劉中林 楊鳳蓮 韋玉霞 龐曉霞 廖碧云 陳興鴻 王俊利

【摘要】目的探討桂西地區(qū)壯族不育男性畸形精子癥的特點。

方法收集2019年1月至8月就診的2275例桂西壯族男性不育患者，采用Diff-Quik染色對精子形態(tài)進行研究;使用計算機輔助精液分析（CASA）技術(shù)檢測精子前向運動力、濃度、總活力等;采用固相BAPNA法分析精子頂體酶活性。對比畸形和正常精子患者的精液常規(guī)參數(shù)、頂體酶活性。分析精子正常形態(tài)百分率與精液常規(guī)參數(shù)、精子頂體酶活性的相關(guān)性。

結(jié)果精液形態(tài)檢測發(fā)現(xiàn)畸形精子癥患者占47.47%，在畸形精子癥患者中，中度畸形占49.35%，比重最大;在精子畸形部位中，以頭部畸形為主，占69.83%;在精子頭部畸形類型中，錐形頭比例最高，占48.00%。畸形組患者的精子前向運動力、濃度、總活力、頂體酶活性均低于正常組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P均<0.01）。精子正常形態(tài)百分率與精子前向運動力、濃度、總活力、頂體酶活性呈正相關(guān)（P均<0.01）。

結(jié)論桂西地區(qū)壯族不育男性人群中患畸形精子癥較多，其中中度畸形比例最大，精子畸形部位以頭部異常為主，在頭部異常類型中錐形頭常見。精子正常形態(tài)百分率與精子前向運動力、濃度、總活力、頂體酶活性呈正向關(guān)聯(lián)。

【關(guān)鍵詞】男性不育;精液質(zhì)量;精液參數(shù);桂西;壯族

中圖分類號：R698.2文獻標(biāo)志碼：ADOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2020.04.012

AnalysisofclinicalcharacteristicsofinfertilemenwithteratozoospermiaofZhuangnationalityinwesternregionofGuangxi

LIUZhonglin1，3，YANGFenglian2，WEIYuxia1，PANGXiaoxia3，LIAOBiyun1，CHENXinghong1，WANGJunli1

（1.CenterofReproductiveMedicineofAffiliatedHospital，2.SchoolofPharmacy，3.GraduateSchool，YoujiangMedicalUniversityforNationalities，Baise533000，Guangxi，China）

【Abstract】ObjectiveToinvestigatethecharacteristicsofinfertilemenwithteratozoospermiaofZhuangnationalityinwesternGuangxi.

MethodsFromJanuarytoAugust2019，2275maleinfertilepatientsofZhuangnationalityinwesternGuangxiwerecollected.Diff-Quikstainingwasusedtostudythemorphologyofsperm.Computeraidedsemenanalysis（CASA）technologywasusedtotestforwardmotility，concentrationandtotalmotilityofsperm.AndsolidphaseBAPNAmethodwasusedtoanalyzespermacrosinactivity.Thesemenroutineparametersandacrosinactivityofabnormalandnormalspermatozoawerecompared.Andthecorrelationbetweenthepercentageofnormalspermmorphologyandthenormalsemenparametersandacrosinactivitywasanalyzed.

ResultsSemenmorphologytestshowedthatpatientswithteratozoospermiaaccountedfor47.47%，andamongthem，moderateteratozoospermiaaccountedfor49.35%，whichhadthehighestproportion.Headdeformitywasthemainpartofspermdeformity，accountingfor69.83%，andinthetypeofspermheaddeformity，theproportionofcone-shapedheadwasthehighest，accountingfor48.00%.Thespermforwardmotility，concentration，totalactivityandacrosinactivityintheabnormalspermgroupwerelowerthanthoseinthenormalspermgroup，differencewasstatisticallysignificant（allP<0.01）.Therewasapositivecorrelationbetweenthepercentageofnormalspermmorphologyandspermforwardmotility，concentration，totalactivityandacrosinactivity（allP<0.01）.

ConclusionTherearemanyabnormalspermatozoaintheinfertilemalepopulationofZhuangnationalityinwesternGuangxi，amongwhichtheproportionofmoderatedeformityisthelargest，andtheabnormalpositionofspermatozoaismainlyheadabnormality，andcone-shapedheadiscommoninthetypeofheadabnormality.Thepercentageofnormalspermmorphologyispositivelycorrelatedwithforwardmotility，concentration，totalactivityandacrosinactivity.

【Keywords】maleinfertility;semenquality;semenparameters;westernGuangxi;Zhuangnationality

近年來，多國流行病學(xué)實驗數(shù)據(jù)提示人類的生育力普遍降低，特別是男性生育力下降明顯，單純男方因素導(dǎo)致不育超過1/3[1]。所以精子質(zhì)量與男性不育之間的關(guān)聯(lián)性研究，是臨床領(lǐng)域的重點課題，而精子形態(tài)學(xué)又是其中的重要理論之一。精子形態(tài)正常才能保證精子各項功能都正常，精子形態(tài)出現(xiàn)異常也會導(dǎo)致相應(yīng)的功能受到影響，進而降低精子活力，與受精卵結(jié)合的概率下降，出現(xiàn)不育癥[2]。不同區(qū)域人群，由于民族遺傳性、環(huán)境因素等不同，精液質(zhì)量的情況和特征也不同[3]，而桂西地區(qū)壯族大樣本的報道比較少，本研究旨在觀察桂西地區(qū)壯族不育男性畸形精子癥的特點，以了解目前桂西地區(qū)壯族不育男性精子形態(tài)學(xué)特征。

1對象與方法

1.1研究對象

選取2019年1月至8月在右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院男科就診的2275例壯族不育男性為研究對象，年齡21～55歲，平均（33.58±6.42）歲，所有患者都需進行精液常規(guī)檢查，其中進行精子頂體酶活性檢查的患者有289例。

1.2納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）戶籍為百色、河池，患者常住戶籍地5年及以上，且未離開;（2）身體狀態(tài)良好，無肝、腎、心腦血管等嚴(yán)重疾病;（3）夫妻性生活正常且未采取避孕措施1年以上，而妻子未受孕者;（4）不存在生殖器畸形、睪丸萎縮、隱睪等影響男性不育的疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）精液存在黏稠度超過2cm、不液化或液化程度低等情況;（2）精液不完整。

1.3研究方法

1.3.1精液標(biāo)本采集及處理

在精液采集前患者禁欲2～7天，通過手淫法獲得精液，將其裝入一次性無菌尿杯中，調(diào)整水浴箱溫度到37℃，將裝有精液的尿杯置入其中進行30分鐘液化處理。

1.3.2精液常規(guī)檢查

參考第五版《世界衛(wèi)生組織人類精液檢查與處理實驗室手冊》的方法，對精子活力、精子前向運動力、精子濃度進行檢測。采用西班牙CASA全自動精子質(zhì)量分析系統(tǒng)來分析精液。分正常形態(tài)組（正常精子形態(tài)百分率≥4%，共1195例）和畸形組（正常精子形態(tài)百分率<4%，共1080例），其中畸形組又可分為輕度畸形組（3%≤正常精子形態(tài)百分率<4%，共360例）、中度畸形組（2%≤正常精子形態(tài)百分率<3%，共533例）、重度組（1%≤正常精子形態(tài)百分率<2%，共184例）和極重度畸形組（正常精子形態(tài)百分率<1%，共3例）。

1.3.3精子頂體酶活性檢測

采用固相BAPNA法進行檢測，檢測工具為深圳博銳德生物公司精子頂體酶活性定量測定試劑盒，參與檢測的患者共有289例。根據(jù)精子正常百分率進行分組：正常形態(tài)組（正常精子形態(tài)百分率≥4%，共172例）和畸形組（正常精子形態(tài)百分率<4%，共117例）。

1.3.4精子形態(tài)分析

采用Diff-Quik染色進行分析。按WHO標(biāo)準(zhǔn)，將頭部長寬比>1.8稱為錐形異常，頭部長寬比<1.3稱為圓形異常，長寬分別大于4.7μm和3.2μm為大頭異常，長寬分別小于3.7μm和2.5μm為小頭精子，總共分類100個樣本。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

研究數(shù)據(jù)利用SPSS22.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，對數(shù)據(jù)進行正態(tài)性及方差齊性檢驗，不符合正態(tài)性及方差齊性的數(shù)據(jù)，采用非參數(shù)秩和檢驗，相關(guān)分析采取Spearman秩相關(guān)檢驗，用r表示相關(guān)系數(shù)，檢驗水準(zhǔn)：α=0.05，雙側(cè)檢驗。

2結(jié)果

2.1精子形態(tài)學(xué)構(gòu)成分析

精子形態(tài)學(xué)檢測發(fā)現(xiàn)畸形精子癥患者1080例，占47.47%。在畸形精子癥患者中，中度畸形533例，占比最高，為49.35%;在精子畸形部位中，頭部畸形最多，為418135個，占69.83%;100例頭部畸形精子癥患者，以頭部錐形異常為主，占48.00%。見表1～表3。

2.2畸形和正常精子的精液常規(guī)參數(shù)、頂體酶活性比較

畸形組患者的精子前向運動力、濃度、總活力、頂體酶活性均低于正常組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。見表4、表5。

2.3精子正常形態(tài)百分率與精液常規(guī)參數(shù)、精子頂體酶活性的相關(guān)性

精子正常形態(tài)百分率與精子前向運動力、濃度、總活力、頂體酶活性呈正相關(guān)（P均<0.01）。見表6。

3討論

本研究通過Diff-Quik染色展開精子形態(tài)分析，發(fā)現(xiàn)52.53%的精子形態(tài)正常，而畸形精子癥占47.47%，與其他地區(qū)相比，桂西地區(qū)壯族不育男性患者中畸形精子癥的發(fā)生率較高[4～6]。而劉蘭民[7]認為，少數(shù)民族精液質(zhì)量低于漢族可能由于民族遺傳性、環(huán)境因素、宗教信仰、生活方式等因素造成，例如回族由于宗教信仰在餐飲場所中工作較多，長期處于廚房高溫環(huán)境下，陰囊溫度相對較高，嚴(yán)重干擾生精細胞的功能，造成生精障礙，影響精子質(zhì)量，這可能是少數(shù)民族男性精子畸形率高于漢族的重要原因。桂西地區(qū)壯族不育男性畸形精子癥發(fā)病率較高可能還有一個重要原因，即桂西地區(qū)地域遼闊，多山地，山路崎嶇，與廣東、江蘇等發(fā)達地區(qū)相比，就醫(yī)不便，生殖健康知識普及不廣，一些疾病如精索靜脈曲張、隱睪等得不到及時診治，同時衛(wèi)生條件較差，增加了生殖道感染的可能，而且壯族男性多數(shù)喜歡飲酒和食用腌制類食品，這些因素都可能導(dǎo)致精子畸形率升高。

男子的生育能力與精子形態(tài)直接相關(guān)，精子形態(tài)在精液參數(shù)中占據(jù)重要地位，對精子形態(tài)的分析有助于不育癥的診斷。AMBE等[8]發(fā)現(xiàn)，精子頭部出現(xiàn)畸形的概率較大，不僅IVF受精能處于較低水平，而且更容易出現(xiàn)流產(chǎn)，由此可知精子形態(tài)直接決定了最終的受精結(jié)局。國內(nèi)外諸多的文獻報道小頭精子、錐形精子、圓頭精子對自然受孕和輔助生殖技術(shù)存在明顯影響[9～13]。結(jié)合本文報告可知，精子頭部是出現(xiàn)異常的主要部位，在精子頭部各結(jié)構(gòu)畸形中，除了小頭精子以外，最容易產(chǎn)生畸形的精子還包括錐形精子。而本研究發(fā)現(xiàn)桂西地區(qū)壯族不育男性畸形精子癥的各種類型比例，與其他區(qū)域群體研究結(jié)果相符[14]。

本研究還發(fā)現(xiàn)，除了精子前向運動和密度以外，精子形態(tài)學(xué)還和活動率之間存在緊密關(guān)聯(lián)。精子形態(tài)不僅會影響精子運動曲線性，還直接波及精子前向運動速度，在降低精子總活力的同時，還將削弱前向運動力[15]。當(dāng)正常形態(tài)精子滿足既定比例時，方能將活力維系在正常標(biāo)準(zhǔn)。由于畸形精子運動能力下降，難以在女性生殖道內(nèi)有效運動，最終降低精子受精能力，無法生育。部分學(xué)者指出，精子畸形直接影響了精子頂體酶活性，一旦精子頂體酶出現(xiàn)異常勢必導(dǎo)致畸形精子缺少頂體或是頂體較薄[16]，如小頭精子，頂體區(qū)幾乎沒有。因此，隨著精子正常形態(tài)百分率下降，精子頂體酶活性也同步降低。

本研究初步明確了桂西地區(qū)壯族不育男性畸形精子癥發(fā)病較其他區(qū)域群體偏高;畸形特點特征與其他少數(shù)民族地區(qū)相似;且精子頂體酶、前向運動力、密度及總活力與畸形精子比例相關(guān)，有助于畸形精子特征更好地用于臨床實驗診斷。下一步，將進一步研究壯族男性不育群體中遺傳環(huán)境因素對男性畸形精子癥的影響。

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（收稿日期：2019-10-15修回日期：2020-03-04）

（編輯：梁明佩）

基金項目：廣西自然科學(xué)基金（2018GXNSFAA050034，2019GXNSFBA245034）;廣西教育廳高校中青年教師基礎(chǔ)能力提升項目（2018KY0437）

作者簡介：劉中林，男，檢驗技師，醫(yī)學(xué)學(xué)士，研究方向：不孕不育的分子遺傳學(xué)研究。E-mail：437579736@qq.com

通信作者：王俊利。E-mail：13907768146@163.com

[本文引用格式]劉中林，楊鳳蓮，韋玉霞，等.桂西地區(qū)壯族男性不育畸形精子癥的臨床特征分析[J].右江醫(yī)學(xué)，2020，48（4）：296-299.