王珊珊，張愛香,劉會清，袁進成,李長青

(1.河北北方學(xué)院 研究生學(xué)院,河北 張家口 075000；2.河北北方學(xué)院 農(nóng)林科技學(xué)院，河北 張家口 075000)

中國是馬鈴薯生產(chǎn)大國，全國馬鈴薯種植面積在2016年已經(jīng)超出6.67×106hm2，居世界領(lǐng)先地位。張家口市的自然環(huán)境和地理條件具備馬鈴薯生產(chǎn)得天獨厚的自然條件。近幾年馬鈴薯播種面積逐年增加，已經(jīng)逐步成為張家口市農(nóng)業(yè)的重要支柱產(chǎn)業(yè)。作為塊莖類作物，土傳病害不僅影響馬鈴薯的產(chǎn)量，還直接影響塊莖的品質(zhì)和商品性[1-2]。馬鈴薯粉痂病是一種典型的土傳病害，主要危害塊莖和根部。雖然不影響食用，但薯塊外觀變劣，嚴(yán)重影響其經(jīng)濟價值[3]。該病目前還缺乏安全有效的防治方法，采用化學(xué)藥劑防治效果不太理想，同時造成了環(huán)境的污染和生態(tài)系統(tǒng)的破壞[4]。因此，本文探討利用拮抗微生物來防治馬鈴薯土傳病害，對防治馬鈴薯土傳病害具有廣泛的應(yīng)用前景[5]。

枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)是一類好氧內(nèi)生芽孢的革蘭氏陽性桿菌，在土壤和植物的表面普遍存在，對人畜無毒無害，不污染環(huán)境，對植物病原真菌有一定的抑制作用。其抑制病原菌的范圍很廣，包括根部病害、枝干病害、葉片、花部病害和收獲后果品病害[6]。粉紅粘帚霉屬(Gliodadium)是一類廣泛存在于土壤中的植物病原真菌的重寄生菌，對植物病原真菌具有抗菌、溶解、競爭和寄生作用,對馬鈴薯土傳病害的發(fā)生具有抑制作用[7]，是一類重要的自然資源，其在植物病害生物防治上的應(yīng)用已引起人們的重視[8]。

本研究通過將枯草芽孢桿菌和粉紅粘帚霉復(fù)配與麥麩混合后，給供試馬鈴薯種薯薯塊兒包衣，收獲后測產(chǎn)并調(diào)查大、小薯個數(shù)比例及粉痂病的病情指數(shù)，來確定該復(fù)配制劑對馬鈴薯生長的影響及對馬鈴薯粉痂病的防治效果。目的是尋找切實可行的馬鈴薯粉痂病的生物防治措施，為馬鈴薯的良好生長發(fā)育提供技術(shù)支持。對于防治馬鈴薯粉痂病、提高馬鈴薯產(chǎn)量和品質(zhì)具有一定的實際意義。

1 材料和方法

1.1 供試材料

馬鈴薯種薯：來源于沽源縣2018年發(fā)生粉痂病的馬鈴薯薯塊兒，品種為“夏波蒂”脫毒一代薯；

枯草芽孢桿菌(菌1010cfu/g)：由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護所生物防治重點實驗室提供；

粉紅粘帚霉(菌108cfu/g)：由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護所生物防治重點實驗室提供。

1.2 試驗時間和地點

試驗時間：2019年4月-2019年10月

試驗地點：河北北方學(xué)院南校區(qū)教學(xué)農(nóng)場

1.3 試驗方法

1.3.1 種薯處理、拌菌播種

2019年5月1日將馬鈴薯種薯切塊，保證每塊攜帶1～2個種芽；分別按濃度為104、105、106cfu/g稱取粉紅粘帚霉菌劑，枯草芽孢桿菌107cfu/g，并將枯草芽孢桿菌和粉紅粘帚霉菌種復(fù)配，每g菌種加入到100 g麥麩中混勻,加水達到飽和(手握滴水不流水),25 ℃發(fā)酵24 h。

以不添加生防菌為對照(CK),以枯草芽孢桿菌107cfu/g基質(zhì)+粉紅粘帚霉104cfu/g基質(zhì)、枯草芽孢桿菌107cfu/g基質(zhì)+粉紅粘帚霉105cfu/g基質(zhì)、枯草芽孢桿菌107cfu/g基質(zhì)+粉紅粘帚霉106cfu/g基質(zhì)為藥劑處理。

2019年5月2日將馬鈴薯塊莖與生防菌混合,讓所有帶菌麥麩沾到馬鈴薯塊莖上，進行播種，共4個處理，3次重復(fù)，小區(qū)面積為10 m2。

1.3.2 田間管理

2019年5月中旬調(diào)查出苗情況，計算出苗率并進行培土，同時除草、澆水。2019年6月中旬開花期再進行1次培土并除草、澆水。

1.3.3 收獲調(diào)查

2019年9月進行馬鈴薯收獲，每5人一組分別負(fù)責(zé)收獲、計數(shù)及記錄數(shù)據(jù)等。對馬鈴薯大(150 g以上)、小薯(150 g以下)的個數(shù)，馬鈴薯大、小薯的產(chǎn)量以及馬鈴薯粉痂病病薯分級(0級，無病斑；1級，病斑面積占整個薯塊的5%及以下；2級，病斑面積占整個薯塊的6%～10%；3級，病斑面積占整個薯塊的11%～25%；4級，病斑面積占整個薯塊的26%～50%；5級，病斑面積占整個薯塊的51%～75%；6級，病斑面積占整個薯塊的76%～100%)，進行計數(shù)、調(diào)查、記錄。

1.4 試驗測定項目

(1)出苗期觀測：出苗率；

(2)收獲期觀測：塊莖數(shù)；大、小薯數(shù)；大、小薯產(chǎn)量；馬鈴薯瘡痂病病情指數(shù)。

病情指數(shù)=∑(各級塊莖數(shù)×該病級代表值)/(調(diào)查總塊莖數(shù)×最高級代表值)×100

2 結(jié)果與分析

2.1 枯草芽孢桿菌與粉紅粘帚霉復(fù)配菌劑對馬鈴薯出苗率的影響(表1)

根據(jù)各處理對馬鈴薯出苗株數(shù)的影響進行方差分析，得F=3.3850.05，各處理間不存在顯著性差異，說明枯草芽孢桿菌與粉紅粘帚霉復(fù)配菌劑不會降低馬鈴薯出苗率。

2.2 枯草芽孢桿菌和粉紅粘帚霉復(fù)配對馬鈴薯大薯個數(shù)的影響(表2)

表2 枯草芽孢桿菌與粉紅粘帚霉復(fù)配對馬鈴薯大薯個數(shù)的影響(方差分析)

根據(jù)各處理對馬鈴薯大薯個數(shù)的影響進行方差分析，得F=.1630.05，各處理間不存在顯著性差異，說明枯草芽孢桿菌和粉紅粘帚霉復(fù)配對馬鈴薯大薯個數(shù)沒有影響。

2.3 枯草芽孢桿菌和粉紅粘帚霉復(fù)配對馬鈴薯小薯個數(shù)的影響(表3)

表3 枯草芽孢桿菌與粉紅粘帚霉復(fù)配對馬鈴薯小薯個數(shù)的影響(方差分析)

根據(jù)各處理對馬鈴薯小薯的影響進行方差分析，得F=2.3790.05，各處理間不存在顯著性差異，說明枯草芽孢桿菌和粉紅粘帚霉復(fù)配對馬鈴薯小薯個數(shù)沒有影響。

2.4 枯草芽孢桿菌和粉紅粘帚霉復(fù)配對馬鈴薯大薯產(chǎn)量的影響(表4)

表4 枯草芽孢桿菌與粉紅粘帚霉復(fù)配對馬鈴薯大薯產(chǎn)量的影響(方差分析)

根據(jù)各處理對馬鈴薯大薯的影響進行方差分析，得F=.4930.05，各處理間不存在顯著性差異，說明枯草芽孢桿菌和粉紅粘帚霉復(fù)配對馬鈴薯大薯產(chǎn)量沒有影響。

2.5 枯草芽孢桿菌和粉紅粘帚霉復(fù)配對馬鈴薯小薯產(chǎn)量的影響(表5)

表5 枯草芽孢桿菌與粉紅粘帚霉復(fù)配對馬鈴薯小薯產(chǎn)量的影響(方差分析)

根據(jù)各處理對馬鈴薯小薯產(chǎn)量的影響進行方差分析，得F=.5980.05，各處理間不存在顯著性差異，說明枯草芽孢桿菌和粉紅粘帚霉復(fù)配對馬鈴薯小薯產(chǎn)量沒有影響。

2.6 枯草芽孢桿菌和粉紅粘帚霉復(fù)配對馬鈴薯粉痂病病情指數(shù)的影響(表6)

表6 馬鈴薯粉痂病的病情指數(shù)(方差分析)

根據(jù)不同濃度的枯草芽孢桿菌與粉紅粘帚霉復(fù)配對馬鈴薯粉痂病病情指數(shù)的影響進行方差分析，得F=28.637>F0.05(3,8)=4.07，故P<0.05，則各處理間存在顯著性差異，說明枯草芽孢桿菌和粉紅粘帚霉復(fù)配對馬鈴薯粉痂病的病情指數(shù)有防治效果。

2.7 枯草芽孢桿菌和粉紅粘帚霉復(fù)配對馬鈴薯粉痂病各處理之間病情指數(shù)的影響(表7)

表7 馬鈴薯粉痂病各處理之間的病情指數(shù)(方差分析)

根據(jù)不同濃度的枯草芽孢桿菌與粉紅粘帚霉復(fù)配對馬鈴薯粉痂病病情指數(shù)的影響進行兩兩處理之間的分析，濃度107+104、濃度107+106、濃度107+105與對照之間存在顯著性差異，而濃度107+104、濃度107+106與濃度107+105之間不存在顯著性差異，說明枯草芽孢桿菌與粉紅粘帚霉復(fù)配對馬鈴薯粉痂病具有良好的防效，以低濃度107+104為宜。

3 結(jié)論與討論

3.1 結(jié)論

以枯草芽孢桿菌和粉紅粘帚霉復(fù)配菌劑的不同濃度為試驗處理，通過與不添加任何生防菌的種薯進行對照。結(jié)果表明：

枯草芽孢桿菌和粉紅粘帚霉復(fù)配菌劑不影響馬鈴薯的出苗率，對馬鈴薯的大薯、小薯產(chǎn)量及個數(shù)不存在顯著性差異，沒有負(fù)面影響。對馬鈴薯粉痂病病情指數(shù)存在顯著性差異，有良好的防治作用。

因此馬鈴薯種薯中加入枯草芽孢桿菌和粉紅粘帚霉對馬鈴薯粉痂病有明顯的防治作用，以枯草芽孢桿菌107與粉紅粘帚霉104復(fù)配為宜，推薦在生產(chǎn)中應(yīng)用。

3.2 討論

目前生產(chǎn)上應(yīng)用枯草芽孢桿菌也用于防治黃瓜枯萎病，并且具有明顯防治效果，對黃瓜生長無不良影響，可以用于黃瓜枯萎病的防治。其中高濃度枯草芽孢桿菌的防治效果和增產(chǎn)作用均表現(xiàn)最好且穩(wěn)定，并且高濃度枯草芽孢桿菌對枯萎病的防治效果明顯高于低濃度枯草芽孢桿菌的處理。該菌在黃瓜、辣椒、水稻、小麥、玉米等農(nóng)作物上顯出很好的病害防治效果[9]。在本次試驗中用到的高濃度枯草芽孢桿菌+粉紅粘帚霉，其防治效果和增產(chǎn)率均高于低濃度，這種情況的出現(xiàn)是否與種植過程中菌劑用量過多有關(guān)還有待進一步的研究。

在本次試驗中，以枯草芽孢桿菌和粉紅粘帚霉復(fù)配菌劑的不同濃度為試驗處理，通過與不添加任何生防菌的種薯進行對照，低濃度和中濃度處理的出苗情況比較理想，與對照的出苗率大于90%，而高濃度的出苗率沒有對照的高，這種情況的出現(xiàn)是否是因為在混合生防菌過程中影響到馬鈴薯側(cè)芽的正常生長而導(dǎo)致的，將有待進一步研究。