林翠蘋 青島市食品藥品檢驗(yàn)研究院

引言：近年來食品安全問題受到世界范圍內(nèi)重視，隨著食品加工行業(yè)的快速興起，食品安全問題也成為了全球熱點(diǎn)。食品安全問題不僅與人民健康息息相關(guān)，同時也影響全世界內(nèi)食品貿(mào)易發(fā)展。在全球經(jīng)濟(jì)化背景下，食品安全問題更是得到了人民普遍重視，這就需要相關(guān)檢測技術(shù)手段，特別是食品中有機(jī)有害化學(xué)物質(zhì)殘留的檢測分析。

一、有機(jī)有害化學(xué)物質(zhì)殘留檢測技術(shù)

現(xiàn)在普遍采用的有機(jī)有害化學(xué)物質(zhì)殘留檢測技術(shù)是CLIA技術(shù)，稱為化學(xué)免疫發(fā)光法，由免疫分析系統(tǒng)和化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)組成。被檢測物質(zhì)的抗體和抗體通過免疫分析系統(tǒng)通過酶與化學(xué)發(fā)光物質(zhì)標(biāo)記，得到的免疫復(fù)合物注入發(fā)光底物后被氧化，最終得到穩(wěn)定態(tài)。通過儀器對其盡心光強(qiáng)檢測。[1]光強(qiáng)強(qiáng)度與被檢測物質(zhì)濃度大小成正比，因此可以通過光強(qiáng)得到被檢測物質(zhì)濃度。

二、CLIA技術(shù)分類

CLIA通過標(biāo)記物種類分為ECL、cLELA和CLIA三種類型。CLIA通過將化學(xué)發(fā)光劑注入待測物，從而完成化學(xué)發(fā)光標(biāo)記和殘留濃度檢測，常用的標(biāo)記物質(zhì)為吖啶酯類或魯米諾類；ECL通過電流發(fā)光進(jìn)行檢測，三聯(lián)吡啶釕和TPA是常用的發(fā)光底物。[2]cLELA發(fā)光劑為酶促反應(yīng)底物，從而進(jìn)行標(biāo)記和檢測，常用酶促底物有HRP和堿性磷酸酶。

三、CLIA技術(shù)在食品有機(jī)有害物質(zhì)殘留檢測應(yīng)用

（一）檢測生物毒素殘留

生物毒素一般是微生物或者動植物產(chǎn)生，經(jīng)動物和植物吸收后會產(chǎn)生中毒反應(yīng)，如果生物毒素經(jīng)過人體吸收會對人體健康造成極大危害。生物毒素分為動物毒素、植物毒素和海洋毒素，種類繁多，毒性差異較大，對于人體而言，吸入不同毒素后產(chǎn)生中毒反應(yīng)也是各有差異的。海豚毒素是一種劇毒毒素，很小的量便會是人或者其他動物中毒甚至死亡，含量較低的麥角堿有著一定藥理作用，但是濃度較高的麥角堿會使人體出現(xiàn)較強(qiáng)中毒反應(yīng)。[3]有的生物毒素被吸入之后沒有立即的中毒反應(yīng)，屬于慢性中毒，當(dāng)隨著攝入量加大，中毒反應(yīng)出現(xiàn)后往往已經(jīng)較為致命。因此，對食品中生物毒素殘留含量檢測十分有必要，當(dāng)前較為普遍的檢測分析方法有生物法、化學(xué)法和化學(xué)免疫法，不同分析方法各有優(yōu)劣?；瘜W(xué)法有著較高的檢測精度，但是檢測設(shè)備非常昂貴，操作較為復(fù)雜，檢測環(huán)境比較苛刻同時對于檢測技術(shù)有著極高的要求。與傳統(tǒng)花謝法相比，CLIA技術(shù)通過特異性反應(yīng)與發(fā)光結(jié)合，適應(yīng)范圍光，靈敏度精確性高，特異性強(qiáng)，所用設(shè)備儀器相對便宜，同時可選取范圍比較廣，有著眾多優(yōu)勢。

（二）檢測病原微生物殘留

微生物主要由真菌、病毒和細(xì)菌組成，現(xiàn)在常用的檢測方法有分子生物學(xué)法、基因芯片法、免疫磁珠法和免疫檢測法。常用的分子生物學(xué)法又分為PCR法和核酸探針法。核酸探針法選擇性低，每檢測一種微生物就要更換一次探針，操作繁瑣，PCR法不用頻繁換取探針，但是檢測系統(tǒng)容易污染。現(xiàn)在以CLIA技術(shù)對常用來檢測的食品為例進(jìn)行說明，大腸桿菌、沙門桿菌以及乳酸菌常存在于農(nóng)產(chǎn)品、啤酒、牛奶和豬肉，CLIA對此有著極高的靈敏度和選擇性，牛奶中大腸桿菌檢測范圍為105～106cfu/mL，豬肉中大腸桿菌線性范圍為105～5x106cfu/mL。因此CLIA技術(shù)可以有效對食品中病原微生物殘留含量進(jìn)行檢測。

四、液相聲色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)

液相聲色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（LCMS/MS）現(xiàn)在也已經(jīng)在食品安全檢測中不可或缺，質(zhì)譜技術(shù)本身就已經(jīng)在化學(xué)、生物和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用，通過質(zhì)譜與液相聲色質(zhì)譜聯(lián)用，液相色譜可以分離生物大分子，靈敏度高，選擇性強(qiáng)。對于堿性樣品中的NH2、CO和NH等可以運(yùn)用離子化模式，食品樣品中的-COOH、-Br等強(qiáng)負(fù)性基團(tuán)可以用負(fù)離子化模式進(jìn)行檢測。

結(jié)語：現(xiàn)在食品安全問題仍然不斷出現(xiàn)，其中不僅因?yàn)槭称贩N類日益增多，生產(chǎn)加工工藝趨于復(fù)雜，同時因?yàn)槿藗儼踩庾R不強(qiáng)，總是更趨向于食品美味，從而引發(fā)了很多食品安全問題。CLIA技術(shù)作為檢測食品中有機(jī)有害化學(xué)物質(zhì)殘留的有效技術(shù)，已經(jīng)在檢測生物毒素、病原微生物方面取得顯著成效。因?yàn)槠潇`敏度高，選擇性強(qiáng)，操作簡單，設(shè)備相對便宜等，因此在食品安全檢測有機(jī)物殘留有著廣泛的應(yīng)用。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，CLIA技術(shù)會不斷得到發(fā)展和完善，在保障食品安全方面做出更大的貢獻(xiàn)。