曉 華 楊一泓 楊 薇 海 平 李久明 徐 寧

（內(nèi)蒙古民族大學(xué)天然產(chǎn)物化學(xué)及功能分子合成重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，內(nèi)蒙古 通遼028000）

延胡索是罌粟科紫堇屬植物延胡索的干燥塊莖，常用治療經(jīng)閉痛經(jīng)、腹中肝塊、產(chǎn)后血瘀、腹痛、疝氣作痛、跌打腫痛等，為蒙醫(yī)常用藥材，已證明其主要活性成分是延胡索乙素等生物堿類(lèi)化合物[1]。目前，蒙藥延胡索中生物堿的富集方法主要采用大孔吸附樹(shù)脂技術(shù)，其純度最高可達(dá)82%[2]。離子交換樹(shù)脂技術(shù)和液- 液萃取技術(shù)可用于分離純化生物堿，其中液- 液萃取法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單易行，而離子交換樹(shù)脂法只用于堿性物質(zhì)的富集，但產(chǎn)品純度較高[3-6]。本文通過(guò)液- 液萃取技術(shù)、大孔吸附樹(shù)脂技術(shù)和離子交換樹(shù)脂技術(shù)比較，建立蒙藥延胡索生物堿的富集方法，為其進(jìn)一步開(kāi)發(fā)提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器及藥品

Bruker AV400 核磁共振波譜儀（德國(guó)Bruker 公司）；乙醇（分析純）；732 型強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂（分析級(jí)）；延胡索購(gòu)自浙江省盤(pán)山中藥材有限公司。

1.2 供試品的制備

取20 g 藥材，加入200 mL75%乙醇回流提取2.0 h，提取2次，過(guò)濾濃縮除去乙醇獲得供試品。提取液經(jīng)732 型強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂充分吸附，依次用100.0 mL 水和100.0 mL 乙醇-氨水溶液(v:v，100:1)洗滌，流速10 BV/h，濃縮乙醇- 氨水餾，固體用d-CDCl3溶解。

2 結(jié)果與分析

2.1 1H 核磁共振波譜解析

1H 核磁共振波譜技術(shù)常用于植物的代謝組分分析[7]。蒙藥材醋酸延胡索中生物堿主要是原小檗生物堿化合物，其1H NMR特征信號(hào)峰是與氮相連的烷基質(zhì)子δ 2.00-2.50 ppm；與苯環(huán)相連的烷基質(zhì)子信號(hào)δ 3.10-3.20 ppm；氮和苯環(huán)同時(shí)相連的烷基質(zhì)子信號(hào)δ 4.00-4.20 ppm；甲氧基質(zhì)子信號(hào)δ 3.73-3.90 ppm；二氧甲基質(zhì)子信號(hào)δ 5.86-6.06 ppm；苯環(huán)質(zhì)子信號(hào)δ 6.50-7.50 ppm[8]。離子交換樹(shù)脂法制備供試品進(jìn)行1H NMR 檢測(cè)，見(jiàn)圖1。從圖中可見(jiàn)，樣品的信號(hào)與原小檗生物堿化合物的特征峰相吻合，并且雜質(zhì)峰較少，說(shuō)明其總生物堿純度較高。

圖1 1H NMR 譜圖

2.2 不同富集方法比較

將三分提取液分別經(jīng)液- 液萃取法、大孔吸附樹(shù)脂法和離子交換樹(shù)脂法富集生物堿。液- 液萃取法在富集過(guò)程中容易出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，并且重現(xiàn)性差。離子交換樹(shù)脂法和大孔吸附樹(shù)脂法富集生物堿的種類(lèi)相似，但離子交換樹(shù)脂法的總生物堿純度較好，且能夠富集水溶性生物堿。因此，離子交換樹(shù)脂法富集生物堿效果優(yōu)于大孔吸附樹(shù)脂法和液- 液萃取法。

2.3 重復(fù)性

按實(shí)驗(yàn)方法制備5 批樣品，分別經(jīng)離子交換樹(shù)脂分離純化總生物堿，經(jīng)1H NMR 檢測(cè)，主要化合物基本一致，稱(chēng)其質(zhì)量，RSD ＜6.7%。

結(jié)束語(yǔ)

本文應(yīng)用離子交換樹(shù)脂法富集延胡索中生物堿。該法操作簡(jiǎn)單，重復(fù)性好，為其他蒙藥研究的具有借鑒的意義。