韓超逸,湯德元,楊志剛,晏仁潭
(貴州大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院,貴州貴陽550025)
兔大腸桿菌病又稱黏液性腸炎,是家兔養(yǎng)殖中的1種常見多發(fā)病,由致病性大腸桿菌引起,已成為目前危害家兔養(yǎng)殖業(yè)的主要傳染病之一[1];在自然感染病例中發(fā)病率為50%~68%,病死率為50%~92.3%[2]。該病發(fā)病誘因較多,如飼養(yǎng)管理不當(dāng)導(dǎo)致腸道菌群紊亂,天氣突變和更換兔舍、飼料導(dǎo)致應(yīng)激反應(yīng)使免疫力下降,感染兔球蟲病后誘發(fā)大腸桿菌病等[3]?,F(xiàn)將貴州省畢節(jié)市某兔場暴發(fā)大腸桿菌病的診斷及治療介紹如下,供臨床參考。
2019年10月中旬,該養(yǎng)兔場的300只仔兔有50余只相繼出現(xiàn)腹瀉癥狀,發(fā)病率17%,7只嚴重者脫水死亡,病死率14%。該兔場曾使用氟苯尼考、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、微生物制劑對病兔進行治療但效果不佳。養(yǎng)殖場對飼養(yǎng)用水進行化驗,發(fā)現(xiàn)總菌群數(shù)超標,但排除金黃色葡萄球菌、傷寒沙門氏菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌導(dǎo)致疫情的可能性。養(yǎng)殖場對飲用水采用高錳酸鉀進行消毒,一定時間內(nèi)對病情有控制作用,但并未徹底根治。
發(fā)病兔精神沉郁,食欲減退,脫水消瘦,四肢無力呈俯臥姿勢,排水樣糞便,肛門周圍被毛被糞便污染。主要病理變化為盲腸水腫、脹氣,腸壁擴張,腸內(nèi)充滿水樣糞便(見圖1)。其他器官未見實質(zhì)性病變。
3.1 細菌分離培養(yǎng)采集腸管內(nèi)糞便在超凈工作臺內(nèi)分別劃線接種于麥康凱培養(yǎng)基、SS培養(yǎng)基,37 ℃培養(yǎng)12 h。結(jié)果:SS培養(yǎng)基及麥康凱培養(yǎng)基均有大量光滑、濕潤、粉紅色、圓形菌落生長(見圖2、圖3)。
3.2 分離菌純培養(yǎng)及染色鏡檢分別從麥康凱培養(yǎng)基及SS培養(yǎng)基中挑取單個菌落接種于LB肉湯培養(yǎng)基,37 ℃振蕩培養(yǎng)12 h。結(jié)果:肉湯變渾濁并有沉淀。取LB肉湯純培養(yǎng)物進行革蘭氏染色鏡檢,可見大量呈短桿狀、兩端鈍圓、散落或聚集排列的革蘭氏陰性桿菌(見圖4),初步鑒定為大腸桿菌。
3.3 生化試驗分別從麥康凱培養(yǎng)基、SS培養(yǎng)基挑取單個菌落接種于葡萄糖、乳糖、甘露醇、甲基紅、V-P、枸櫞酸鹽、H2S生化試驗管,放置37 ℃培養(yǎng)箱中12 h。結(jié)果:分離菌能分解麥芽糖、乳糖、葡萄糖、甘露醇,產(chǎn)酸產(chǎn)氣;甲基紅試驗為陽性,枸櫞酸鹽、H2S、V-P試驗為陰性(見表1),符合大腸桿菌的生化特征,鑒定為大腸桿菌。
3.4 動物回歸試驗取LB肉湯純培養(yǎng)物以100倍生理鹽水進行稀釋,抽取稀釋液0.5 mL分別對健康小鼠進行腹腔注射。結(jié)果:小鼠出現(xiàn)畏寒發(fā)抖、精神不振的癥狀,但并未出現(xiàn)死亡,表明分離菌為致病性大腸桿菌。
表1 分離菌生化試驗結(jié)果
根據(jù)病兔臨床癥狀、病理變化以及細菌分離培養(yǎng)、染色鏡檢、生化試驗、動物回歸試驗,確診為大腸桿菌病。
取LB肉湯菌液,劃線接種于LB培養(yǎng)基,待菌液吸收完全后,在LB培養(yǎng)基表面貼上13種藥敏紙片,將培養(yǎng)皿放置37 ℃培養(yǎng)箱中12 h,測定抑菌圈大小。結(jié)果:分離菌對慶大霉素、頭孢曲松高度敏感,對其他藥物表現(xiàn)低敏或耐藥。見表2。
表2 藥敏試驗結(jié)果
6.1隔離病兔,對飼養(yǎng)用具、兔舍、飼養(yǎng)用水進行嚴格消毒。
6.2根據(jù)藥敏試驗結(jié)果采取藥物治療方案:肌內(nèi)注射慶大霉素2~4 mg/kg,每日2次;肌內(nèi)注射頭孢曲松鈉25~50 mg/kg,腹腔注射5%葡萄糖注射液20~50 mL,每日1次;內(nèi)服碳酸氫鈉片0.5~5 g,每日1次,以補充能量及維持電解質(zhì)平衡。連續(xù)用藥3天后病情得到有效控制,無新病例出現(xiàn)。
6.3兔大腸桿菌病是兔的常見疾病,一年四季均可發(fā)病,且大腸桿菌易產(chǎn)生耐藥性,所以加強防控是重要環(huán)節(jié)。在潮濕或陰雨天氣要注意飼料防潮,以防飼料發(fā)生霉變,特別要注意斷奶仔兔的飼喂,以免發(fā)生胃腸失調(diào)[4]??稍陲暳现刑砑狱S芪200 mg/kg,提高兔群免疫力[5]。同時要注意其他疾病的防控(如球蟲病等),以免引起繼發(fā)性大腸桿菌病。注重兔場的清潔衛(wèi)生,及時對兔舍、水槽、飼養(yǎng)用具進行清洗消毒,對糞便及時進行清掃。兔舍的飼養(yǎng)數(shù)量要適中,不可過度擁擠。在天氣變化時要注意兔群狀態(tài),適時使用抗應(yīng)激藥物保證兔群的健康。