鄒力 嚴(yán)燁 范芳芳 吳坤

摘 要：建立了外標(biāo)法測(cè)定蜂王漿中10-羥基-2-癸烯酸的高效液相色譜檢測(cè)方法。10-羥基-2-癸烯酸經(jīng)乙醇超聲提取后，以甲醇∶甲酸（0.1%）=55∶45為流動(dòng)相，經(jīng)C18色譜柱分離，紫外檢測(cè)器檢測(cè)。結(jié)果顯示，在50～500 μg/mL濃度范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，r=0.999 9，RSD<3%，加標(biāo)回收率97%～105%。

關(guān)鍵詞：蜂王漿；10-羥基-2-癸烯酸；高效液相色譜法

10-羥基-2-癸烯酸是蜂王漿及蜂王漿凍干粉的重要檢測(cè)指標(biāo)，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[1-2]要求蜂王漿優(yōu)等品的10-羥基-2-癸烯酸含量≥1.8%，合格品≥1.4%，蜂王凍干粉優(yōu)等品的10-羥基-2-癸烯酸含量≥1.8%，合格品≥1.4%，但國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法為內(nèi)標(biāo)法，極其繁瑣，且內(nèi)標(biāo)檢測(cè)成本昂貴，因此研究快速準(zhǔn)確檢測(cè)蜂王漿及蜂王漿凍干粉中10-羥基-2-癸烯酸的外標(biāo)法具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 儀器

安捷倫1260型高效液相色譜儀帶紫外檢測(cè)器，超聲波清洗儀。

1.2 試劑

10-羥基-2-癸烯酸標(biāo)準(zhǔn)品（廠家：alfresa，純度：100%），甲醇（色譜純），無(wú)水乙醇（色譜純），甲酸（分析純）。

1.3 色譜條件

色譜柱：Agilent ZORBAX SB-C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相為甲醇∶甲酸（0.1%）=55∶45；流速為1.0 mL/min；柱溫為35 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm；進(jìn)樣量20 μL。

1.4 樣品前處理

稱量0.5 g樣品，加入無(wú)水乙醇定容至50 mL，超聲15 min混勻，經(jīng)孔徑為0.45μm的有機(jī)濾膜過(guò)濾后上機(jī)檢測(cè)。

2 結(jié)果與討論

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

分別取1 mg/mL的10-羥基-2-癸烯酸儲(chǔ)備液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 mL與5.0 mL于10 mL容量瓶中，用無(wú)水乙醇定容至10 mL，隨后按照1.3條件上機(jī)檢測(cè)，得到圖1所示的結(jié)果，根據(jù)結(jié)果繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，濃度范圍在50～500 μg/mL時(shí)，線性良好，r=0.999 9。

2.2 實(shí)際樣品分析

采用本方法對(duì)蜂王漿進(jìn)行10-羥基-2-癸烯酸含量檢測(cè)（圖2）、加標(biāo)回收試驗(yàn)及重復(fù)性試驗(yàn)，結(jié)果表明回收率可達(dá)97%～105%，樣品重復(fù)測(cè)定6次，RSD<3%。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)建立了測(cè)定蜂王漿中10-羥基-2-癸烯酸含量的方法，該方法使用高效液相色譜法外標(biāo)法定量，操作便捷、前處理簡(jiǎn)單、成本低、結(jié)果穩(wěn)定，適用于蜂王漿中10-羥基-2-癸烯酸的測(cè)定。

參考文獻(xiàn)

[1]中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.GB 9697-2008 蜂王漿[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2012.

[2]中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.GB/T 21532-2008 蜂王漿凍干粉[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2008.