出血性敗血癥常用疫苗

1.滅活疫苗。多殺性巴氏桿菌全菌滅活苗是目前最為常見的預(yù)防兔出血性敗血癥的商品化疫苗，其通常是選擇地方流行株傳代培養(yǎng)滅活后加入適當?shù)臏缁顒┻M行滅活，同時添加適當?shù)拿庖咦魟┮蕴岣咚拿庖咴?。但由于全菌滅活苗不能很好地激起機體產(chǎn)生交叉保護因子，因此其僅能對同種血清型的毒株提高保護力，且由于滅活疫苗制備的工藝問題，多殺性巴氏桿菌的某些抗原蛋白可能會發(fā)生缺失從而降低該疫苗的免疫保護力。目前常用的滅活疫苗除了多殺性巴氏桿菌單價滅活疫苗以外，還有多殺性巴氏桿菌—魏氏梭菌二價滅活苗及多殺性巴氏桿菌—魏氏梭菌—兔病毒性出血癥病毒三價滅活疫苗。

2.亞單位疫苗。為了解決滅活疫苗所存在的問題，有大量的研究人員嘗試提取或合成多殺性巴氏桿菌的特定抗原蛋白（如外膜蛋白及脂多糖等）進而制備亞單位疫苗。亞單位疫苗僅由細菌的部分蛋白做組成，因此不具有感染能力，因此可以避免滅活疫苗滅活不完全的潛在風險，同時亞單位疫苗可以由不同亞型的抗原蛋白組成，從而提高疫苗對不同亞型毒株的交叉保護能力。有研究報道認為多殺性巴氏桿菌的外膜蛋白OmpH具有良好的免疫原性，可以激活動物機體生產(chǎn)保護性抗體，針對多殺性巴氏桿菌脂蛋白B的單克隆抗體或多克隆抗體可以有效地中和病毒粒子從而阻止病毒對靶細胞和易感動物的攻擊。

3.減毒疫苗。減毒疫苗與滅活疫苗及亞單位疫苗相比可以提供更高的交叉保護能力，且活疫苗由于可以在免疫動物體內(nèi)增殖并具有更好的免疫原性，因此產(chǎn)生保護性抗體的所需時間更短，保護率更好。早期研究人員主要是通過分離自然弱毒株或人工培養(yǎng)致弱強毒株進而制備減毒疫苗，但是該方式制備的疫苗具有安全性差，容易毒力返強和會引起個別病例死亡的不足。隨著分子生物學的大力發(fā)展，有更多的研究人員采用構(gòu)建毒力基因敲除的致弱毒株，從而構(gòu)建安全性更高的減毒疫苗。

四、兔出血性敗血癥的防控與治療

1.飼養(yǎng)管理與防控。為了有效地預(yù)防兔出血性敗血癥，除了要對兔群進行定期免疫接種以外，同時也需要加強飼養(yǎng)管理和防控措施。在飼養(yǎng)的過程中，需要注意環(huán)境的衛(wèi)生，加強通風，每日對排出的糞便進行清理，保持圈舍的空氣清潔和溫度恒定，減少病原生物生存的基質(zhì)。合理的調(diào)整兔群的飼養(yǎng)密度，合理搭配飼料，確保適當?shù)木诛暳媳壤?，保證清潔的飲用水，禁止使用發(fā)霉變質(zhì)的飼料和飲水喂養(yǎng)兔群。對圈舍和飼養(yǎng)使用的器械定期消毒，當有兔群發(fā)病時，及時將病兔和健康兔進行隔離，同時對圈舍環(huán)境進行徹底消毒，以防止病原的擴大傳播。

2.藥物治療。一旦發(fā)現(xiàn)兔群感染多殺性巴氏桿菌后，需馬上將健康兔群和患病兔群進行隔離，并對患病兔群有針對性的治療。對鼻炎型或結(jié)膜炎型病兔可以使用鏈霉素滴加至患處進行治療；針對積膿型病兔需先將膿液排出，然后使用消毒液清洗患處并撒布消炎粉；對其他類型患病兔可肌肉注射青霉素、鏈霉素或其混合物進行抗生素治療，同時可以在飼料中添加0.1%的諾氟沙星，從而降低病原感染其他健康兔群的概率。

五、結(jié)語

綜上所述，雖然兔出血性敗血癥在我國仍然呈現(xiàn)地方性流行，但只要養(yǎng)殖場戶合理飼養(yǎng)，對兔群進行科學免疫，保持兔圈環(huán)境衛(wèi)生，對疑似患病兔及時隔離、診斷并治療，就可以有效的控制該疾病的爆發(fā)并減低經(jīng)濟損失。