唐天友

禽流感是由A型流感病毒引起的一種禽類（家禽和野禽）傳染病。病毒根據(jù)血凝素（HA）和神經(jīng)氨酸酶（NA）的抗原性不同進(jìn)行分類，目前，HA分為H1～H16亞型，NA分為N1～N9亞型。由H5、H7亞型毒株引起的疾病稱為高致病性禽流感（HPAI），發(fā)病急，發(fā)病率和病死率可達(dá)100%，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）列為法定通報(bào)動(dòng)物疫病，被我國(guó)列為優(yōu)先防控和重點(diǎn)防范的一類動(dòng)物疫病。2004年和2017年，我國(guó)分別對(duì)H5、H7亞型禽流感實(shí)行強(qiáng)制免疫和抗體監(jiān)測(cè)，并要求采用重組禽流感病毒（H5+H7）二價(jià)滅活疫苗（H5N1Re-8株+H7N9H7-Re1株）集中免疫。為了解羅山縣高致病性禽流感免疫效果，制定科學(xué)合理的免疫程序，開(kāi)展評(píng)價(jià)工作，正確判斷禽流感防控形勢(shì)，2019年10月，羅山縣畜牧局組織開(kāi)展本次免疫效果監(jiān)測(cè)，以便提供可靠的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)參考。

1、材料與方法

（1）抽樣設(shè)計(jì)抽樣設(shè)計(jì)方法采用先群體抽樣再個(gè)體抽樣。根據(jù)《2019年羅山縣動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)與流行病學(xué)調(diào)查計(jì)劃》，按照估計(jì)免疫抗體陽(yáng)性率方法，設(shè)85%的預(yù)期免疫抗體合格率（p），10%的可接受誤差（d），在95%的置信水平（CL）下，根據(jù)公式N=1.962×p（1–p）/d2計(jì)算出抽樣場(chǎng)數(shù)N=49個(gè)，并結(jié)合羅山縣春秋季強(qiáng)制免疫實(shí)際，對(duì)11個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)隨機(jī)抽樣50個(gè)場(chǎng)群開(kāi)展集中監(jiān)測(cè)。場(chǎng)群內(nèi)采取系統(tǒng)抽樣，依據(jù)場(chǎng)群分類不同，在家禽養(yǎng)殖場(chǎng)抽取1440份，活禽交易場(chǎng)所抽取150份，散養(yǎng)戶抽取30份，共采集樣品1670份。具體抽樣設(shè)計(jì)見(jiàn)表1。

（2）樣品采集無(wú)菌操作翅靜脈采集雞血液，每只2～3ml，3000r/min離心10～15min，析出血清，做好標(biāo)記，-20℃保存?zhèn)錂z。

（3）檢測(cè)試劑禽流感H5亞型病毒（Re-8株）血凝抑制試驗(yàn)抗原，批號(hào)：2019062;禽流感H7亞型病毒（H7N9株），批號(hào)：2019071，以上兩種試劑均為哈爾濱維科生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司產(chǎn)品。

（4）檢測(cè)方法與判斷標(biāo)準(zhǔn)按照《高致病性禽流感診斷技術(shù)》（GB/T18936—2003）中血凝抑制試驗(yàn)（HI）檢測(cè)H5、H7亞型禽流感免疫抗體。判斷標(biāo)準(zhǔn)按照個(gè)體HI抗體效價(jià)≥24為免疫合格個(gè)體，群體免疫抗體合格率≥70%為免疫合格群體，H5和H7群體免疫抗體合格率均≥70%為免疫合格場(chǎng)群。

2、結(jié)果

（1）H5、H7亞型禽流感免疫整體情況50個(gè)場(chǎng)群中，有32個(gè)場(chǎng)群使用重組禽流感（H5+H7）二價(jià)滅活疫苗，占場(chǎng)群數(shù)量的64.0%（32/50）;H5亞型場(chǎng)群合格率為76.0%（38/50），個(gè)體合格率為86.3%（1442/1670）;H7亞型場(chǎng)群合格率為50.0%，個(gè)體抗體合格率為59.5%（993/1670）。養(yǎng)殖場(chǎng)的H5、H7亞型群體合格率和個(gè)體合格率均高于散養(yǎng)戶和活禽交易點(diǎn)，且差異顯著（P<0.05）。

（2）使用不同疫苗的場(chǎng)群抗體合格率比較在50個(gè)場(chǎng)群中，32個(gè)使用（H5+H7）二價(jià)滅活疫苗，18個(gè)使用其他禽流感類型疫苗和未免疫。比較使用（H5+H7）二價(jià)滅活疫苗場(chǎng)群與使用其他疫苗和未免疫場(chǎng)群的H5、H7亞型免疫抗體，可以看出前者個(gè)體免疫抗體合格率均大于70%，分別比后者高出27.5%、187.3%，差異極顯著（P<0.01）;同時(shí)，前者群體合格率也大于未使用的群體合格率，分別高于37.9%、124.8%，差異極顯著（P<0.01）。不使用（H5+H7）二價(jià)滅活疫苗導(dǎo)致禽流感群體免疫合格率低于70%的風(fēng)險(xiǎn)是使用（H5+H7）二價(jià)滅活疫苗的2.6倍（OR=2.6，95%CL：1.1～13.0）。

（3）群間分布家禽種類不同，H5、H7亞型禽流感場(chǎng)個(gè)體免疫抗體情況存在差別。雞和其他禽類（鴨、鵝）全部場(chǎng)群合格率分別為50%和0，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。雞和其他禽類（鴨、鵝）的H5亞型個(gè)體合格率分別為86.1%、91.4%，差異不顯著（P>0.05）;H7亞型個(gè)體合格率分別為62.1%、0，差異極顯著（P<0.01）。

（4）空間分布分析羅山縣高致病性禽流感空間分布，結(jié)果顯示，羅山縣11個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)區(qū)域內(nèi)群體合格率和個(gè)體合格率不均衡，存在較大差異。D、F、K鄉(xiāng)鎮(zhèn)的H5、H7亞型場(chǎng)群合格率和個(gè)體合格率均高于70%，占鄉(xiāng)鎮(zhèn)總數(shù)的27.3%（3/11），符合國(guó)家要求，但是A、E、H、I和J鄉(xiāng)鎮(zhèn)的H7亞型免疫抗體檢測(cè)不到，占鄉(xiāng)鎮(zhèn)總數(shù)的45.5%（5/11）。

3、小結(jié)與討論

高致病禽流感對(duì)養(yǎng)禽業(yè)危害巨大，我國(guó)將高致病性禽流感納入強(qiáng)制免疫計(jì)劃，實(shí)行H5亞型和H7亞型高致病性禽流感100%免疫。農(nóng)業(yè)部在2017年秋季，要求使用H5+H7二價(jià)滅活疫苗替代重組禽流感病毒H5二價(jià)或三價(jià)滅活疫苗，對(duì)家禽實(shí)施免疫。

本次檢測(cè)是在秋季強(qiáng)制免疫21天后進(jìn)行的抽樣抗體檢測(cè)，從本調(diào)查檢測(cè)數(shù)據(jù)看，場(chǎng)群免疫密度達(dá)不到100%，進(jìn)一步對(duì)抽樣檢測(cè)點(diǎn)調(diào)查，主要是對(duì)該病重視性不夠，部分養(yǎng)禽場(chǎng)戶沒(méi)有按照要求替換使用H5+H7二價(jià)滅活疫苗。

4、結(jié)論

本次血清學(xué)調(diào)查結(jié)果表明，使用H5+H7二價(jià)滅活疫苗免疫可以達(dá)到免疫保護(hù)水平，效果優(yōu)于未使用的。建議加大宣傳力度，要求家禽養(yǎng)殖場(chǎng)戶使用H5+H7二價(jià)滅活疫苗，對(duì)免疫不合格者進(jìn)行補(bǔ)免。

（作者單位：464200河南省羅山縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所）