王亞欣，張 君，邱深本，劉思伽，戴志亮

（廣東科貿(mào)職業(yè)學(xué)院，廣東廣州 510430）

黃曲霉毒素是由曲霉菌類真菌產(chǎn)生的，經(jīng)常出現(xiàn)在飼料或食品中。黃曲霉毒素B1的毒性最大，可直接抑制動物生長和健康，誘發(fā)動物肝臟疾病和代謝紊亂，導(dǎo)致動物組織和產(chǎn)品中存在有毒殘留物（左甜甜等，2019）。此外，被黃曲霉毒素B1污染的食品對人類有很強的致癌作用。從食品安全角度來看，開發(fā)更有效的方法來抵消黃曲霉毒素B1的毒性已成為最近動物營養(yǎng)的焦點。水合鋁硅酸鈣鈉等粘土吸附劑在飼料工業(yè)中被廣泛應(yīng)用。但這些吸附劑容易對環(huán)境造成二次污染，隨著對黃曲霉毒素B1的深入了解，微生物技術(shù)有望將這些有毒基團降解為零毒或低毒物質(zhì)。因乳酸菌具有發(fā)酵食物和改善腸道菌群等功能被廣泛應(yīng)用。王曉偉等（2015）研究表明，乳酸菌可以作為天然生物拮抗劑來對抗霉菌及其高毒性代謝物。但在農(nóng)場動物中，乳酸菌對黃曲霉毒素B1的脫毒作用研究非常有限，特別是與傳統(tǒng)的硅土類產(chǎn)品相比。因此，本研究旨在探討乳酸菌和水合鈉鈣鋁硅酸鹽對肉雞日糧黃曲霉污染的解毒作用，同時評估其對肉雞生長性能、養(yǎng)分消化率、免疫功能及黃曲霉毒素B1殘留的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計 試驗選擇1日齡雌性肉雞960只，根據(jù)體重一致性原則隨機分為4組，每組8個重復(fù)，每個重復(fù)30只，分別飼喂陽性對照日糧（沒有黃曲霉毒素B1污染，表1）、陰性對照日糧（陽性對照組日糧+45 μg/kg黃曲霉毒素B1）、乳酸菌日糧（陰性對照日糧+2.0×1010CFU/kg乳酸菌）和水合硅鋁酸鈣鈉日糧（陰性對照日糧+3.5 g/kg水合硅鋁酸鈣鈉），試驗共開展21 d。試驗雞只按照常規(guī)飼養(yǎng)方法和免疫程序進(jìn)行管理。

表1 陽性對照組配方組成及營養(yǎng)成分

1.2 生長性能和樣品收集 每周稱量肉雞和飼料用量，并根據(jù)死亡率調(diào)整飼料用量。在試驗結(jié)束前3 d，每個重復(fù)隨機選擇體重接近的6只雞，收集并混合糞便，其中10%的樣品冷凍干燥后測定養(yǎng)分消化率和黃曲霉毒素B1含量。試驗第21天每個重復(fù)隨機選擇8只雞翅下靜脈采血后分離血清（-20℃保存），之后將雞只屠宰，收集肝臟、腎臟、脾臟、法氏囊和胸腺，稱重后-20℃保存。

1.3 樣品分析 血清免疫球蛋白、樣品黃曲霉毒素B1含量的測定采用ELISA試劑盒進(jìn)行，淋巴細(xì)胞數(shù)量參考Liu等（2008）的研究方法。

1.4 數(shù)據(jù)分析 試驗數(shù)據(jù)采用SAS軟件單因素方差分析，采用Tukey’s honest進(jìn)行顯著性差異檢驗，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長性能和消化率 試驗期間各處理肉雞死亡率均正常（在5%以內(nèi)），差異無統(tǒng)計學(xué)意義（數(shù)據(jù)未列出）。由表2可知，陰性處理組平均日增重和飼料報酬顯著降低（P＜0.05），而與陰性對照組相比，乳酸菌、水合硅鋁酸鈣鈉組和陽性對照組平均日增重顯著提高8.92%、5.95%和6.69%（P＜0.05），飼料報酬分別顯著提高7.94%、6.35%和6.35%（P＜0.05）。各處理組對肉雞平均日采食量的影響無顯著差異（P＞0.05）。與陽性對照組相比，陰性對照組干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、消化能的消化率顯著降低，分別降低8.50%、10.63%、4.84% 和 3.85%（P ＜ 0.05），而乳酸菌組和水合硅鋁酸鈣鈉組上述指標(biāo)提高4.28%～15.3%（P＜0.05）。此外，乳酸菌組消化能的消化率較水合硅鋁酸鈣鈉組顯著提高1.56%（P＜0.05），而陽性對照組和乳酸菌組之間無顯著差異（P＞0.05）。乳酸菌組鈣和磷的消化率也顯著高于其他各組（P＜0.05），其他組之間無顯著差異（P＞0.05）。

表2 乳酸菌和水合硅鋁酸鈣鈉對肉雞生長性能和養(yǎng)分消化的影響

2.2 免疫器官相對重量及免疫指標(biāo) 由表3可知，與陽性對照組相比，陰性對照組脾臟和肝臟相對重量顯著提高（P＜0.05），法氏囊和胸腺相對重量顯著降低（P＜0.05）。與陰性對照組相比，乳酸菌組脾臟和肝臟重量顯著降低14.63%和6.38%（P＜0.05），而法氏囊和胸腺相對重量顯著提高10.42%和5.23%（P＜0.05）。除胸腺相對重量外，乳酸菌組與水合硅鋁酸鈣鈉組對其他免疫器官相對重量無顯著影響（P＞0.05）。陽性對照組組、乳酸菌組和水合硅鋁酸鈣鈉組較陰性對照組顯著提高了T和B淋巴細(xì)胞數(shù)量（P＜0.05），但陽性對照組與乳酸菌組無顯著差異（P＞0.05），但水合硅鋁酸鈣鈉組較陽性對照組和乳酸菌組顯著提高了這兩個指標(biāo)（P＜0.05）。與陰性對照組相比，乳酸菌組肉雞血清IgA、IgM和IgG濃度顯著提高214.84%、273.12%和95.33%（P＜0.05）。同時，水合硅鋁酸鈣鈉組IgA和IgM濃度也較陰性對照組顯著提高65.83%和50.34%（P＜0.05）。

表3 乳酸菌和水合硅鋁酸鈣鈉對肉雞免疫性能的影響

2.3 黃曲霉B1毒素殘留 由表4可知，與陰性對照組相比，陽性對照組、乳酸菌組血清、肝臟、脾臟、腎臟、法氏囊和胸腺中黃曲霉毒素B1殘留量顯著降低49.93%～80.82%（P＜0.05），而水合硅鋁酸鈣鈉組黃曲霉毒素B1殘留量降低44.38%～66.12%（P＜0.05）。與陰性對照組相比，乳酸菌組糞中黃曲霉毒素B1殘留量降低48.51%（P＜0.05），而水合硅鋁酸鈣鈉組顯著提高37.37%（P＜0.05）。

表4 乳酸菌和水合硅鋁酸鈣鈉對肉雞血清、器官和糞中黃曲霉B1毒素殘留量的影響

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn)，黃曲霉毒素B1污染飼料會降低肉雞平均日增重和飼料報酬，但不影響平均采日食量，水合硅鋁酸鈣鈉提高了平均日采食量、飼料報酬和日增重。作為益生菌的乳酸菌被廣泛用于改善肉雞生長。Zuo等（2013）研究發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加干酪乳桿菌、枯草桿菌、畢赤酵母和黃曲霉毒素B1降解酶組合后提高了43～73 d AA肉雞的生長性能。在本研究中，乳酸菌可緩解黃曲霉毒素B1對肉雞生長性能的毒副作用，其效果超過水合硅鋁酸鈣鈉，達(dá)到與正常日糧相似的水平。在本研究中，日糧添加乳酸菌和水合硅鋁酸鈣鈉可提高肉雞干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)和粗脂肪的消化率，這與Gutierrez-Fuentes等（2013）的研究結(jié)果一致。乳酸菌對營養(yǎng)物質(zhì)消化率的作用主要取決于所選菌株的特性，包括腸道繁殖能力、活性物質(zhì)的產(chǎn)生、有機酸的產(chǎn)生、有益菌優(yōu)化和腸道形態(tài)（Ahlberg等，2015）。由乳酸菌會降低腸道pH，有助于溶解和隨后礦物質(zhì)的吸收，而水合硅鋁酸鈣鈉無這方面的作用。

在本研究中，黃曲霉毒素B1導(dǎo)致肝臟和脾臟腫大，但降低了法氏囊和胸腺的相對重量。Mavarez等（2005）報道，肉仔雞暴露于70 μg/kg黃曲霉毒素B1下，肝臟和法氏囊損傷。此外，本研究中淋巴器官的組織病理學(xué)損傷導(dǎo)致黃曲霉毒素B1日糧中T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞比例降低。作者推測，黃曲霉毒素B1對雞B、T淋巴細(xì)胞有免疫抑制作用。日糧添加乳酸菌和水合硅鋁酸鈣鈉后減輕了黃曲霉毒素B1對器官和淋巴細(xì)胞的損傷，乳酸菌的保護作用比水合硅鋁酸鈣鈉更明顯，這與Hathout等（2011）的研究結(jié)果一致。

與陰性對照日糧組相比，水合硅鋁酸鈣鈉組和乳酸菌組雞血清中IgA、IgG、IgM濃度升高進(jìn)一步證實了乳酸菌和水合硅鋁酸鈣鈉對肉雞免疫的有益作用。乳酸菌組和水合硅鋁酸鈣鈉組分別使血清、肝臟、腎臟、脾臟、法氏囊和胸腺中黃曲霉毒素B1殘留量降低了49.93%～80.82%和44.38%～66.12%，提示乳酸菌阻斷了更多的黃曲霉毒素B1進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)，這與Attia等（2013）的研究結(jié)果一致，其發(fā)現(xiàn)在減輕黃曲霉毒素B1對肝臟病變影響方面，嗜酸乳桿菌比水合硅鋁酸鈣鈉和寡糖效果好。

4 結(jié)論

日糧中添加乳酸菌或水合硅鋁酸鈣鈉可以改善肉雞生長性能、養(yǎng)分消化率和免疫功能，降低黃曲霉毒素B1的毒副作用和組織殘留量。但乳酸菌的改善效果比水合硅鋁酸鈣鈉更明顯。乳酸菌日糧中組織和糞中黃曲霉毒素B1殘留的降低表明益生菌對毒素有生物降解作用。