馮敏 李麗莉 周仙紅 莊乾營 郭文秀 于毅

摘要：蚜蟲是危害金銀花生產(chǎn)的重要害蟲，篩選有效防控金銀花蚜蟲的生物農(nóng)藥對金銀花綠色生產(chǎn)具有重要意義。本研究以化學(xué)藥劑吡蟲啉為陽性對照，室內(nèi)測定了印楝素、滅幼脲、除蟲脲、魚藤酮、礦物油、苦參堿、蛇床子素7種生物農(nóng)藥對金銀花蚜蟲的毒力。結(jié)果表明，礦物油（94.34%）對蚜蟲的校正死亡率顯著高于吡蟲啉處理（78.79%），魚藤酮、印楝素對蚜蟲的校正死亡率（76.92%～85.46%）與吡蟲啉處理之間無顯著差異，但顯著高于其他生物農(nóng)藥（≤51.29%）。進(jìn)一步對以上4種藥劑田間防控金銀花蚜蟲的效果進(jìn)行研究，結(jié)果表明魚藤酮在第1、3、7 d時的蟲口減退率及校正防效均與吡蟲啉處理無顯著差異，優(yōu)于礦物油及印楝素。因此，魚藤酮可作為首選生物農(nóng)藥應(yīng)用于山東地區(qū)金銀花蚜蟲的綠色防控。

關(guān)鍵詞：金銀花;生物農(nóng)藥;蚜蟲;防控效果

中圖分類號：S435.677 ?文獻(xiàn)標(biāo)識號：A ?文章編號：1001-4942（2020）01-0126-05

Abstract Aphids are the important pests in honeysuckle production. Selecting effective biological pesticides to control aphids is of great significance to the green production of honeysuckle. In the study， the toxicities of seven biological pesticides including azadirachtin， chlorbenzuron， diflubenzuron， rotenone， mineral oil， matrine and osthol against honeysuckle aphids were determined in laboratory with imidacloprid as positive control. The results showed that the corrected mortality of aphids in mineral oil treatment as 94.34% was significant higher than that in imidacloprid treatment as 78.79%， while those in rotenone and azadirachtin treatments（76.92%～85.46%） were not significantly different from those in imidacloprid treatment， but the corrected mortalities of the above treatments were all significantly higher compared with the other biological pesticides（≤51.29%）. The further field experiment indicated that no significant difference was in the population reduction rate and corrected control effect between rotenone and imidacloprid at the 1st， 3rd， and 7th day after application， which were superior to applying mineral oil and azadirachtin. Thus， rotenone could be used as the preferred biological pesticide for the green control of honeysuckle aphids in Shandong Province.

Keywords Lonicera japonica Thunb.; Biological pesticides; Aphids; Control effect

金銀花（Lonicera japonica Thunb.）屬忍冬科（Caprifoliaceae）忍冬屬（Lonicera），又名忍冬，是國務(wù)院確定的 38 種名貴中藥材之一[1-3]。金銀花藥用歷史悠久，其莖、葉、花均可入藥，具有清熱解毒、疏風(fēng)散熱、抑菌和抗病毒等功效[4，5]，有“中藥中的抗生素”之稱[6]。近年來，隨著金銀花開發(fā)力度不斷加大，其應(yīng)用范圍也不斷拓寬，涉及醫(yī)藥、保健品、食品添加劑、化妝品等領(lǐng)域[7-11]，已是當(dāng)今重要的中藥材之一。

伴隨需求量的增長，金銀花的種植面積也逐年增加，但在種植過程中害蟲為害日趨嚴(yán)重。蚜蟲是影響金銀花生產(chǎn)的主要害蟲之一，其繁殖能力極強(qiáng)，每年至少發(fā)生10代，嚴(yán)重時葉片背面群集多達(dá)數(shù)百頭，以成蟲、幼蟲于葉片背面刺吸葉片汁液，影響葉片的光合作用，使受害葉片的葉綠素含量低于正常葉片，進(jìn)而卷縮發(fā)黃，影響植株生長;在花蕾期為害會導(dǎo)致花蕾畸形，同時蚜蟲還可分泌蜜露，引起煙霉病[12-14]，對金銀花的產(chǎn)量和品質(zhì)影響極大。

目前，金銀花上蚜蟲的防控主要以化學(xué)藥劑為主，包括吡蟲啉、啶蟲脒等煙堿類化學(xué)藥劑，造成采收的金銀花中有化學(xué)農(nóng)藥殘留現(xiàn)象，嚴(yán)重制約了金銀花產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。因此，有必要對金銀花上蚜蟲的生物防治方法進(jìn)行系統(tǒng)研究，保證產(chǎn)品質(zhì)量安全[15-18]。

作為生物防治的重要組成部分，生物農(nóng)藥是從天然的化學(xué)物質(zhì)或生命體提取的新型農(nóng)藥，一般對靶標(biāo)有害生物專一性強(qiáng)、使用量低、毒性大，而對高等動物毒性小，在避免環(huán)境污染、減少害蟲抗藥性、害蟲科學(xué)防治等方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢[19]。本試驗通過研究印楝素、滅幼脲、除蟲脲、魚藤酮、蛇床子素、苦參堿、礦物油7種生物農(nóng)藥對金銀花蚜蟲的防控效果，篩選出有效防控金銀花蚜蟲的生物農(nóng)藥，以期為金銀花的綠色生產(chǎn)提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 供試蚜蟲

采集于山東省泰安市，種類為胡蘿卜微管蚜（Semiaphis heraclei Takahashi），該種植區(qū)未噴施任何化學(xué)藥劑。剪取蚜蟲發(fā)生嚴(yán)重的枝條，2 h內(nèi)帶回實(shí)驗室開展室內(nèi)測定試驗。

1.2 供試藥劑

試驗所需藥劑具體信息詳見表1。

1.3 室內(nèi)毒力測定

室內(nèi)毒力測定參照浸葉法（NY/T 1154.14—2008）[20]進(jìn)行，并在保濕處理上做一些調(diào)整。將供試藥劑配制成田間推薦使用濃度;選取大小一致（未修剪）未施用過農(nóng)藥的無蟲金銀花葉片[（2.0±0.5） cm2]，用鑷子夾住在供試藥液中浸泡10 秒，立即取出于實(shí)驗室內(nèi)自然晾干后，放置于墊有兩層濾紙的一次性培養(yǎng)皿（d=9 cm）中，1葉1皿;用鑷子取有蚜蟲的葉片，將其在供試藥液中浸泡10秒后取出， 用濾紙吸掉蚜蟲體上的多余藥液， 把處理后的蚜蟲用毛筆輕輕接入裝有對應(yīng)藥劑處理過的葉片的培養(yǎng)皿中， 每一培養(yǎng)皿中的蚜蟲數(shù)量不少于30頭，并在培養(yǎng)皿濾紙上滴加1 mL無菌水保持培養(yǎng)皿內(nèi)濕度，用封口膜密封。每處理設(shè)4個重復(fù)，以化學(xué)藥劑吡蟲啉作為陽性對照、無菌水作為陰性對照，所有處理均置于（25±1）℃、相對濕度（50±5）%環(huán)境中，48 h后統(tǒng)計蚜蟲的存活數(shù)量、死亡數(shù)量，以毛筆輕觸蚜蟲腹部、四肢無反應(yīng)視為死亡。試驗選取不同批次蚜蟲進(jìn)行重復(fù)測定。

1.4 田間防治效果研究

根據(jù)室內(nèi)毒力測定結(jié)果，選取對蚜蟲致死效果較好（> 75%）的生物農(nóng)藥，研究其對蚜蟲的田間防控效果。試驗設(shè)在泰安市滿莊鎮(zhèn)，試驗前未噴施任何化學(xué)藥劑。試驗區(qū)除去周邊3 m距離的金銀花，防止“邊緣效應(yīng)”。以5株金銀花作為一個試驗小區(qū)（約20 m2），小區(qū)之間間隔1 m，各個處理在試驗區(qū)內(nèi)隨機(jī)設(shè)置。在每個小區(qū)每株金銀花的東、西、南、北四個方位隨機(jī)選取4個枝條，在距離金銀花枝條頂端約10 cm處系紅色標(biāo)志牌，以標(biāo)志牌位置向上6片對葉作為蚜蟲數(shù)量的統(tǒng)計范圍。

試驗設(shè)不同生物農(nóng)藥處理，以吡蟲啉作陽性對照，清水作陰性對照，所有處理及對照設(shè)置4個重復(fù)。每個試驗小區(qū)分別用2.5 L手動式按壓噴壺將2 L藥液或清水在避免交叉污染的前提下均勻噴施于5株金銀花葉片正反面上。試驗前1 d統(tǒng)計每一試驗小區(qū)內(nèi)標(biāo)記枝條上統(tǒng)計范圍內(nèi)的蚜蟲數(shù)量，施藥后第1、3、7 d分別統(tǒng)計特定范圍內(nèi)蚜蟲的存活數(shù)量。

1.5 統(tǒng)計分析

蚜蟲死亡率按照Abbott[21]的公式進(jìn)行校正，計算其校正死亡率，不同批次間校正死亡率經(jīng)paired sample t-tests 檢驗無顯著性差異（P>0.05）后取其中一次數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。按照下列公式計算蟲口減退率、校正防效：

蟲口減退率（%）=

藥前蟲口基數(shù)-藥后活蟲數(shù)藥前蟲口基數(shù)×100 ;

校正防效（%）=

處理區(qū)蟲口減退率-對照區(qū)蟲口減退率1-對照區(qū)蟲口減退率×100 。

百分?jǐn)?shù)值均經(jīng)反正弦變換后，采用軟件SPSS 16.0進(jìn)行方差分析，多重比較采用Tukey法（P<0.05）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同生物農(nóng)藥對金銀花蚜蟲的室內(nèi)毒力測定

不同生物農(nóng)藥在田間推薦使用濃度下對金銀花蚜蟲的致死效果不同（圖1）。礦物油處理的蚜蟲校正死亡率最高，達(dá)94.34%，與魚藤酮（85.46%）無顯著差異，但顯著高于其他藥劑及吡蟲啉處理（F=26.35;df=7，24;P<0.001）。滅幼脲、除蟲脲、苦參堿、蛇床子素處理的蚜蟲校正死亡率最低（≤51.29%），且之間無顯著差異，但均顯著低于吡蟲啉、印楝素、魚藤酮及礦物油處理（≥76.92%）。

2.2 不同生物農(nóng)藥對田間金銀花蚜蟲蟲口減退率的影響

田間調(diào)查發(fā)現(xiàn)， 藥劑處理后金銀花的株形、葉色、花蕾、生長狀況等均與對照基本一致， 未發(fā)現(xiàn)藥害現(xiàn)象， 表明試驗用生物農(nóng)藥使用劑量不會影響金銀花的正常生長。不同生物農(nóng)藥處理對金銀花蚜蟲蟲口減退率的影響見圖2。第1 d時，吡蟲啉、魚藤酮對蚜蟲的蟲口減退率（≥ 49.80%）顯著高于印楝素和礦物油（≤ 29.90%）（F=67.90;df= 4，15;P<0.001）。第3 d時，各個農(nóng)藥處理的蟲口減退率均呈上升趨勢（≥61.31%），相互之間無顯著差異，但均顯著高于對照（F=164.39;df=4，15;P<0.001）。第7 d時，除礦物油處理的蟲口減退率較第3 d呈現(xiàn)輕微下降外，其他農(nóng)藥處理的蟲口減退率均有所上升，其中魚藤酮與吡蟲啉處理的蟲口減退率較高，分別為73.56%、77.02%，所有農(nóng)藥處理間的蟲口減退率無顯著差異，但顯著高于對照（F=34.46;df=4，15;P<0.001）。

2.3 不同生物農(nóng)藥對田間金銀花蚜蟲的校正防效

不同生物農(nóng)藥處理對金銀花蚜蟲的校正防效見圖3。第1 d時，吡蟲啉、魚藤酮對蚜蟲的校正防效較高（≥ 45.72%），顯著高于印楝素和礦物油（≤ 24.20%）（F=20.72;df=3，12;P<0.001）。第3 d時，各生物農(nóng)藥對蚜蟲的校正防效明顯上升，分別為64.25%、70.58%、72.01%，與吡蟲啉處理（67.61%）之間無顯著差異（F=1.115;df=3，12;P=0.381）。第7 d時魚藤酮處理的校正防效（76.58%）與吡蟲啉處理（78.99%）無顯著差異，二者均顯著高于印楝素（62.42%）與礦物油處理（64.20%）（F=9.932;df=3，12;P=0.001）。

3 討論與結(jié)論

本研究以吡蟲啉為陽性對照，通過對印楝素、滅幼脲、除蟲脲、魚藤酮、礦物油、苦參堿、蛇床子素7種生物農(nóng)藥對金銀花蚜蟲的室內(nèi)毒力效果進(jìn)行研究，篩選出了與吡蟲啉防治效果無差異的三種藥劑：魚藤酮、印楝素及礦物油。進(jìn)一步進(jìn)行田間試驗發(fā)現(xiàn)，印楝素與礦物油應(yīng)用后第1 d表現(xiàn)出的效果并不理想，表明這兩種生物農(nóng)藥田間應(yīng)用時對金銀花蚜蟲的殺蟲速率較吡蟲啉、魚藤酮慢，可能與這兩種藥劑本身對害蟲的作用機(jī)理有關(guān)。印楝素是從印楝中提取的目前世界上公認(rèn)的廣譜易降解、高效、低毒、無殘留的環(huán)保型殺蟲劑[22]，對害蟲的作用方式多種多樣，包括拒食、抑制生長發(fā)育、忌避、胃毒和絕育等作用，其中以拒食和抑制昆蟲生長發(fā)育尤為顯著[23]。礦物油是人工提取的天然礦物源農(nóng)藥，其致死害蟲方式為物理窒息，可在蟲體或卵殼表面形成油膜，封閉害蟲感覺器官，進(jìn)入氣門和氣管使害蟲窒息而死[24]。另外，根據(jù)室內(nèi)毒力測定結(jié)果，礦物油對蚜蟲48 h的致死效果非常高，可達(dá)94.34%，因此，如何將礦物油有效應(yīng)用于大田中值得進(jìn)一步研究。

與印楝素、礦物油不同，魚藤酮在田間推薦使用濃度下應(yīng)用對金銀花無藥害，且對金銀花蚜蟲的速效性和防治效果與吡蟲啉相仿。魚藤酮是由日本科學(xué)家從魚藤中分離出來的具有殺蟲作用的化學(xué)物，可經(jīng)胃毒或觸殺消滅害蟲，其作用機(jī)理為抑制昆蟲細(xì)胞呼吸代謝并且影響其神經(jīng)機(jī)能使害蟲癱瘓[25]，屬于植物源農(nóng)藥，可以相應(yīng)減少環(huán)境污染。

化學(xué)藥劑吡蟲啉屬高效、低毒的煙堿類殺蟲劑，具有良好的內(nèi)吸性， 兼具胃毒和觸殺作用，持效期較長[26]，被廣泛應(yīng)用于防治多種作物蚜蟲，其效果可達(dá)77.83%～98.94%[27-31]。在本研究中，吡蟲啉處理7 d時的防治效果為78.99%，防治效果相對較低，這可能與田間試驗開展時金銀花蚜蟲種類、蚜蟲已處于盛發(fā)期等因素有關(guān)。金銀花蚜蟲的盛發(fā)期往往與金銀花采花期重疊，因此從防治的有效性和安全性角度考慮，與吡蟲啉防治效果相仿的生物農(nóng)藥魚藤酮可作為化學(xué)藥劑的替代藥劑應(yīng)用于金銀花蚜蟲的綠色防控。在應(yīng)用時，應(yīng)結(jié)合金銀花蚜蟲發(fā)生情況，做到盡早防治，避免花期用藥，注意安全間隔期，從而保證金銀花的質(zhì)量安全。

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