杜洪志，鄭 英，陳志琳，王建科，張 敏，劉亞琴，李 瑋▲

(1貴州中醫(yī)藥大學，貴州 貴陽 550025；2國藥集團同濟堂(貴州)制藥有限公司，貴州 貴陽 550000)

白術為菊科植物白術(AtractylodesmacrocephalaKoidz.)的干燥根莖，其性溫、味甘，入脾、胃二經，具有健脾益氣、燥濕利水、固表止汗、安胎之功效[1]。為臨床常用的大宗傳統(tǒng)藥材，因其藥性平和，又有補益作用，《神農本草經》中將其列為上品。白術中主要含有內酯類、苷類、多糖類、揮發(fā)油以及氨基酸等成分[2-5]，具有免疫調節(jié)、利水、降血脂、降血糖、安胎等藥理作用[6-10]。

中藥飲片質量的優(yōu)劣，傳統(tǒng)以外觀性狀為主要判斷依據(jù)，即是“辨狀論質”評價中藥質量[11]。白術為常用的大宗傳統(tǒng)特色藥材，臨床運用廣泛，市場交易量較大，有文獻報道，白術商品藥材市場上多按個頭大小進行分等，在1984年版衛(wèi)生部頒布的《七十六種藥材商品規(guī)格標準》中[12]，白術藥材以大小為主要劃分依據(jù)分為四等，但有研究報道該商品規(guī)格劃分不符合市場情況，并提出相關分級依據(jù)[13]。但是，分級依據(jù)多為外觀性狀和內在質控指標進行綜合分析，由于中藥飲片最終的目的是用于實際臨床，質量的好壞不僅注重內在和外在質量，更要結合臨床療效進行評價，建立藥效學評價模式，進一步完善中藥飲片“按質論價”“按質應用”，從而保證臨床用藥的安全有效，而目前，結合藥效學試驗結果進行白術飲片等級劃分的相關研究未見報道。

基于此，本文以白術飲片為研究對象，根據(jù)傳統(tǒng)外觀性狀的主要評價指標進行等級劃分，采用番瀉葉“苦寒瀉下”法，建立小鼠腹瀉模型，研究白術不同等級飲片對小鼠腹瀉的改善作用。研究結果為進一步完善白術飲片等級評價模式和指導臨床用藥提供科學依據(jù)，同時，也為其他飲片的等級質量評價提供新的研究思路。

1 材料

1.1 動物

KM小鼠，SPF級，體重18～22 g，由長沙市天勤生物技術有限公司提供，試驗動物合格證號：SCXK(湘)2014-0011，分開籠子飼養(yǎng)，自由進食飲水，室溫20～25 ℃，相對濕度40%～60%，12 h明暗交替。

1.2 試藥

鹽酸洛哌丁胺膠囊(批號：170417811，西安楊森制藥有限公司)，生理鹽水(批號：178040726，辰新藥業(yè)股份有限公司)。白術飲片采集或采購于四川保新、浙江杭州、河北唐山、安徽亳州、貴州遵義共5批，經貴州中醫(yī)藥大學魏升華教授鑒定為菊科植物白術AtractylodesmacrocephalaKoidz.的干燥根莖。

2 方法和結果

2.1 白術飲片傳統(tǒng)等級劃分要點及方法

通過文獻資料的查閱及2015版《中國藥典》對白術外觀性狀的描述，將收集的白術生品飲片進行等級初步劃分，每個批次擬分成三個等級進行研究，白術生品飲片不同等級劃分指標及樣品圖見表1和圖1。

表1 白術生品飲片不同等級劃分指標

圖1 白術生品飲片不同等級樣品圖

2.2 動物分組

取體重為18～22 g的健康KM小鼠180只，適應環(huán)境5 d后，隨機分為18組，每組10只，雌雄各半。即正常對照組、模型組、陽性對照組、四川保新一級飲片組、四川保新二級飲片組、四川保新三級飲片組、浙江杭州一級飲片組、浙江杭州二級飲片組、浙江杭州三級飲片組、河北唐山一級飲片組、河北唐山二級飲片組、河北唐山三級飲片組、安徽亳州一級飲片組、安徽亳州二級飲片組、安徽亳州三級飲片組、貴州遵義一級飲片組、貴州遵義二級飲片組、貴州遵義三級飲片組。

2.3 模型建立

除空白對照組正常喂養(yǎng)，其他組每天給藥9%番瀉葉，給藥量為0.3 mL/10g，連續(xù)灌胃10 d，建立小鼠腹瀉模型。

2.4 給藥方法

陽性對照組灌胃鹽酸洛哌丁胺藥液，空白對照及模型組灌胃生理鹽水10 mL/kg，給藥量以生藥量計算20 g/kg，給藥容量為0.2 mL/10g。持續(xù)給藥7 d，于末次給藥后1 h，將已禁食(不禁水)24 h的小鼠灌胃給予墨汁，每只0.2 mL/10g，20 min后脫頸椎處死小鼠，開腹，取出小腸及脾臟將小腸拉成直線，測量小腸的全長及幽門至黑色前沿的距離。以幽門至黑色前沿的距離占小腸全長的百分率為小腸推進率。

墨汁推進率=墨汁在腸內推進距離(cm)/小腸全長(cm)×100%

2.5 藥效試驗結果

觀察記錄各組小鼠體重、墨汁推進率和脾臟重量，采用SPSS20.0軟件進行統(tǒng)計學處理，研究白術不同等級飲片對小鼠的健脾作用的影響，結果見表2。

表2 白術不同等級樣品對小鼠腸推進、體質量、以及脾臟指數(shù)測定結果(n=10)

對小鼠腸推進率的影響：模型組與空白組比較具有極顯著性差異(P<0.01)，結果表明腹瀉病理模型基本建立；與模型組比較，陽性對照組和白術不同等級飲片給藥組均有極顯著性差異(P<0.01)，表明陽性藥組與白術不同等級飲片給藥組均均有良好的改善小鼠腹瀉的作用。同時，白術一級飲片的改善效果均高于二級、三級飲片(P<0.05)，二級飲片與三級飲片之間無顯著性差異(P>0.05)。

對小鼠體質量的影響：模型組與空白組比較具有顯著性差異(P<0.05)，結果表明腹瀉病理模型對小鼠體質量有顯著影響；與模型組比較，陽性對照組和不同產地白術一級飲片組均有顯著性差異(P<0.05)，二級飲片與三級飲片組無顯著性差異(P>0.05)，但體質量大部分高于模型組，表明白術飲片能增加小鼠體重，改善腹瀉模型小鼠的體質量。

對小鼠脾臟指數(shù)的影響：模型組與空白組比較具有顯著性差異(P<0.05)，結果表明腹瀉病理模型對小鼠脾臟指數(shù)有顯著影響；與模型組比較，陽性對照組和不同等級給藥組均有顯著性差異(P<0.05)，且白術一級飲片的脾臟指數(shù)均高于二級、三級飲片，二級飲片與三級飲片組無顯著性差異(P>0.05)，說明白術一級飲片對小鼠脾臟指數(shù)改善作用優(yōu)于二級、三級飲片。

3 結論與討論

通過白術不同等級飲片對小鼠腹瀉模型的改善作用，與模型組比較，不同等級給藥組對小鼠腸推進率、體質量、脾臟指數(shù)的影響均具有顯著性差異(P<0.05)，表明白術不同等級給藥組均有改善小鼠腹瀉作用。同時，一級飲片對小鼠腹瀉模型的改善作用優(yōu)于二級、三級飲片(P<0.05)，且二級、三級飲片的藥效作用無顯著性差異(P>0.05)，結果表明根據(jù)傳統(tǒng)外觀性狀進行白術等級劃分的結果中，可將二級和三級飲片合并為一個等級，即白術飲片分為兩個等級，一級飲片：長度(直徑)3～9 cm，厚度2～4 cm，斷面深紅棕色或深褐色，具有多且密集的油室，蜂窩狀，有裂隙，具有較明顯的“菊花紋理”，質地較堅硬，不易折斷，香氣濃烈；二級飲片：長度(直徑)2～8 cm，厚度2～4 cm，斷面紅褐色、紅棕色或黃白色，油室較少且稀疏，或無油室，蜂窩狀較少或無蜂窩狀，少有裂隙或無裂隙，部分具有“菊花紋理”，質地堅硬，易折斷，有香氣或香氣較淡。

目前，直接用于臨床的白術飲片，在中藥飲片市場和企業(yè)都以統(tǒng)貨形式進行銷售，導致前期藥材的等級劃分不能有效應用于實際臨床，未能“按質應用”，從而不能保證臨床用藥的安全有效。通過文獻資料查閱，已有相關白術商品藥材等級質量評價的研究報道[13]，但均以外觀性狀和部分質控指標為主要劃分依據(jù)，然中藥飲片屬于特殊商品，其主要目的和價值在于治病救人，若沒有相關的藥效作支撐，中藥飲片等級劃分的結果將與作為藥品的特殊價值和意義不相符。因此，在傳統(tǒng)等級劃分的基礎上，結合相關的藥效學試驗進行考證，找到其中的共性規(guī)律，研究的結果更接近于實際臨床，使中藥飲片等級劃分的依據(jù)更具有科學性和合理性。

中藥材及中藥飲片的等級劃分多采用傳統(tǒng)方法與現(xiàn)代科學方法相結合的分級方法，既可以為傳統(tǒng)分級方法提供科學的現(xiàn)代科技支撐，也能滿足分級方法簡便、實用的行業(yè)需求。本實驗將外觀性狀和藥效學試驗結果的有機結合起來，進行評價分析，從藥效學角度對白術不同等級飲片進行研究，該方法為白術生品飲片的等級劃分提供一定參考。同時，也為其他飲片的“按質論價”提供新的思路。由于收集樣品數(shù)量有限，未來仍需進行更多批次的樣品研究，以進一步豐富和完善白術生品飲片等級質量評價體系。