周學(xué)東 陳艷 林瑞

摘要 目的：研究蒲公英炮制中總黃酮含量變化及對胃炎治療的理論。方法：選取2016年4月1日至2018年4月1日成都市公共衛(wèi)生臨床醫(yī)療中心收治的胃炎患者30例作為研究對象，隨機(jī)分為胃炎對照組、蒲公英原藥組和蒲公英炭組，每組10例，另選10例健康體檢者為健康對照組（n=10）。使用乙醇對蒲公英原藥材以及炮制后的蒲公英炭進(jìn)行總黃酮提取，紫外分光光度計測量炮制前后總黃酮的提取率及含量變化。模型建立成功后觀察組蒲公英原藥組每天服用蒲公英原藥材藥液，觀察組蒲公英炭藥則每天服用炮制后的蒲公英炭藥液，健康對照組及胃炎對照組每天服用去離子水，8周后檢測相關(guān)指標(biāo)。結(jié)果：炮制后的蒲公英中總黃酮含量比炮制前降低了38%，炮制中總黃酮有所損失;患者的胃蛋白酶活性降低，蒲公英原藥組的效果比蒲公英炭組好，蒲公英原藥組和蒲公英炭組的患者血清GAS升高，IL-1β和IL-6在胃炎對照組中含量升高。與健康對照組比較，其中對于IL-1β而言，2個觀察組與胃炎對照組比較都有所下降。對于IL-6而言有相同的趨勢。而且蒲公英原藥組比蒲公英炭組效果更好。結(jié)論：蒲公英在炮制過程中總黃酮會有損失，其含量的變化影響著對胃炎的改善效果，試驗表明蒲公英炮制前的原藥對胃炎改善效果更好，并且這種效果可能是通過調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)因子IL-1β和IL-6來實現(xiàn)。

關(guān)鍵詞 蒲公英;炮制;總黃酮含量;胃炎治療;胃黏膜營養(yǎng)因子;白細(xì)胞介素-1β;白細(xì)胞介素-6;炎性反應(yīng)因子

Changes of Flavonoid Content in Herba Taraxaci and the Analysis of It on the Treatment of Gastritis

ZHOU Xuedong，CHEN Yan，LIN Rui

（Public Health Clinical Center of Chengdu，Chengdu 610000，China）

Abstract Objective：To study the changes of total flavonoids in the processing of Herba Taraxaci and the theory of treatment for gastritis.Methods：A total of 30 patients with gastritis admitted to Public Health Clinical Center of Chengdu were selected as the research objects and were divided into a gastritis control group（n=10），a Herba Taraxaci active drug group（n=10）and a Herba Taraxaci charcoal group（n=10）.In addition，10 healthy subjects were selected as the healthy control group（n=10）.Ethanol was used to extract the total flavonoids from the original dandelion medicinal material and the processed dandelion charcoal，and the extraction rate and content change of the total flavonoids before and after the processing were measured by an ultraviolet spectrophotometer.After the model was successfully established，the observation group dandelion original medicine group took dandelion original medicinal liquid，the observation group dandelion charcoal medicine took the processed dandelion charcoal liquid every day，the healthy control group and the gastritis control group took deionized water every day.8 weeks later relevant indicators were detected.Results：The content of total flavonoids in Herba Taraxaci after processing was 38% lower than that before processing.The total flavonoids were lost during processing; the pepsin activity of the patients was reduced，and the effect of the dandelion original drug group was better than that of the Herba Taraxaci charcoal group.The serum GAS of the Herba Taraxaci original drug group and the Herba Taraxaci charcoal group increased，and IL-1β and IL-6 were in the content in the gastritis control group increased.Compared with the healthy control group，for IL-1β，the 2 observation groups had a decrease compared with the gastritis control group.For IL-6 there is the same trend.The Herba Taraxaci herb group was better than the Herba Taraxaci charcoal group.Conclusion：The total flavonoids of Herba Taraxaci will be lost in the process of processing，and the change of its content will affect the improvement effect on gastritis.Experiments show that the original drug of Herba Taraxaci before processing has better improvement effect on gastritis，and this effect may be achieved by regulating the inflammatory factors il-1 and il-6.

Keywords Herba Taraxaci; Processing; Total flavonoids content; Gastritis treatment; Gastric mucosal nutrition factor; Interleukin-1β; Interleukin-6; Inflammatory factor

中圖分類號：R283.1;R256.39;R573.3;R94文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2020.23.013

慢性胃炎是胃黏膜的慢性炎性反應(yīng)性疾病，被認(rèn)為是東方國家普通人群內(nèi)鏡檢查中最常見的[1]。我國慢性胃炎的診斷和治療現(xiàn)狀在全國專家共識公布后尚不明確，如對某些內(nèi)鏡醫(yī)師而言，僅憑黏膜表現(xiàn)而無活檢和病理學(xué)證據(jù)診斷慢性萎縮性胃炎仍是一種常見的做法[2-4]。另一方面，慢性胃炎的治療在臨床醫(yī)師中差異很大，一些臨床醫(yī)師根據(jù)經(jīng)驗處方質(zhì)子泵抑制劑（Proton Pump Inhibitor，PPI），而另一些臨床醫(yī)師使用黏膜保護(hù)劑，偶爾提供天然補(bǔ)充劑或草藥[5-6]。黃酮類化合物具有很強(qiáng)的抗氧化和自由基清除作用，具有抗炎、抗過敏、抑制細(xì)菌等作用，最近有文獻(xiàn)表明其具有改善胃炎的作用，天然來源的小分子量的生物黃酮類化合物，能迅速被人體吸收，同時能通過血腦屏障進(jìn)入脂肪組織[7-9]。蒲公英為多年生草本植物，全株含有白色乳汁，葉叢生，匙形或狹長倒卵形，邊緣羽狀淺裂或齒裂[10]，冬末春初抽花莖，頂端生一頭狀花序，開黃色舌狀花，果實成熟時形似一白色絨球，可隨風(fēng)飛散[11]，其嫩株可供食用和作豬飼料，根莖可以入藥，有解毒清熱的作用，又是健胃劑[12]，也指這種植物的花。蒲公英含有大量的總黃酮的天然來源物，但在蒲公英炮制過程中，其含有的總黃酮量會有發(fā)生很大變化，也對胃炎的改善有一定的影響，因此，本研究主要研究蒲公英炮制過程中總黃酮含量的變化及對胃炎療效的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年4月1日至2018年4月1日成都市公共衛(wèi)生臨床醫(yī)療中收治的胃炎患者30例作為研究對象，隨機(jī)分為胃炎對照組、蒲公英原藥組和蒲公英炭組，每組10例，另選10例健康體檢者為健康對照組（n=10）。本研究已經(jīng)獲得醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)（倫理審批號：019026），且受試者均已簽署書面知情同意書。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 胃鏡診斷標(biāo)準(zhǔn)：觀察黏膜出現(xiàn)紅白相間、以白色為主，黏膜中的皺襞變平、甚至消失，黏膜中的血管露顯，呈現(xiàn)出顆粒狀或者是結(jié)節(jié)樣。如果伴膽汁性反流、糜爛、黏膜內(nèi)壁出血等情況，描述成萎縮性胃炎伴膽汁性反流、糜爛、黏膜內(nèi)出血等。在胃鏡下觀察，萎縮性胃炎會有2種類型：即單純的萎縮性胃炎以及萎縮性胃炎伴增生。單純的萎縮性胃炎主要表現(xiàn)出黏膜紅白相間，以白色為主，皺襞會變平、甚至消失，血管露顯;萎縮性胃炎伴增生的主要表現(xiàn)有黏膜呈顆粒狀或者結(jié)節(jié)狀。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn) 年齡>20歲;初次就診者;對本次研究涉及的藥物無過敏者。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn) 肝炎病毒及人類免疫缺陷病毒感染者;自身免疫性疾病患者;惡性腫瘤患者;嚴(yán)重的心腦肝腎等疾病患者。

1.5 脫落與剔除標(biāo)準(zhǔn) 研究期間失訪者;轉(zhuǎn)至其他醫(yī)療機(jī)構(gòu)就診者。

1.6 治療方法 觀察組服用蒲公英炭藥，其中胃炎對照組以及2個觀察組的患者日常自由引用使用去離子水配制的去氧膽酸鈉溶液。模型建立成功后觀察組蒲公英原藥組每天服用蒲公英原藥材藥液，觀察組蒲公英炭藥則每天服用炮制后的蒲公英炭藥液，健康對照組以及胃炎對照組則每天服用去離子水，試驗8周后檢測相關(guān)指標(biāo)。

1.7 觀察指標(biāo) 1）蒲公英炮制前后總黃酮含量變化檢測：將蒲公英進(jìn)行炮制后，提取前后藥材的總黃酮含量?？傸S酮是一類黃酮類化合物，中間主要包括兩類物質(zhì)，一類物質(zhì)是黃酮苷，另一類物質(zhì)是黃酮醇苷，這兩類物質(zhì)與三氯化鋁發(fā)生化學(xué)反應(yīng)后會生成鋁鹽絡(luò)合物，這個物質(zhì)呈黃色，并且黃色的深淺與蒲公英中總黃酮的含量成正比利關(guān)系，可以利用此特征定量測定蒲公英中的總黃酮含量，以便觀察炮制前后總黃酮的變化。使用萬分之一的天平準(zhǔn)確地稱取同量的炮制前后的蒲公英原藥和蒲公英炭，加入液氮充分研磨，隨后加入95%的無水乙醇，加熱回流3次，合并每次的提取液，使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸發(fā)濃縮，收集后使用85%的無水乙醇稀釋至4 mg/mL，加入NaNO2和AlCl3以及NaOH溶液反應(yīng)后在510 nm下檢測;配置標(biāo)準(zhǔn)平，然后使用紫外分光光度計檢測樣本OD值，繪制標(biāo)曲，計算出樣本總黃酮含量。2）患者體質(zhì)量變化：為了觀察蒲公英炮制前后對患者胃炎的影響，試驗期間定期測量患者體質(zhì)量，并做記錄，試驗結(jié)束時，收集患者外周靜脈血。3）患者胃蛋白酶的活性檢測：試驗結(jié)束后，收集患者的胃液，經(jīng)過離心收集上清液，按照胃蛋白酶檢測試劑盒檢測每組患者的胃蛋白酶活性，同時使用酸度計測量胃液pH值。4）血清GAS、IL-1β、IL-6含量檢測：試驗結(jié)束后，收集患者血清，根據(jù)檢測試劑盒檢測GAS（胃黏膜營養(yǎng)因子）、IL-1β（白細(xì)胞介素-1β）、IL-6（白細(xì)胞介素-6）含量。

1.8 療效判定標(biāo)準(zhǔn) 患者的胃鏡檢查：在試驗結(jié)束后，實施胃窺鏡檢查。按照表1炎性評分標(biāo)準(zhǔn)對每組患者進(jìn)行評分。

1.9 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用單因素方差分析或者重復(fù)測量的方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗;計數(shù)資料采用百分率（%）表示，組間比較采用χ2分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 炮制前后總黃酮變化 通過提取檢測，炮制前后每個樣本做5個平行檢測，定量計算統(tǒng)計后發(fā)現(xiàn)，炮制后的蒲公英中總黃酮含量為8.22 μg/mL，而與炮制前的13.14 μg/mL相比降低了38%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，可見在炮制過程中總黃酮有所損失。見表2。

2.2 患者的體質(zhì)量變化 2個觀察組與胃炎對照組比較，體質(zhì)量都有改善，但比較而言，蒲公英原藥組的改善效果更好，優(yōu)于炮制后的蒲公英炭組。見表3。

2.3 患者胃鏡觀察結(jié)果 健康對照組顯現(xiàn)出正常的狀態(tài)，實驗組對胃炎對照組有很大改善，其中蒲公英原藥組的效果更好，更接近與正常組的狀態(tài)。見表4。

2.4 患者胃蛋白酶檢測結(jié)果 試劑盒檢測胃蛋白酶活性，胃炎會導(dǎo)致患者的胃酸pH值、胃液分泌量以及胃蛋白酶活性的降低，而2個觀察組都能改善這種情況，但是蒲公英原藥組的效果比蒲公英炭組的好。見表5。

2.5 患者血清中GAS，IL-1β、IL-6檢測

GAS（胃黏膜營養(yǎng)因子）可以刺激胃酸和胃蛋白酶的分泌，患有胃炎的患者GAS含量會大幅度降低。IL-1β（白細(xì)胞介素-1β）和IL-6（白細(xì)胞介素-6）是2類促炎因子。試驗結(jié)果表明胃炎對照組的GAS含量比正常組的低。而蒲公英原藥組和蒲公英炭組的患者血清GAS含量升高，與胃炎對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。IL-1β和IL-6在胃炎對照組中含量升高與健康對照組比較（P<0.01），其中對于IL-1β來說，2個觀察組與胃炎對照組比較都有所下降。對于IL-6來說有相同的趨勢。而且蒲公英原藥組比蒲公英炭組效果更好。

這些結(jié)果在一定程度上說明了患者患有胃炎會影響GAS、IL-1β和IL-6的變換，而蒲公英改善胃炎的癥狀可能也是通過調(diào)節(jié)這些因子來實現(xiàn)。見表6。

3 討論

蒲公英是一種天然植物，其具有抑菌抗炎作用，一般會經(jīng)過炮制后使用，但在炮制過程中會有活性物質(zhì)的損失[13-14]。有文獻(xiàn)報道說炮制過程中蒲公英中的總黃酮含量會發(fā)生變化，對其作用效果有一定的影響[15]。我們在研究過程中通過對炮制前后蒲公英總黃酮量的提取，發(fā)現(xiàn)炮制后的蒲公英中總黃酮含量為8.22 μg/mL，而與炮制前的13.14 μg/mL比較降低了38%，這些結(jié)果表明在炮制過程中蒲公英總黃酮有所損失。我們研究還發(fā)現(xiàn)胃炎對照組的患者的體質(zhì)量比健康對照組降低，其中體質(zhì)量降低了17.4%，這說明胃炎對患者的生長以及胃部有很大的傷害[16-19]。2組觀察組比較胃炎對照組都有改善，但比較而言，蒲公英原藥組的改善效果更好，優(yōu)于炮制后的蒲公英炭組。

本研究發(fā)現(xiàn)，慢性炎性反應(yīng)的分級可見健康對照組顯現(xiàn)出正常的狀態(tài)，觀察組對胃炎對照組有很大改善，其中蒲公英原藥組的效果更好，更接近與正常組的狀態(tài)。血清炎性反應(yīng)遞質(zhì)包括白細(xì)胞介素、白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-8、白細(xì)胞介素-10、腫瘤壞死因子-α、轉(zhuǎn)化生長因子、單核細(xì)胞化學(xué)引誘物蛋白1和移行細(xì)胞[20-23]。這些細(xì)胞因子是已知的介導(dǎo)胃損傷或免疫抗病反應(yīng)[24-25]。IL-6被觀察到高架早在小兒胃損傷，也許為了防止惠普和/或EBV感染，EBV不僅找到了一種避免IL-6但使用這種細(xì)胞因子來抵消胃黏膜免疫反應(yīng)和持續(xù)。據(jù)報道在病毒和細(xì)菌合并感染的存在IL-6導(dǎo)致巨噬細(xì)胞的抑制巨噬細(xì)胞與膠原受體結(jié)構(gòu)的表達(dá)（MARCO），將無法吞噬細(xì)胞細(xì)菌和病毒感染細(xì)胞[23]。

慢性胃炎屬中醫(yī)“胃脘痛”“胃痞”范疇。早在清代的《外科證治全生集》卷二“胃脘痛”記載：取鮮蒲公英，瓦上炙枯黑存性，研末，每取五分，滴花燒酒，調(diào)團(tuán)口含，再以燒酒送咽。痛息，接服五日痊愈，戒食生冷。目前多采用疏肝理氣等方法。作者自擬黃連公英湯中黃連、蒲公英清熱解毒為君藥，延胡索、陳皮、制香附理氣和胃為臣藥，白芍柔肝止痛為佐，甘草調(diào)和為使。全方共奏清熱解毒，理氣和胃，柔肝止痛的功效。蒲公英性寒，有清熱解毒、消腫散結(jié)、利濕退黃的功效。蒲公英對消化不良、便秘都有改善的作用?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，蒲公英有抗菌消炎的作用，可殺滅幽門螺桿菌等菌，對幽門螺桿菌引起的慢性淺表性胃炎及膽汁反流性胃炎都有很好的療效。

綜上所述，蒲公英是一種天然植物，應(yīng)用于藥物方面有利于提高其使用價值，蒲公英中間含有的黃銅對治療胃炎有一定的作用，在炮制過程中他中間的總黃酮會有損失，其含量的變化影響著對胃炎的改善效果，試驗表明蒲公英炮制前的原藥對胃炎改善效果更好，并且這種效果可能是通過調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)因子IL-1β和IL-6來實現(xiàn)的。

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（2019-05-20收稿 責(zé)任編輯：蒼寧）