彭亞柏 朱秀云 劉賽云 王敏 龍壽斌 程文兵 蔡侃儒 劉甲野

丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus，HCV）和乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBV）感染慢性化程度高，可導(dǎo)致肝硬化和肝癌，是嚴(yán)重威脅人類健康的主要傳染?。?-4］。HBV與HCV存在相似的傳播途徑，所以HBV/HCV重疊感染較常見。同樣的，HCV與HIV（Human immunodeficiency virus，HIV）兩者共有的傳播方式也容易造成這兩種病毒共感染。有研究顯示HCV和HBV均為嗜肝病毒，兩者重疊感染后HCV RNA水平與單純丙型感染者無明顯差異，但加速了肝臟疾病的進(jìn)行性惡化，更易形成肝硬化和肝癌［5-8］。但也有研究認(rèn)為HCV和HBV重疊感染后也會(huì)存在相互抑制的現(xiàn)象［9］。慢性HCV感染重疊HIV時(shí)，與 單獨(dú)HCV感染者相比，其血液中存在更高的HCV RNA滴度，HIV可促進(jìn)HCV對肝臟的攻擊，從而加速了肝細(xì)胞的損傷［10］，同時(shí)HCV/HIV重疊感染患者，其發(fā)生機(jī)會(huì)性感染及死亡率也高于未重疊感染HIV患者［11］。HCV存在眾多基因型，但不同基因型HCV發(fā)生HBV或HIV重疊感染時(shí)的病毒學(xué)特征研究較少。故本文擬研究不同基因型HCV重疊HBV或HIV感染時(shí)，HCV的病毒學(xué)特征。

1 對象和方法

1.1 一般資料

選取2017至2020年于本院就診篩查HCV基因型的1 292名患者，以其中既完成HCV RNA，又進(jìn)行HBV和HIV檢測的丙肝患者為研究對象，共入組397名符合條件的丙肝患者。所有患者及家屬均已簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：混合基因型感染；合并其他病毒性急性肝炎；排除同時(shí)合并HBV和HIV。本研究已通過本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過。

1.2 方法

采用PCR熒光探針法（泰普生物科學(xué)有限公司）檢測HCV基因分型，按照HCV基因分型檢測試劑盒說明書中的標(biāo)準(zhǔn)判定分型結(jié)果。使用羅氏Cobas TaqMan試劑檢測HCV RNA載量，同時(shí)依據(jù)檢測試劑盒說明書中的標(biāo)準(zhǔn)判定結(jié)果。對于乙肝五項(xiàng)及HIV的檢測，均使用酶聯(lián)免疫法，根據(jù)要求判定陰性或陽性結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用n（%）表示，不符合正態(tài)分布的計(jì)數(shù)資料，用中位數(shù)、四分位距描述，采用中位數(shù)和（25%、75%分位數(shù)）表示，統(tǒng)計(jì)分析采用χ2檢驗(yàn)或非參數(shù)檢驗(yàn)，以中位數(shù)（25%、75%分位數(shù)）表示。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對所有進(jìn)行基因分型檢測的丙肝患者的基因型構(gòu)成特點(diǎn)進(jìn)行分析

2017至2020年期間篩選的1 292名丙肝患者中，共檢測出5種基因型，分別為1b型、6a型、2a型、3b型、3a型，其所占比例如圖1。結(jié)果顯示1b型比例最高，3a型比例最低，除2a型外，其余基因型中男性患者高于女性患者。

圖1 檢測的丙肝患者的基因型構(gòu)成特點(diǎn)Figure 1 Proportion of genotype in patients with Hepatitis C infection

2.2 對丙肝患者不同基因型中重疊HBV或HIV特征進(jìn)行分析

符合入組的397例丙肝患者。丙肝重疊HBV或HIV感染率分別為9.1%（36/397）與6.3%（25/397）。見表1。

表1 丙肝患者不同基因型中HBV或HIV共感染率Table 1 Prevalence of co-infection with HBV or HIV in Hepatitis Cpatients stratified by HCV genotype

2.3 分析重疊HBV或HIV感染后不同基因型的HCV病毒載量的變化

未重疊HBV感染與重疊HBV感染的1b型HCV RNA滴度的中位數(shù)（25%，75%IQR）分別為1.55×106（3.12×105，3.25×106）IU/mL和2.64×105（6050，9.41×105）IU/mL，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。相似的，對于6a型，其分別是1.52×106（1.44×105，7.11×106）IU/mL和1.48×106（1.45×105，4.81×106）IU/mL，兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。而對于3a型、3b型、2a型，其重疊HBV感染的樣本量少，未進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。同樣地，未重疊HIV感染與重疊HIV感染的1b型HCV RNA滴度的中位數(shù)（25%，75%IQR）分別為1.27×106（2.80×105，3.04×106）IU/mL和1.99×106（1.28×105，4.26×106）IU/mL，相似的，對于6a型及3a型，其分別是1.46×106（1.44×105，6.86×106）IU/mL和3.44×106（1.29×105，8.08×106）IU/mL，1.84×106（3.48×105，7.31×106）IU/mL和3.60×106（6.61×105，6.03×106）IU/mL。在1b型、6a型及3a型，未重疊HIV感染與重疊HIV感染，其HCV RNA的滴度在兩組間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），而對于3b型、2a型，由于其重疊HIV感染的樣本量少，未進(jìn)行統(tǒng)計(jì)（圖2）。

圖2 重疊HBV或HIV感染后不同基因型的HCV病毒載量的差異Figure 2 The difference of HCV viral load in different genotypes after superimposed HBV or HIV infection

3 討論

HCV是一種單股線性正鏈黃病毒［12］，基因易變異，目前至少可分為6個(gè)基因型及多個(gè)亞型，其中1型、2型、3型、6型是我國常見的四種HCV基因型。對于這些基因型還有不同亞型的存在，我國以1b型、2a型常見，6a型是我國南方地區(qū)流行的HCV主要亞型［13］。不同基因型HCV病毒的致病力和對抗病毒治療的反應(yīng)不同，而分析合并HIV或HBV的HCV感染者的基因型分布對于共感染者的HCV病毒學(xué)特征及抗病毒治療可提供重要的依據(jù)。

付［14］等人對廣東省丙型病毒性肝炎的流行概況和流行特征中發(fā)現(xiàn)，深圳市報(bào)告丙型肝炎病例數(shù)位于全省第三位。本研究顯示深圳地區(qū)慢性HCV感染以1b及6a型為常見基因型，慢性HCV感染者重疊HBV或HIV感染率對于不同基因型其重疊感染率不同。有研究顯示雖然HCV 1b型最為常見，但對于HBV易感性來說，與其他基因型相比，無明顯易感性增強(qiáng)的表現(xiàn)。鄧［15］的一項(xiàng)研究顯示，HCV重疊HIV感染者與HCV感染者其感染的HCV基因型構(gòu)成比存在差異，HCV/HIV重疊感染中HCV基因型以6a型為主，2a型未見重疊感染。故HCV重疊感染HBV或HIV的基因型分布特點(diǎn)不同于HCV基因型分布特點(diǎn)。

HCV與HBV在體內(nèi)共存較常見，均為嗜肝病毒，有研究顯示兩者重疊感染后更易發(fā)生免疫系統(tǒng)紊亂，這種改變可能表現(xiàn)為相互干擾或抑制現(xiàn)象［6，9］。但合并感染時(shí)是否存在HBV對不同基因型HCV感染者病毒載量的影響鮮有報(bào)道［9，16］。本研究發(fā)現(xiàn)重疊HBV或HIV感染后不同基因型的HCV病毒載量與單純HCV感染組不同。?。?7］的一項(xiàng)研究顯示，HCV重疊HBV感染者HCV RNA滴度與單純HCV感染者的病毒載量無明顯差異，但是丁未對HCV感染者的不同基因型重疊感染HBV后進(jìn)行分析。同時(shí)Jamma［18］應(yīng)用新的細(xì)胞生物模型也顯示出兩種病毒在同一肝細(xì)胞內(nèi)復(fù)制而互不影響，進(jìn)一步驗(yàn)證了丁的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。但也有研究發(fā)現(xiàn)HCV對HBV存在抑制作用，其強(qiáng)弱與HCV基因型有關(guān)，表現(xiàn)出1b型強(qiáng)于基因3a和1a型［19］，本研究未探討HCV對HBV的作用?？傊?，本研究發(fā)現(xiàn)對于不同HCV基因型，HBV對HCV作用的表現(xiàn)形式也不一樣。

HCV和HIV共有的血液傳播方式，使兩者發(fā)生重疊感染機(jī)會(huì)增加，對于HCV重疊HIV感染后，HIV對不同基因型HCV感者病毒載量變化的研究甚少。但是此兩項(xiàng)研究均未探討對于不同HCV基因型重疊感染HIV后，HIV是否表現(xiàn)為一樣的作用。由于HCV基因型的分布存在地域差異，不同地區(qū)的研究其HCV基因型分布特點(diǎn)不一樣，焦的研究是地區(qū)是中國北方，本研究地是中國南方。本研究的主要不足為部分基因型樣本量少，無法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)計(jì)算，未來需要全國范圍各個(gè)區(qū)域的多中心研究來驗(yàn)證和補(bǔ)充我們的結(jié)論。

總之，本研究發(fā)現(xiàn)深圳地區(qū)慢性HCV感染者重疊HBV或HIV感染率較高；重疊HBV感染的1b型患者HCV RNA復(fù)制減弱，重疊HIV感染的患者，各基因型HCV RNA滴度無明顯變化。